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      重庆市巴蜀中学2025-2026学年高二下学期5月期中考试生物试卷(Word版附解析)

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      重庆市巴蜀中学2025-2026学年高二下学期5月期中考试生物试卷(Word版附解析)

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      这是一份重庆市巴蜀中学2025-2026学年高二下学期5月期中考试生物试卷(Word版附解析),共14页。试卷主要包含了 以碳链为骨架的小分子单体等内容,欢迎下载使用。
      1.答题前,考生务必将自己的姓名、准考证号、班级、学校在答题卡上填写清楚。
      2.每小题选出答案后,用2B铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑,如需改动,用橡皮擦干净后,再选涂其他答案标号。在试卷上作答无效。
      3.考试结束后,请将答题卡交回,试卷自行保存。满分100分,考试用时75分钟。
      一、选择题:本题共20小题,每小题2分。在每小题给出的四个选项中,只有一项是符合题目要求的。
      1. 科研人员发现了一种2厘米长的华丽硫珠菌,该细菌可利用氧化含硫化合物获得的能量将CO2合成糖类。以下说法错误的是( )
      A. 该细菌代谢类型不同于异养型细菌,体现了细胞的多样性
      B. 该细菌遗传物质是DNA,体现了细胞的统一性
      C. 该细菌没有线粒体及其他细胞器,体现了细胞的多样性
      D. 该细菌以ATP作为直接能源物质,体现了细胞的统一性
      【答案】C
      【解析】
      【详解】A、该细菌可通过氧化含硫化合物的能量合成有机物,属于化能自养型生物,代谢类型和异养型细菌存在差异,是细胞多样性的体现,A正确;
      B、细胞结构生物的遗传物质均为DNA,该细菌属于原核细胞生物,遗传物质为DNA,体现了细胞的统一性,B正确;
      C、该细菌为原核生物,不具有线粒体等复杂的具膜细胞器,但含有核糖体这一种细胞器,C错误;
      D、所有细胞生物都以ATP作为生命活动的直接能源物质,体现了细胞在能量代谢上的共性,属于细胞统一性的体现,D正确。
      2. 某病毒是一种包膜RNA病毒,依靠表面刺突蛋白结合人体细胞特定受体后侵入细胞,其包膜含胆固醇、磷脂等成分。下列相关叙述正确的是( )
      A. 该病毒含有核糖体,可自主合成蛋白质
      B. 该病毒的包膜可来自宿主细胞膜,胆固醇能维持包膜的稳定性
      C. 该病毒通过胞吞进入细胞,体现了细胞膜的选择透过性
      D. 该病毒的遗传物质集中分布在拟核区域
      【答案】B
      【解析】
      【详解】A、病毒不具有细胞结构,不含核糖体等任何细胞器,只能利用宿主细胞的核糖体合成自身的蛋白质,A错误;
      B、包膜病毒在宿主细胞内组装完成后,通常以出芽的方式释放,会裹挟宿主细胞膜成分形成自身包膜;胆固醇是动物细胞膜的重要组成成分,具有维持膜结构稳定性的作用,因此也能维持该病毒包膜的稳定性,B正确;
      C、胞吞过程依赖细胞膜的形态改变完成,体现的是细胞膜具有一定流动性的结构特点,选择透过性是细胞膜控制物质进出的功能特点,胞吞过程不能体现该特点,C错误;
      D、拟核是原核细胞中遗传物质集中分布的区域,病毒没有细胞结构,不存在拟核结构,D错误。
      3. COX17是一种铜伴侣蛋白,它可将结合的铜离子运送到线粒体膜间隙,最终参与线粒体内膜上细胞色素c氧化酶活性中心的组成。下列叙述错误的是( )
      A. 铜元素在细胞中含量很少但是生命活动必需的,属于微量元素
      B. COX17运输铜离子的功能由其氨基酸序列与空间结构决定
      C. 铜离子参与构成细胞色素c氧化酶,说明无机盐可参与构成复杂化合物
      D. 只要铜离子供应不足,就会影响细胞的能量供应
      【答案】D
      【解析】
      【详解】A、细胞中的微量元素包括Fe、Mn、Zn、Cu、B、M等,铜元素在细胞中含量极少,却是维持正常生命活动必不可少的元素,属于微量元素,A正确;
      B、COX17是蛋白质,蛋白质的功能由其结构决定,蛋白质的结构取决于组成它的氨基酸的种类、数目、排列顺序(即氨基酸序列)和肽链的空间结构,因此其运输铜离子的功能由氨基酸序列与空间结构决定,B正确;
      C、无机盐的功能之一是参与构成细胞内的复杂化合物,铜离子参与构成细胞色素c氧化酶的活性中心,可体现无机盐的该功能,C正确;
      D、铜离子参与构成的细胞色素c氧化酶是有氧呼吸第三阶段所需的酶,铜离子供应不足时,细胞仍可通过无氧呼吸产生能量,且细胞内存在一定的铜离子储备,短时间供应不足未必会影响能量供应,D错误。
      4. 初步研究表明,β-AP寡聚合物的形成可能与“阿尔茨海默病”相关。β-AP是由前体蛋白APP(一种含695个氨基酸的跨膜蛋白)在病理状态下异常加工而成的。APP形成β-AP的过程如图所示。根据上述信息,下列推论正确的是( )
      A. 一个β-AP分子中至少含有39个肽键
      B. APP被酶切后形成的多肽相对分子质量之和增加了36
      C. APP具有与磷脂分子的头部相结合的疏水区域
      D. 经高温处理后的APP无法与双缩脲试剂发生紫色反应
      【答案】B
      【解析】
      【详解】A、由图示切割位点可知,β-AP含有的氨基酸数为635-596=39个,若为链状肽,肽键数=氨基酸数-肽链数=39-1=38个,A错误;
      B、APP被两种酶切割,共断裂2个肽键,每断裂1个肽键需要消耗1分子水(相对分子质量为18),因此切割后形成的多肽总相对分子质量比原APP增加了2×18=36,B正确;
      C、磷脂分子的头部为亲水端,尾部为疏水端,APP是跨膜蛋白,其疏水区域是与磷脂双分子层内部的疏水尾部结合,C错误;
      D、高温仅破坏蛋白质的空间结构,不会断裂肽键,双缩脲试剂可与肽键发生紫色反应,因此高温处理后的APP仍可与双缩脲试剂反应,D错误。
      5. 以碳链为骨架的小分子单体(S1……Sn)能构成许多不同的多聚体,模式图如下。下列说法错误的是( )
      A. 若图中多聚体为DNA,则其彻底水解产物有5种
      B. 若图中多聚体为多糖,则其可能含有N元素
      C. 若图中多聚体为蛋白质,则其单体可能有21种
      D. 若图中多聚体为RNA,则其可能含有氢键
      【答案】A
      【解析】
      【详解】A、DNA彻底水解产物包括1种磷酸、1种脱氧核糖、4种含氮碱基(A、T、G、C),共6种,A错误;
      B、多数多糖的元素组成为C、H、O,少数多糖如几丁质含有N元素,因此多糖可能含有N元素,B正确;
      C、组成生物体蛋白质的氨基酸共有21种,若多聚体为蛋白质,其单体氨基酸最多有21种,C正确;
      D、RNA多为单链,但如tRNA存在局部双链配对区域,含有氢键,因此RNA可能含有氢键,D正确。
      6. 生物学问题通常需要运用一系列科学方法和思维,并借助各种工具和资源来解决。下列有关科学方法的叙述,正确的是( )
      A. 拍摄洋葱表皮细胞的显微照片就是建立了细胞的物理模型
      B. 欧文顿通过对膜成分的提取和鉴定,认识到细胞膜是由脂质组成的
      C. 利用斐林试剂检测还原糖时,加入样液后即可观察到砖红色沉淀产生
      D. 5倍物镜下观察到16个细胞排成一行,换成10倍物镜能看到8个细胞
      【答案】D
      【解析】
      【详解】A、物理模型是以实物或图画形式直观表达认识对象特征的模型,拍摄洋葱表皮细胞的显微照片是实物成像,不属于物理模型,A错误;
      B、欧文顿通过对多种化学物质的细胞膜通透性实验现象,推测细胞膜由脂质组成,并未对膜成分进行提取和鉴定,B错误;
      C、利用斐林试剂检测还原糖时,加入样液后需要水浴加热才能观察到砖红色沉淀,直接加入样液后无砖红色沉淀产生,C错误;
      D、显微镜的放大倍数是对观察对象长度或宽度的放大倍数,一行细胞的观察数目与放大倍数成反比,换镜放大倍数变为原来的10÷5=2倍,观察到的细胞数目为16÷2=8个,D正确。
      7. 下列关于细胞膜的结构与功能叙述,正确的是( )
      A. 细胞膜外表面的糖类分子,主要功能是参与物质运输
      B. 细胞间信息交流都依赖细胞膜表面的受体蛋白完成
      C. 细胞膜的选择透过性与转运蛋白、磷脂双分子层等有关
      D. 功能越复杂的细胞膜,蛋白质与脂质的种类与数量就越多
      【答案】C
      【解析】
      【详解】A、细胞膜外表面的糖类分子构成糖被,主要功能是细胞识别、保护、润滑等,参与物质运输的是细胞膜上的转运蛋白,A错误;
      B、细胞间信息交流不都依赖细胞膜表面的受体蛋白,例如高等植物细胞可通过胞间连丝直接进行信息交流,性激素等固醇类激素的受体位于细胞内,B错误;
      C、磷脂双分子层允许脂溶性小分子自由通过,离子、非脂溶性小分子的运输需要转运蛋白协助,因此细胞膜的选择透过性与转运蛋白、磷脂双分子层都有关,C正确;
      D、蛋白质是生命活动的主要承担者,功能越复杂的细胞膜,蛋白质的种类和数量越多,脂质的种类和数量不会随细胞膜功能复杂程度升高而明显增加,D错误。
      8. 肌动蛋白是细胞骨架的主要成分之一。研究表明,Cfilin-1是一种能与肌动蛋白相结合的蛋白质,介导肌动蛋白进入细胞核。Cfilin-1缺失可导致肌动蛋白结构和功能异常,引起细胞核变形,核膜破裂,染色质功能异常。下列有关叙述错误的是( )
      A. Cfilin-1可介导肌动蛋白通过核孔随意进出细胞核
      B. Cfilin-1缺失可能会导致细胞无法正常分裂
      C. Cfilin-1缺失可能会影响细胞内核与质的信息交流
      D. Cfilin-1缺失可能会影响细胞核控制细胞代谢的能力
      【答案】A
      【解析】
      【详解】A、核孔是具有选择性的物质运输通道,即便有Cfilin-1介导,肌动蛋白的运输也受到调控,无法“随意”进出细胞核,A错误;
      B、细胞分裂过程中细胞核、染色质会发生规律性的变化,Cfilin-1缺失会导致细胞核变形、核膜破裂、染色质功能异常,可能使细胞无法正常完成分裂过程,B正确;
      C、核膜、核孔是核质之间信息交流的结构基础,Cfilin-1缺失导致核膜破裂、细胞核结构异常,会影响核与质的信息交流,C正确;
      D、细胞核是细胞代谢和遗传的控制中心,该功能依赖正常的细胞核结构和染色质功能,Cfilin-1缺失导致细胞核结构受损、染色质功能异常,会影响细胞核控制细胞代谢的能力,D正确。
      9. 下列关于传统发酵技术的叙述,不正确的是( )
      A. 制作泡菜时,菜料需完全淹没在煮沸后冷却的盐水中,有利于抑制杂菌增殖
      B. 制作腐乳时,毛霉可将豆腐中的蛋白质水解为多肽和氨基酸
      C. 葡萄酒发酵时,葡萄需去梗后多次清洗,避免表皮携带的杂菌污染
      D. 酵母菌酒精发酵与醋酸杆菌醋酸发酵,对通气条件的控制存在差异
      【答案】C
      【解析】
      【详解】A、制作泡菜时,煮沸盐水可杀灭盐水中的杂菌,冷却后使用可避免高温杀死乳酸菌,菜料完全淹没在盐水中可营造无氧环境,有利于乳酸菌发酵同时抑制杂菌增殖,A正确;
      B、腐乳制作的主要菌种是毛霉,毛霉分泌的蛋白酶可将豆腐中的蛋白质水解为多肽和氨基酸,B正确;
      C、葡萄酒发酵所需的菌种来源于葡萄表皮的野生型酵母菌,若先去梗再多次清洗,会大量流失葡萄表皮的酵母菌,还易造成杂菌污染,正确操作是先轻柔冲洗1~2次,再去梗,C错误;
      D、酵母菌是兼性厌氧菌,酒精发酵时先通气促进酵母菌有氧呼吸大量繁殖,之后密封创造无氧环境进行酒精发酵;醋酸杆菌是好氧菌,醋酸发酵全程需要通入无菌空气,二者对通气条件的控制存在差异,D正确。
      10. 科研人员为筛选降解秸秆的高产纤维素酶菌株,从腐木、堆肥及农田土壤环境中分离微生物,经一系列操作后获得了酶活性较强的菌株。下图为纯化菌株过程中得到的培养结果图。下列叙述正确的是( )
      A. 该结果是经稀释涂布平板法接种后培养得到的
      B. 得到该培养结果的过程中接种工具灼烧了6次
      C. 培养基中单菌落都是由单个细菌繁殖而来的子细胞群体
      D. 将装有固体培养基的培养皿倒过来放置的过程称为“倒平板”
      【答案】B
      【解析】
      【详解】A、图示菌落有明显的划线分区痕迹,是平板划线法接种培养得到的,稀释涂布平板法接种后菌落均匀分布在培养基表面,A错误;
      B、平板划线法操作中,接种前需要灼烧接种环灭菌,每完成一次划线后都要灼烧接种环,保证下一次划线的菌种来自上一次划线的末端,全部划线结束后还要灼烧接种环以杀死残留的菌种;图中共有5个划线区域,因此接种工具共灼烧5+1=6次,B正确;
      C、单菌落理想状态下是单个细菌繁殖而来的子细胞群体,若有多个紧挨的细菌共同繁殖也可形成单菌落,C错误;
      D、“倒平板”是指将灭菌融化的培养基倒入培养皿的操作,培养基冷却凝固后将培养皿倒置放置是为了避免冷凝水滴落污染培养基,该过程不属于倒平板,D错误。
      11. 分批发酵是一种在封闭系统中一次性投料、一次性收获的发酵方式。补料分批发酵是在分批发酵基础上,间歇或连续地向发酵系统中补加一定物料(如产物的前体物质)的发酵方式。为选择生产维生素B较优的发酵方式,工作人员分别对高产维生素B乳酸菌用上述两种方式进行发酵,结果如图甲和图乙。下列叙述错误的是( )
      注:残糖量是指发酵液中残留的糖含量
      A. 两种发酵方式中发酵液的温度、pH及培养转速等条件需相同
      B. 为避免杂菌污染,在发酵过程中应通入无菌空气
      C. 图乙为补料分批发酵方式,共进行了3次补料
      D. 补料提供了合成维生素B的前体物质进而提高了维生素B产量
      【答案】B
      【解析】
      【详解】A、本实验的自变量是发酵方式,发酵液的温度、pH及培养转速属于无关变量,对照实验中无关变量需保持相同且适宜,A正确;
      B、发酵所用的乳酸菌是厌氧型微生物,发酵需要无氧环境,通入无菌空气会抑制乳酸菌的无氧呼吸,不利于发酵进行,B错误;
      C、补料分批发酵会补加含糖的物料,补料后残糖量会突然升高,图乙中残糖量共出现3次突然升高的变化,说明共进行了3次补料,属于补料分批发酵,C正确;
      D、补料可补充合成维生素B的前体物质,对比两图可知补料发酵的维生素B浓度显著高于分批发酵,说明补料可提高维生素B产量,D正确。
      12. 科研人员将胡萝卜愈伤组织离散获得小细胞团,用海藻酸钠凝胶将其包裹,通过控制小细胞团在三维空间中的位置和密度,再诱导小细胞团发生再分化,形成胡萝卜植株。下列叙述正确的是( )
      A. 需在凝胶中添加含有大量无机盐的MS培养基来调节小细胞团的发育方向
      B. 控制小细胞团在三维空间的位置和密度有利于提高小细胞团光合作用效率
      C. 诱导小细胞团发生再分化形成胡萝卜植株,必须置于黑暗环境中进行
      D. 为提高活体结构形成率可在凝胶中适当添加抗生素以防止杂菌污染
      【答案】D
      【解析】
      【详解】A、调节小细胞团再分化的发育方向依靠的是MS培养基中生长素和细胞分裂素的配比,不是大量无机盐,A错误;
      B、小细胞团来自未分化的愈伤组织,还没有分化出叶绿体,无法进行光合作用,与提高光合作用效率无关,B错误;
      C、诱导再分化的过程需要光照,以诱导叶绿素合成,为后续植株光合作用提供基础,不需要置于黑暗环境(脱分化过程才需要避光),C错误;
      D、适当添加抗生素可以抑制杂菌繁殖,避免杂菌竞争营养、毒害植物细胞,能够提高活体结构的形成率,D正确。
      13. 双特异性抗体(如下图的抗体AB)能同时结合α、β两种抗原。传统制备方法:先分别得到能分泌抗体A和能分泌抗体B的两种杂交瘤细胞,再将两种杂交瘤细胞融合。新策略:先利用抗原α免疫小鼠,从小鼠脾中分离得到B淋巴细胞,再通过基因工程技术使这些B淋巴细胞稳定表达能结合抗原β的抗体,再将这些改造后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,筛选后获得能分泌完整双特异性抗体的杂交瘤细胞。下列叙述错误的是( )
      A. 新策略与传统制备方法分别需经过一次细胞融合和三次细胞融合过程
      B. 新策略最终筛选出的杂交瘤细胞分泌的抗体都能结合抗原β
      C. 新策略最终筛选出的杂交瘤细胞需接触抗原α、β后才能产生双特异性抗体
      D. 双特异性抗体能结合α、β两种抗原,在治疗肿瘤方面具有较好的应用前景
      【答案】C
      【解析】
      【详解】A、由题干信息可知,新策略经过一次细胞融合,即改造后的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合,而传统方法需要经过三次细胞融合,分别是分泌抗体A的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合、分泌抗体B的B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合、两种杂交瘤细胞融合,A正确;
      BD、新策略中,改造后的B淋巴细胞既能与α抗原相结合,也能与β抗原相结合,所以这种B淋巴细胞与骨髓瘤细胞融合成的杂交瘤细胞分泌的抗体也能结合β抗原,在治疗肿瘤方面具有较好的应用前景,B、D正确;
      C、杂交瘤细胞的来源是经抗原免疫过的B淋巴细胞,所以新策略筛选出的杂交瘤细胞可以自行分泌两种抗体,不需要接触抗原,C错误。
      14. 研究人员首次在实验室完整复刻人类胚胎着床过程,其技术流程如下表所示。下列说法错误的是( )
      A. 囊胚的培养可采用与动物细胞培养相同的方式进行
      B. 3D着床模型能够模拟胚胎着床过程并为胚胎早期发育提供支持
      C. 囊胚期的滋养层细胞将来会发育成胎膜和胎盘的一部分
      D. 候选药物可能通过调控胚胎细胞基因表达来影响胚胎着床率
      【答案】A
      【解析】
      【详解】A、囊胚属于早期胚胎,早期胚胎培养所需的营养成分、培养环境(如需要适配胚胎发育的特殊培养液等)与普通动物细胞培养有明显差异,不能采用完全相同的方式培养,A错误;
      B、题干明确说明3D着床模型可模拟体内子宫微环境,且能实时记录胚胎黏附、侵入、分化等过程,说明其可以模拟胚胎着床过程并为早期胚胎发育提供支持,B正确;
      C、囊胚期的滋养层细胞将来会发育为胎膜和胎盘的一部分,内细胞团将来发育为胎儿的各种组织,C正确;
      D、基因表达调控会影响细胞的增殖、分化等生命活动,候选药物可通过调控胚胎细胞的基因表达改变胚胎的生命活动,进而影响胚胎着床率,D正确。
      15. 下列关于生物技术的叙述错误的是( )
      A. 进行抗病、抗除草剂转基因植物培育时,要注意防止基因污染
      B. 证明转基因食品不安全比证明转基因食品安全更难获得证据
      C. 彻底禁止和销毁生物武器是全世界爱好和平人民的共同期望
      D. 我国允许治疗性克隆,但不允许任何生殖性克隆人的实验
      【答案】B
      【解析】
      【详解】A、转基因植物的抗病、抗除草剂等基因可能通过花粉扩散到近缘野生种,造成基因污染,培育时需要注意防范,A正确;
      B、证明转基因食品安全需要排除所有潜在危害,需要大量长期的实验证据,而证明不安全只要找到一例明确的有害证据即可,因此证明转基因食品安全比证明其不安全更难获得证据,B错误;
      C、生物武器具有传染性强、传播范围广、危害时间长等特点,对人类安全威胁极大,彻底禁止和销毁生物武器是全世界爱好和平人民的共同期望,C正确;
      D、我国政府对克隆技术的态度是禁止生殖性克隆人,坚持不赞成、不允许、不支持、不接受任何生殖性克隆人实验的原则,但不反对治疗性克隆,D正确。
      16. 基因工程需要使用多种工具酶,有4种限制酶的切割位点如下图所示。下列相关叙述错误的是( )
      A. 限制酶主要是从原核生物中分离纯化出来的,能识别特定核苷酸序列
      B. 用限制酶SmaⅠ和EcRⅤ切割后产生的均为平末端
      C. 相应序列被PstⅠ切割后产生的黏性末端无法用DNA聚合酶补齐成平末端
      D. 含有1个EcRⅠ识别位点的环状DNA,被EcRⅠ切割后可形成2个DNA片段
      【答案】D
      【解析】
      【详解】A、限制酶主要从原核生物中分离纯化获得,其功能特点是能够识别特定的核苷酸序列,并切割特定位点的磷酸二酯键,A正确;
      B、由图可知,SmaⅠ和EcRⅤ都在识别序列的对称轴位置切割双链DNA,切割后产生的均为平末端,B正确;
      C、PstⅠ切割后产生的是3'端突出的黏性末端,DNA聚合酶只能沿5'→3'方向合成DNA,需要游离的3'羟基作为延伸起点,无法对3'突出的黏性末端进行补齐得到平末端,C正确;
      D、仅含1个酶切位点的环状DNA被限制酶切割后,环状结构打开形成1个线性双链DNA片段,D错误。
      17. 人类γ基因启动子上游的调控序列中含有BCL11A蛋白结合位点,该位点结合BCL11A蛋白后,γ基因的表达被抑制。科研人员扩增了γ基因上游7种不同长度的片段,将7种不同长度的片段分别插入载体中形成7种表达载体,指导荧光蛋白基因表达,以确定BCL11A蛋白结合位点的具体位置。下列有关叙述错误的是( )
      A. 需在引物F1~F7的5'端和引物R的5'端分别添加限制酶EcRⅠ和SalⅠ的识别序列
      B. 本实验中,从PCR产物扩增到表达载体构建完成的整个过程共需要6种酶
      C. 7种表达载体分别导入敲除BCL11A基因的细胞,成功导入的受体细胞也可能无荧光
      D. 向出现荧光的细胞培养液中添加适量的雌激素,可导致部分受体细胞不再有荧光
      【答案】A
      【解析】
      【详解】A、据题意可知,需要将扩增后的产物定向插入并指导荧光蛋白基因的表达,则含有启动子的扩增后的产物读取方向与荧光蛋白基因的读取方向一致,故扩增后的产物中的R端与荧光蛋白基因中限制酶Mun Ⅰ 识别序列端结合,才能保证扩增后的产物定向插入并指导荧光蛋白基因的表达。要做到定向插入,需要引物末端两端添加限制酶的识别序列,且被限制酶识别并切割后,两端的黏性末端不能相同。而扩增后的产物中可能含有MunⅠ和XhⅠ的识别位点,故在引物末端添加限制酶的识别序列不能被限制酶MunⅠ和XhⅠ所识别,故应该选用添加限制酶EcRⅠ和限制酶SalⅠ识别序列,据图中对限制酶的注释可知,限制酶MunⅠ识别并切割后的黏性末端与限制酶EcRⅠ识别并切割后的黏性末端相同,故R末端添加的序列所对应的限制酶是EcR Ⅰ ,在F1~F7末端添加的序列所对应的限制酶是SalⅠ ,A错误;
      B、荧光蛋白基因中含有限制酶EcRⅠ的识别位点,故对载体使用限制酶MunⅠ和XhⅠ切割。综上所述,对载体使用限制酶MunⅠ和XhⅠ切割,对扩增后的产物用限制酶EcRⅠ和限制酶SalⅠ识别序列,然后在DNA连接酶的催化作用下,连接形成重组载体;产物扩增中需要使用Taq酶催化,合成更多的产物,故从产物扩增到载体构建完成的整个过程共需要6种酶,分别是Taq酶、限制酶EcRⅠ 、限制酶SalⅠ、限制酶MunⅠ 、限制酶XhⅠ 、DNA连接酶,B正确;
      C、7种表达载体分别导入敲除BCL11A基因的细胞,成功导入的受体细胞可能因为调控序列或启动子本身存在缺陷,导致荧光蛋白基因仍无法正常表达,C正确;
      D、添加雌激素后,启动子P被激活,BCL11A蛋白表达;若插入的片段包含BCL11A结合位点,BCL11A蛋白会结合该位点,抑制γ基因启动子驱动的荧光蛋白表达,导致部分受体细胞不再有荧光,D正确。
      18. 下列关于PCR扩增DNA片段及琼脂糖凝胶电泳鉴定实验的叙述,正确的是( )
      A. PCR预变性步骤设置较长时间,可保证模板DNA充分变性解旋
      B. PCR复性阶段温度过低,会直接导致完全无法扩增出DNA片段
      C. DNA在凝胶中的电泳迁移速率,仅与分子大小和构象有关,与凝胶浓度无关
      D. 实验时需将PCR产物、核酸染料和载样缓冲液混合后,直接加入电泳缓冲液中
      【答案】A
      【解析】
      【详解】A、PCR预变性步骤设置较长时间,可使模板双链DNA充分解旋为单链,为后续扩增提供充足模板,A正确;
      B、PCR复性阶段温度过低,会导致引物和模板发生非特异性结合,出现大量非目标扩增片段,B错误;
      C、DNA在凝胶中的电泳迁移速率除与分子大小、构象有关外,还与凝胶浓度有关,C错误;
      D、混合后的样品需要加入凝胶的点样孔中进行电泳,直接加入电泳缓冲液会导致样品扩散,无法得到清晰的电泳条带,D错误。
      19. 基因工程为医药健康、生物医药、器官移植等领域提供了重要技术支撑。下列关于基因工程应用的叙述,错误的是( )
      A. 目的基因仅在乳腺生物反应器的乳腺中特异性表达,原因是其他部位的细胞不含目的基因和乳腺中特异表达的基因的启动子
      B. 利用基因工程技术生产的重组人干扰素、重组人胰岛素等药物,具有产量高、纯度高、副作用小等优点
      C. 培育转基因猪作为异种器官移植供体,可利用基因工程抑制抗原决定基因表达,再结合核移植、胚胎培养等技术
      D. 利用基因工程改造微生物获得工程菌,可大规模生产工业用酶,与天然提取相比,其产品纯度更高、成本更低、效率更高
      【答案】A
      【解析】
      【详解】A、乳腺生物反应器是将目的基因导入受精卵后发育获得的个体,其体内所有体细胞都含有目的基因以及乳腺特异性表达的启动子序列,乳腺生物反应器只能在乳腺表达目的基因产物的原因是只有乳腺细胞才能使相应启动子序列发挥作用,A错误;
      B、基因工程生产的重组人干扰素、重组人胰岛素等药物,和人体自身产生的相应物质结构功能一致,且可通过工程菌等大规模制备,具有产量高、纯度高、副作用小的优点,B正确;
      C、培育转基因猪作为异种器官移植供体时,可利用基因工程技术抑制或敲除抗原决定基因的表达,降低免疫排斥风险,再结合核移植、胚胎培养等技术获得符合要求的供体个体,C正确;
      D、经基因工程改造获得的工程菌可大规模发酵生产工业用酶,和天然提取法相比,具有产物纯度高、生产成本低、生产效率高的优势,D正确。
      20. 临床上常用组织型纤溶酶原激活物(t-PA)作为溶解血栓、抢救心肌梗死患者的特效药。然而,t-PA注射剂量大容易诱发颅内出血,利用相关技术对t-PA进行改造,以实现颅内出血倾向大幅度降低。操作过程中所用引物:引物A:5'-CCCCAACCGGAAAGTGTCA-3'(下划线字母为突变碱基);引物B:5'-TAAGCTTCGAACATCCTA-3'(下划线部分为限制酶HindⅢ识别序列);引物C:5'-GTGAGCTCGCTGCCCCAA-3'(下划线部分为限制酶SacⅠ识别序列)。下列相关叙述错误的是( )
      A. PCR1中使用的引物是引物A、引物C
      B. PCR2中使用的引物有引物B和大引物的①链
      C. 改造t-PA的实验设计思路属于蛋白质工程
      D. 改造t-PA的过程中遗传信息流向和天然t-PA合成过程不同
      【答案】B
      【解析】
      【详解】A、PCR1的目的是引入定点突变,合成“大引物”,引物A含突变碱基,负责引入突变;引物C含SacⅠ酶切位点,作为下游引物,二者可作为一对引物完成扩增,A正确;
      B、PCR2中,DNA聚合酶只能从引物的3'端延伸,因此必须以大引物的②链(含3'端延伸端)作为下游引物,而非①链,引物B(含HindⅢ位点)作为上游引物,与②链配合才能扩增出完整的突变基因,B错误;
      C、该实验通过改造t-PA基因来获得性质更优的t-PA蛋白,这属于蛋白质工程的范畴,C正确;
      D、天然t-PA的合成过程是基因表达,遗传信息流向为DNA→RNA→蛋白质。而改造t-PA的过程包括了体外的PCR扩增(DNA→DNA)和体内的基因表达(DNA→RNA→蛋白质),因此两者的遗传信息流向不同,D正确。
      二、非选择题:本题共5小题,共60分。
      21. 鼠尾藻是一种着生在礁石上的大型海洋褐藻,其枝条中上部的叶片较窄,称之狭叶;而枝条下部的叶片较宽,称之阔叶,新生出的两叶颜色均呈浅黄色,而进入繁殖期时阔叶呈深褐色。研究人员在18℃(鼠尾藻光合作用最适温度)等适宜条件下测定叶片的各项数据如下表。(注:光补偿点为总光合速率等于呼吸速率时的光照强度;光饱和点为总光合速率刚达到最大时的光照强度。)
      (1)据表分析,鼠尾藻从生长期进入繁殖期时,阔叶的光合作用强度增大,其内在原因之一是叶片的________。
      (2)依据表中________的变化,可推知鼠尾藻的狭叶比阔叶更适应________(填“弱光”或“强光”)条件,这与狭叶着生在枝条中上部,海水退潮时,会暴露于空气中的特点相适应。
      (3)在一定光照强度等条件下,测定不同温度对新生阔叶的净光合速率和呼吸速率的影响,结果如下图。
      结合表格与图分析可知,实验测定净光合速率时所设定的光照强度________(填“大于”、“等于”或“小于”)18℃时的光饱和点。
      (4)植物光合作用过程中的电子传递过程主要由光系统完成。当光照强度过强时,电子积累过多,会产生攻击膜蛋白和膜脂分子的物质,引起放氧减少,称为“光抑制”现象。若在鼠尾藻培养液中加入铁氰化钾,可将电子及时导出。部分过程如下图所示。请分析回答:
      ①正常光照时,水提供的电子(e-)经过传递,被NADP+接受生成NADPH,为暗反应中C3的还原提供________。
      ②据图分析,强光条件下引起光抑制的物质最可能是________,缓解光抑制的过程中电子(e-)的受体除NADP+外还包括________。
      ③研究发现,植物的Rubisc酶具有两面性:当CO2浓度较高时,该酶催化CO2的固定;当O2浓度较高时,该酶却催化C5与O2反应,产物经一系列变化后到线粒体中会生成CO2,这种植物在光下吸收O2产生CO2的现象称为光呼吸。推测强光照射下光呼吸对光合结构具有一定保护作用的原因是________。
      【答案】(1)叶绿素a增多
      (2) ①. 光饱和点(或光补偿点) ②. 强光
      (3)小于 (4) ①. 还原剂和能量 ②. 活性氧 ③. 铁氰化钾 ④. 消耗O2以减少活性氧产生(或消耗多余ATP和NADPH以减少电子产生)
      【解析】
      【小问1详解】
      对比表格数据,鼠尾藻进入繁殖期后,阔叶的叶绿素a含量明显升高,可吸收更多光能,因此光合作用强度增大。
      【小问2详解】
      表格中狭叶的光补偿点、光饱和点都高于阔叶,更高的光补偿点和光饱和点说明狭叶需要更高强度的光照才能达到最大光合速率,更适应枝条中上部退潮后暴露于空气中的强光环境。
      【小问3详解】
      表格中18℃(最适温度)下新生阔叶的最大净光合速率(光饱和点对应净光合)为1017.3 nmlO2·g-1·min-1,而题图中18℃测得的新生阔叶净光合速率约900,小于该最大值,说明此时还未达到光饱和,因此实验设定的光照强度小于18℃的光饱和点。
      【小问4详解】
      ①暗反应中C3的还原过程,NADPH既作为还原剂,也为反应提供能量。
      ②结合题干和图示,强光下多余电子传递给O2会生成活性氧,活性氧攻击光合膜蛋白和膜脂,引发光抑制,因此引起光抑制的物质是活性氧;电子除传递给NADP+外,还可被O2接受,多余电子最终可导出给铁氰化钾,因此缓解光抑制时,额外的电子受体是铁氰化钾。
      ③强光下光反应速率快,会产生过量的ATP、NADPH,引发电子积累和活性氧生成,损伤光合结构;光呼吸可以消耗多余ATP和NADPH以减少电子产生,同时消耗O2,减少活性氧生成,因此对光合结构起到保护作用。
      22. 冬虫夏草是一种真菌(称“虫草菌”)寄生在蝙蝠蛾科幼虫体内形成的复合体,主要分布在我国青海、西藏等海拔4000m左右的高寒草甸地区,具有极高的药用价值。回答下列问题:
      (1)在虫草菌和蝙蝠蛾幼虫细胞中均存在的含核酸的细胞结构有________。
      (2)冬虫夏草富含多种必需氨基酸,可供人体合成多种蛋白质,细胞中蛋白质种类繁多的根本原因是________;冬虫夏草还含有麦角甾醇,在紫外光照射下可转化为维生素D2(维生素D的一种),维生素D对人体的作用是________。
      (3)虫草素也是冬虫夏草的有效活性成分,为探究其对肿瘤细胞的作用,科研人员用不同浓度的虫草素处理Hela细胞,得到如图所示的实验结果。
      另一研究表明一种小RNA分子miR-135b-5p会影响肿瘤的发生和发展,有人提出假说:“虫草素通过降低miR-135b-5p的表达水平来阻止Hela细胞的转移”,请参考上述实验结果设计实验进行研究。
      ①在三组等量Hela细胞培养液中分别加入________,在相同适宜条件下培养100小时。
      ②分别测定三组细胞中________,并同时测算Hela细胞的________。
      ③若结果为________,则假说可能成立。
      【答案】(1)细胞核、线粒体、核糖体
      (2) ①. 指导蛋白质合成的DNA分子具有多样性 ②. 能有效促进人体肠道对钙和磷的吸收
      (3) ①. 等量0μml/L、50μml/L、100μml/L的虫草素溶液 ②. miR-135b-5p的表达量 ③. 转移率 ④. 在一定浓度的虫草素中,Hela细胞中miR-135b-5p的表达水平和Hela细胞的转移率随虫草素浓度升高而降低
      【解析】
      【小问1详解】
      冬虫夏草菌(真菌)是真核生物,蝙蝠蛾幼虫(动物)也是真核生物。 两者共有的含核酸的结构:细胞核、含少量DNA 和RNA的线粒体、由rRNA和蛋白质组成的核糖体。
      【小问2详解】
      蛋白质由基因编码合成,其多样性的根本原因是指导蛋白质合成的DNA分子具有多样性(不同基因的碱基序列不同,转录翻译出的蛋白质就不同)。维生素D的核心功能是促进人体肠道对钙和磷的吸收,有助于骨骼和牙齿的发育与维持。
      【小问3详解】
      ①需设置不同浓度的虫草素组,参考题干实验,加入等量0μml/L、50μml/L、100μml/L 的虫草素溶液(形成浓度梯度,对应对照、低浓度、高浓度组)。
      ②要验证假说,需要测定:miR-135b-5p的表达量(验证虫草素是否影响该RNA水平),同时测算Hela细胞的转移率(验证转移能力是否被抑制)。
      ③若假说成立,则在一定浓度的虫草素中,Hela细胞中miR-135b-5p的表达水平和Hela细胞的转移率随虫草素浓度升高而降低,说明虫草素浓度越高,miR-135b-5p表达越低,细胞转移率也越低,二者呈负相关,支持假说。
      23. 狂犬病毒(RV)是一种嗜神经性人畜共患病毒,研究人员利用该病毒的结构蛋白(蛋白A)为抗原制备单克隆抗体的流程如图所示。回答下列问题:
      (1)制备单克隆抗体涉及多种技术手段,其中________是动物细胞工程的基础,实验时一般需要多次注射蛋白A免疫小鼠,目的是________。
      (2)与骨髓瘤细胞融合前,B淋巴细胞________(填“需要”或“不需要”)通过原代培养扩大细胞数量。诱导细胞融合时,可使用的方法有________。(至少答2种)
      (3)杂交瘤细胞筛选过程中,筛选①常使用特定的选择培养基,在该培养基上________细胞会死亡。
      (4)为鉴定单克隆抗体识别抗原的具体区域,可将A蛋白逐步截短,分别与纯化的单克隆抗体反应,实验结果如图所示(“+”表示有反应,“-”表示无反应,“aa”表示氨基酸)。
      结果证明该单克隆抗体识别A蛋白的区域大概为________(填“40~50”、“40~55”或“50~60”)位氨基酸。
      【答案】(1) ①. 动物细胞培养技术 ②. 增强小鼠机体的免疫反应,从而从该小鼠的脾中获得更多能产生特定抗体(抗蛋白A的抗体)的B淋巴细胞
      (2) ①. 不需要 ②. 灭活病毒诱导法、PEG融合法、电融合法
      (3)未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞
      (4)40~55
      【解析】
      【小问1详解】
      制备单克隆抗体涉及动物细胞培养技术和动物细胞融合技术,其中动物细胞培养是动物细胞工程的基础;实验时一般需要多次注射蛋白A免疫小鼠,目的是增强小鼠机体的免疫反应,从而从该小鼠的脾中获得更多能产生特定抗体(抗蛋白A的抗体)的B淋巴细胞。
      【小问2详解】
      已免疫的B淋巴细胞本身数量相对较多,且在后续与骨髓瘤细胞融合等操作中会有进一步的处理和筛选,所以不需要通过原代培养扩大细胞数量;诱导动物细胞细胞融合时,可采用灭活病毒诱导法、PEG融合法、电融合法。
      【小问3详解】
      用特定的选择培养基进行筛选杂交瘤细胞过程中:在该培养基上,未融合的亲本细胞和融合的具有同种核的细胞都会死亡,只有融合的杂交瘤细胞才能生长。
      【小问4详解】
      根据图可知,1~50氨基酸序列片段与抗体无反应,而1~55氨基酸序列片段与抗体有反应,说明该单克隆抗体识别的区域大概为50~55位氨基酸。50~153氨基酸序列片段与抗体无反应,而40~153氨基酸序列片段与抗体有反应,说明该单克隆抗体识别的区域大概为40~50位氨基酸。综上分析可知,该单克隆抗体识别抗原(A蛋白)的区域大概为40~55位氨基酸。
      24. 咖啡酸可降低动脉粥样硬化风险,其合成关键酶为HpaB酶和HpaC酶(控制其合成的基因分别为HpaB和HpaC)。研究人员拟构建同时表达HpaB酶与HpaC酶的重组质粒并导入酵母菌,以实现咖啡酸的高效生产。图1表示含有HpaC酶基因的片段,图2表示已导入HpaB酶基因的质粒结构,质粒中LacZ基因编码产生的β-半乳糖苷酶可以分解X-gal,使菌落呈现蓝色,否则菌落为白色,其余箭头处表示相关限制酶的识别位点。回答下列问题:
      回答下列问题:
      (1)据图2分析,应选用四种限制酶中的________和________切割质粒,以保证目的基因插入后能够正常表达出HpaB与HpaC两种关键酶。
      (2)已知HpaC基因转录得到的mRNA前三个碱基为起始密码子AUG.研究发现在紧邻起始密码子AUG之前加入5'-GCCACC-3',会显著提高基因的表达效率。图1中利用PCR技术获取HpaC基因时,为保证HpaC基因能正确插入载体并高效表达,需在与________(填“a”或“b”)链配对的引物的5'端增加碱基序列5'-________-3'(写12个碱基)。
      (3)为筛选出成功导入重组质粒的目标菌,需要先处理酵母菌,再将重组质粒与经处理的酵母菌混匀,最后将酵母菌接种到含有________的培养基上。培养一段时间后,培养基中颜色为________的菌落为目标菌落。
      【答案】(1) ①. MunⅠ ②. XhⅠ
      (2) ①. a ②. GAATTCGCCACC
      (3) ①. 氨苄青霉素和X-gal ②. 白色
      【解析】
      【小问1详解】
      据图2可知,EcRⅠ和其他酶同时切割质粒会将HpaB切掉,不能选用,SalⅠ位于终止子外,也不能选用,故只能选用MunⅠ和XhⅠ切割质粒,产生不同的黏性末端,以保证目的基因插入后能够正常表达出HpaB蛋白和HpaC蛋白。
      【小问2详解】
      根据图中HpaC蛋白基因的编码链的方向及质粒中启动子方向可知,需要将HpaC蛋白基因的转录模板链a链的3′端靠近启动子与MunⅠ切割形成的黏性末端相连,由于HpaC蛋白基因中含有MunⅠ的酶切位点,所以不能用MunⅠ进行切割,但是EcRⅠ与MunⅠ切割产生的黏性末端相同,所以可以在设计引物的时候添加EcRⅠ的识别序列(5′-GAATTC-3′),由于在紧邻起始密码子AUG之前加入5'-GCCACC-3',会显著提高基因的表达效率,所以还需要在与a链3′端互补配对的引物的5'端增加碱基序列5'-GAATTCGCCACC-3'。
      【小问3详解】
      为筛选出成功导入重组质粒的目标菌,需要将重组质粒与经处理的大肠杆菌混匀,再将大肠杆菌接种到含有氨苄青霉素和X-gal的培养基上;重组质粒含有氨苄青霉素抗性基因,在此培养基上能长出菌落,LacZ基因编码产生的β-半乳糖苷酶可以分解X-gal产生蓝色物质,使菌落呈现蓝色,重组质粒中导入了目的基因,则重组质粒中不含LacZ基因,不能编码产生的β-半乳糖苷酶,不能分解X-gal产生蓝色物质,培养一段时间后,培养基中颜色为白色的菌落为目标菌落。
      25. 囊性纤维化是一种单基因遗传病,因CFTR基因突变导致运输Cl⁻的CFTR蛋白异常,最终引发全身外分泌腺分泌物黏稠,导致多器官慢性损害。研究人员调查了三个家系各成员的患病情况,结果如下图1。
      请回答问题:
      (1)囊性纤维化的遗传方式为________。囊性纤维化的致病机理说明基因通过控制________控制生物体的性状。
      (2)囊性纤维化中约70%的患者属于经典∆F508突变,该突变导致CFTR蛋白第508位的苯丙氨酸(Phe508)缺失。研究者设计了两种杂交探针(能和特异的核酸序列杂交的DNA单链片段):探针1和2能分别与Phe508正常和Phe508缺失的CFTR基因单链结合,从而显示出相应的杂交条带。利用这两种探针对三个家系各成员的基因组进行分子杂交,结果如下图2。
      ①甲家系Ⅱ-2探针杂交结果与亲本相同的概率为________。
      ②乙家系中Ⅱ-1出现该探针杂交结果的原因是:________(填“Ⅰ-1”、“Ⅰ-2”或“Ⅰ-1和Ⅰ-2”)为________(填“非Phe508缺失”或“Phe508缺失”)的CFTR致病基因的携带者。
      ③如果丙家系Ⅱ-2表型正常,用这两种探针检测出两条带的概率为________。
      【答案】(1) ①. 常染色体隐性 ②. 蛋白质的结构,直接
      (2) ①. 1/2 ②. Ⅰ-1和Ⅰ-2 ③. 非Phe508缺失 ④. 1/3
      【解析】
      【小问1详解】
      根据图1,甲家系中Ⅰ-1和Ⅰ-2表现正常,却生出了患病的女儿Ⅱ-1,依据“无中生有为隐性,隐性遗传看女病,女病父正非伴性”,可判断囊性纤维化的遗传方式为常染色体隐性遗传。囊性纤维化因CFTR基因突变导致运输Cl⁻的CFTR蛋白异常,这表明基因通过控制蛋白质的结构直接控制生物体的性状。
      【小问2详解】
      ①甲家系中Ⅰ-1和Ⅰ-2正常,Ⅱ-1患病,可知Ⅰ-1和Ⅰ-2均为杂合子(设为Aa)。Ⅱ-2基因型可能为AA、Aa或aa,为Aa的概率是1/2,所以甲家系Ⅱ-2探针杂交结果与亲本(Ⅰ-1和Ⅰ-2均为杂合子)相同的概率为1/2。
      ②从乙家系成员的分子杂交结果可知,各个体内都只含能与探针1结合的Phe508正常的CFTR基因,所以乙家系中Ⅱ-1出现该探针杂交结果的原因是Ⅰ-1和Ⅰ-2为非Phe508缺失的CFTR致病基因的携带者。技术阶段
      操作内容
      胚胎与类器官制备
      体外培养人类囊胚,同时诱导子宫内膜干细胞分化为子宫内膜类器官
      3D着床模型构建
      将囊胚与子宫内膜类器官共培养,模拟体内子宫微环境
      着床过程动态监测
      通过活细胞成像技术实时记录胚胎黏附、侵入以及细胞分化等过程
      干预靶点筛选
      加入候选药物或基因调控因子,分析对子宫内膜类器官、胚胎着床率及早期发育的影响
      叶片
      光补偿点(μml·m-2·s-1)
      光饱和点(μml·m-2·s-1)
      叶绿素a(mg·g-1)
      最大净光合速率(nmlO2·g-1·min-1)
      新生阔叶
      16.6
      164.1
      0.37
      1017.3
      繁殖期阔叶
      15.1
      266.0
      0.73
      1913.5
      狭叶
      25.6
      344.0
      0.54
      1058.2
      注:限制酶识别序列及切割位点

      MunⅠ:5'-CAATTG-3'

      XhⅠ:5'-CTCGAG-3'

      EcRⅠ:5'-GAATTC-3'

      SalⅠ:5'-GTCGAC-3'

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