江苏苏州市2025-2026学年高二下学期期中调研试卷 生物（含解析）

这是一份江苏苏州市2025-2026学年高二下学期期中调研试卷 生物（含解析），共6页。试卷主要包含了单项选择题，多项选择题，非选择题等内容，欢迎下载使用。
一、单项选择题：共15题，每题2分，共30分。每题只有一个选项最符合题意。
1. 下列关于微生物实验操作的叙述，正确的是（ ）
A. 筛选硝化细菌的选择培养基中需添加碳源
B. 稀释涂布平板法可用于微生物的分离和计数
C. 巴氏消毒法能杀死牛奶中所有微生物且不破坏牛奶的营养成分
D. 微生物实验中，使用过的培养基丢弃前需消毒处理，以免污染环境
【答案】B
【解析】
【分析】微生物常见的接种的方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落；②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过大量稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后可形成单个菌落。
【详解】A、硝化细菌属于自养型生物，筛选硝化细菌的选择培养基中不需要添加（有机）碳源，A错误；
B、微生物的接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法，其中稀释涂布平板法可用于微生物的分离和计数，B正确；
C、巴氏消毒法是较为温和的消毒方法，可以杀死牛奶中的微生物并不破坏牛奶的营养成分，但不能杀死所有的微生物，C错误；
D、微生物实验中，使用后的培养基在丢弃前一定要进行灭菌处理，彻底杀死残留微生物，以免污染环境，D错误。
故选B。
2. 在制作发酵食品的学生实践中，控制发酵条件至关重要。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 泡菜发酵后期，尽管乳酸菌占优势，但仍有产气菌繁殖，需开盖放气
B. 果酒与果醋发酵时温度宜控制在18-25℃，泡菜发酵时温度宜控制在30-35℃
C. 制作果酒的葡萄汁不宜超过发酵瓶体积的2/3，制作泡菜的盐水要淹没全部菜料
D. 葡萄果皮上有酵母菌和醋酸菌，制作好葡萄酒后可直接通入无菌空气制作葡萄醋
【答案】C
【解析】
【详解】A、泡菜发酵需维持严格无氧环境，开盖放气会引入氧气和杂菌，抑制乳酸菌代谢甚至导致泡菜变质，发酵产生的气体可通过坛沿水封结构溢出，无需开盖放气，A错误；
B、果酒发酵适宜温度为18-25℃，果醋发酵（醋酸菌）适宜温度为30-35℃，泡菜发酵适宜温度为18-20℃，B错误；
C、制作果酒时葡萄汁不超过发酵瓶体积的2/3，既能为酵母菌前期有氧繁殖提供氧气，也可避免发酵产生的CO₂导致发酵液溢出；制作泡菜时盐水淹没全部菜料，可创造无氧环境保证乳酸菌正常代谢，C正确；
D、醋酸菌发酵除需要有氧环境外，还需要30-35℃的适宜温度，制作好葡萄酒后仅通入无菌空气，温度不符合醋酸菌代谢需求，无法直接制作葡萄醋，D错误。
3. 关于细菌和酵母菌的实验，下列叙述错误的是（ ）
A. 通常酵母菌培养基比细菌培养基有更高的碳氮比
B. 通常细菌培养基、酵母菌培养基均用高压蒸汽灭菌法灭菌
C. 通常血细胞计数板计数法适用于所有的酵母菌和细菌的数量测定
D. 通常细菌的生长速度比酵母菌快，菌落比酵母菌落小
【答案】C
【解析】
【详解】A、酵母菌培养基（如马铃薯培养基）以碳源为主，碳氮比高于细菌培养基（如牛肉膏蛋白胨培养基，氮源丰富），A正确；
B、培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌，B正确；
C、血细胞计数板计数法适合个体较大的微生物计数，细菌个体微小，普通光学显微镜下难以通过血细胞计数板准确计数，该方法不适用于所有细菌，C错误；
D、细菌的细胞结构简单，生长速度通常比酵母菌快，菌落一般较小、表面光滑、湿润、边缘整齐；酵母菌菌落一般较大、表面光滑、湿润、粘稠，易挑起，所以通常细菌菌落比酵母菌落小，D正确。
4. 图示为两种微生物分离纯化的方法，下列叙述正确的是（ ）
A. 甲图中3号试管的稀释倍数为103倍
B. 甲图所测定的微生物数量一般用菌落数表示
C. 乙图所示的操作过程中接种环需要灼烧5次
D. 甲、乙两种操作均可以用于微生物的计数
【答案】B
【解析】
【分析】从土壤中分离尿素分解菌的一般步骤是：土壤取样、选择培养、梯度稀释、涂布培养和筛选菌株。图中5支试管为梯度稀释，最后经稀释涂布平板法接种培养后进行计数。
【详解】A、图中将10g土样加入到90mL的无菌水，已经稀释10倍，随后每次吸取1mL菌液，加入到9mL无菌水中，都是稀释10倍，因此可知③号试管是稀释104倍，A错误；
B、菌落是单个微生物在适宜固体培养基表面或内部生长繁殖到一定程度，形成肉眼可见有一定形态结构的子细胞的群落，因此甲图所测定的微生物数量一般用菌落数表示，B正确；
C、接种环在每次接种前和接种结束后都要通过灼烧来灭菌，所以完成乙图中5次划线操作前都要灼烧灭菌，接种结束后还需灼烧灭菌1次，防止造成污染，由此可见，完成乙图所示的操作过程共需灼烧接种环6次，C错误；
D、据图可知，甲图表示稀释涂布平板法接种微生物，可以用来进行微生物的计数，乙图表示平板划线法接种微生物，不能用于计数，D错误。
故选B。
5. 发酵工程在食品工业、医药工业和农牧业等许多领域得到了广泛的应用，形成了规模庞大的发酵工业。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 从酵母菌的纯培养物中获取的单细胞蛋白可制成微生物饲料
B. 乳酸发酵前期产生的乳酸会抑制杂菌生长，积累过多也会抑制乳酸菌
C. 青霉菌是生产青霉素的常用菌种，常采用过滤、沉淀等方法获取青霉素
D. 谷氨酸棒状杆菌是生产谷氨酸的常用菌种，在弱碱性条件下发酵会积累谷氨酸
【答案】C
【解析】
【详解】A、单细胞蛋白即微生物菌体本身，从酵母菌纯培养物中获得的酵母菌菌体就是单细胞蛋白，可加工为微生物饲料，A正确；
B、乳酸发酵前期产生的乳酸使发酵液呈酸性，可抑制杂菌繁殖；当乳酸积累过多时，发酵液pH过低会抑制乳酸菌自身酶的活性，进而抑制乳酸菌代谢，B正确；
C、青霉素是青霉菌分泌到发酵液中的胞外代谢产物，过滤、沉淀是分离收集菌体（如单细胞蛋白）的方法，提取青霉素需采用适当的提取、分离和纯化措施来获得，C错误；
D、谷氨酸棒状杆菌发酵生产谷氨酸时，弱碱性发酵条件下会积累谷氨酸，若为酸性条件则会生成谷氨酰胺等其他产物，D正确。
6. 下图表示植物细胞工程中利用愈伤组织培育植株或得到细胞产物的过程。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 可利用①④过程实现植物的快速繁殖和作物脱毒
B. 可通过①⑦过程获得人参皂苷，该过程体现了植物细胞的全能性
C. ③④过程可用于突变体的获取，原因是诱变剂使细胞发生了定向突变
D. ②⑤⑥被称为单倍体育种，优点是可以明显缩短育种年限，植株C为单倍体植株
【答案】A
【解析】
【详解】A、植物的快速繁殖技术和脱毒苗的获得均需通过①④过程获得植株，均是植物细胞工程的应用，A正确；
B、细胞全能性是指发育为完整个体或分化为各种细胞的潜能，⑦过程得到的是细胞产物，未体现植物细胞的全能性，B错误；
C、③④过程可用于突变体的获取，原因是细胞发生了基因突变，但突变是不定向的，C错误；
D、②⑤⑥被称为单倍体育种，优点是可以明显缩短育种年限，植株B是单倍体植株，植株C为正常植株，D错误。
7. 研究人员将普通烟草（4n=48）成熟花粉和白花丹烟草（4n=48）体细胞融合，得到多种杂种细胞并培养成可育的杂种烟草，从中筛选出具备优良性状的烟草植株。关于这种“配子-体细胞”杂交方式下列叙述错误的是（ ）
A. 上述过程发生了染色体数目变异
B. 融合前需要在低渗溶液中去除细胞壁
C. “配子-体细胞”融合得到的杂种细胞有多种基因型
D. 可育的杂种烟草植株细胞中含有六个染色体组
【答案】B
【解析】
【详解】A、普通烟草为四倍体，其成熟花粉（配子）含2个染色体组，白花丹烟草体细胞含4个染色体组，二者融合后杂种细胞染色体数为72，染色体数目发生改变，属于染色体数目变异，A正确；
B、植物细胞去除细胞壁需用纤维素酶和果胶酶进行酶解，若在低渗溶液中处理，无细胞壁保护的原生质体会吸水胀破，无法完成后续融合操作，B错误；
C、普通烟草减数分裂产生花粉的过程中会发生基因重组，产生的花粉基因型具有多样性，因此和白花丹烟草体细胞融合后得到的杂种细胞有多种基因型，C正确；
D、普通烟草配子含2个染色体组，白花丹烟草体细胞含4个染色体组，融合得到的杂种细胞含6个染色体组，经植物组织培养得到的可育杂种烟草染色体组数目不变，细胞中含有六个染色体组，D正确。
8. 动物细胞体外培养时，其生命周期可大致分为原代培养期、传代培养期（有限细胞系）、衰退期（或无限细胞系）三个阶段，如下图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 动物细胞培养一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织器官
B. 传代培养时，可直接用离心法收集原代培养瓶中的细胞
C. 图示“传代”中的“代”不同于细胞的增殖次数
D. 图示无限细胞系的部分细胞获得了无限增殖的能力
【答案】B
【解析】
【详解】A、动物细胞培养一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织器官，其细胞增殖能力强，有丝分裂旺盛，A正确；
B、传代培养时，悬液培养的细胞可以直接离心收集，贴壁细胞需要先用胰蛋白酶处理使之分散为单个细胞，再用离心法收集，B错误；
C、图示中的“一代”为“传代”的“一代”，这里的代是指分瓶培养一次增加一代，不同于细胞的增殖次数，C正确；
D、无限细胞系呈指数增长，未发生老化和死亡，其细胞发生了癌变，遗传物质发生变化，图示无限细胞系的部分细胞获得了无限增殖的能力，D正确。
9. 小鼠成纤维细胞在生物医学研究中具有重要应用。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 取小鼠相关组织后，可用酒精进行消毒避免杂菌污染
B. 所需胰蛋白酶的浓度与处理的时间、处理温度呈负相关
C. 制备细胞悬液所用的培养液需加入血清等天然成分
D. 培养过程中应定期更换培养液，以清除代谢废物保证无毒环境
【答案】B
【解析】
【详解】A、取动物组织进行细胞培养前，可用酒精对组织进行消毒，避免杂菌污染，保证培养的无菌环境，A正确；
B、胰蛋白酶的活性受温度影响，在最适温度时胰蛋白酶活性最高，此时所需胰蛋白酶浓度最低：低于最适温度时，随温度升高酶活性升高，所需浓度降低，二者呈负相关；高于最适温度时，随温度升高酶活性下降，所需浓度升高，二者呈正相关，B错误；
C、由于人们对动物细胞所需的营养物质还没有完全搞清楚，制备细胞悬液的培养液中需要加入血清、血浆等天然成分，以补充细胞所需的未知生长因子，C正确；
D、细胞培养过程中会产生代谢废物，积累后会对细胞产生毒害作用，因此需要定期更换培养液清除代谢废物，保证无毒的培养环境，D正确。
10. Rag基因缺失小鼠不能产生成熟的淋巴细胞。科研人员通过诱导Rag基因缺失小鼠的体细胞获得诱导多能干细胞（iPS细胞），然后将Rag基因导入iPS细胞并诱导使其分化为造血干细胞，再移植到Rag基因缺失小鼠体内进行治疗。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 可以将Rag基因直接导入到iPS细胞
B. 诱导体细胞获得iPS细胞的过程中发生了基因突变
C. 利用iPS细胞进行治疗存在导致小鼠发生肿瘤的风险
D. 培养iPS细胞时需提供95%氧气和5%CO2的混合气体环境
【答案】C
【解析】
【详解】A、将目的基因导入受体细胞前必须先构建基因表达载体，保证目的基因能在受体细胞中稳定存在并正常表达，不能将Rag基因直接导入iPS细胞，A错误；
B、诱导体细胞获得iPS细胞的过程是细胞重编程，本质是基因的选择性表达，细胞的遗传物质未发生改变，不属于基因突变，B错误；
C、iPS细胞具有较强的分裂分化能力，导入生物体内后若出现异常增殖，存在引发肿瘤的风险，C正确；
D、培养动物细胞的气体环境为95%的空气和5%的CO₂，95%氧气浓度过高会导致细胞氧化损伤，无法正常存活，D错误。
11. “试管动物”是通过人工操作使卵子在体外受精，经培育发育为早期胚胎后再进行移植产生的个体。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 超数排卵处理时，常用含促性腺激素的促排卵剂
B. 体外培养卵母细胞时通常加入湿热灭菌后的血清
C. 采集的精液经固定、稀释后再用血细胞计数板检测其密度
D. 母体子宫对胚胎具有免疫耐受性是胚胎移植的生理学基础
【答案】B
【解析】
【详解】A、超数排卵处理的原理是促性腺激素可促进雌性动物排出更多成熟卵子，因此常用含促性腺激素的促排卵剂处理供体雌性动物，A正确；
B、血清中含有细胞培养必需的生长因子、活性蛋白等物质，湿热灭菌的高温高压条件会破坏这些活性物质，因此血清通常采用过滤除菌，不能用湿热灭菌，B错误；
C、采集的精液需先固定杀死精子（避免精子游动干扰计数），稀释到适宜浓度后，可通过血细胞计数板用抽样检测法测定精子密度，C正确；
D、胚胎移植的生理学基础之一是母体子宫对移入的外来胚胎基本不发生免疫排斥，即存在免疫耐受性，保障胚胎能在母体内存活发育，D正确。
12. 为了初步检测药物X和Y的抗癌活性，在细胞培养板的每个孔中加入相同数量的肝癌细胞使其贴壁生长，实验组加入等体积相同浓度的溶于二甲基亚砜的药物X或Y，培养过程及结果如下图所示。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 多数动物细胞培养液的pH为7.2-7.4
B. 对照组中应加入与实验组等体积的生理盐水
C. 可用胰蛋白酶处理使肝癌细胞脱落下来并进行计数
D. 根据实验结果，可以初步判断药物X的抗癌效果较好
【答案】B
【解析】
【详解】A、多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4，A正确；
B、本实验中，实验组的药物X/Y是溶于二甲基亚砜的，根据单一变量原则，对照组应加入等体积的二甲基亚砜，排除溶剂本身对实验结果的影响，B错误；
C、贴壁生长的动物细胞，可用胰蛋白酶处理，使细胞分散脱落，便于计数，C正确；
D、抗癌药物会抑制癌细胞增殖，处理后癌细胞数量越少说明抗癌效果越好；实验结果中药物X处理后癌细胞数量远低于药物Y组和对照组，可判断X的抗癌效果更好，D正确。
13. 人绒毛膜促性腺激素（HCG）是由胚胎的滋养层细胞分泌的一种糖蛋白，可通过孕妇血液循环而排泄到尿中。早孕试纸是将HCG的单克隆抗体制备成能快速显色的试纸，通过检验尿液中是否含有一定量的HCG来判断是否怀孕。下列相关叙述正确的是（ ）
A. 原肠胚时期出现的滋养层细胞即可分泌HCG
B. 用HCG反复注射到小鼠体内产生的抗体为单克隆抗体
C. 利用选择培养基可直接筛选出产生HCG抗体的杂交瘤细胞
D. 单克隆抗体灵敏度高，因此可在妊娠早期测定是否怀孕
【答案】D
【解析】
【详解】A、囊胚时期细胞就已分化为内细胞团和滋养层细胞，滋养层并非原肠胚时期才出现，A错误；
B、将HCG反复注射到小鼠体内，小鼠体内会产生多种分泌抗HCG抗体的浆细胞，提取的抗体是多种抗体的混合物，属于多克隆抗体；单克隆抗体是由特定的杂交瘤细胞分泌的，B错误；
C、选择培养基仅能筛选出融合成功的杂交瘤细胞，无法直接筛选出能特异性产生HCG抗体的杂交瘤细胞，还需后续进行克隆化培养和抗体阳性检测才能完成筛选，C错误；
D、单克隆抗体具有特异性强、灵敏度高的特点，妊娠早期尿液中HCG含量较低时也可被准确检测，因此可在妊娠早期测定是否怀孕，D正确。
14. 图1是某重组质粒被相应限制酶处理后的电泳图。图2中目的基因（长度为2.0kb）插入方向正确的重组质粒序号和作出该判断所用的限制酶是（ ）
A. ①，BamHⅠB. ①，EcRⅠ和HindⅢC. ②，EcRⅠD. ②，EcRⅠ和HindⅢ
【答案】B
【解析】
【详解】分析图1可知，重组质粒被EcR I酶切后，得到5.8kb的片段，说明重组质粒中只有一个EcR I的酶切位点；重组质粒被BamH I酶切后产生3.8kb和2.0kb两种片段，说明重组质粒中有2个BamH I的酶切位点：重组质粒被EcR I和HindIII酶切后，产生4.5kb和1.3kb两种片段，说明重组质粒中有EcR I和HindIII酶切位点，且两种酶切位点之间的片段为4.5kb和1.3kb。结合图2分析可知，重组质粒①符合上述分析的结果，重组质粒②中EcR I和HindIII酶切位点之间的片段为2.3kb和3.5kb,不符合图1酶切的结果。由于使用EcRⅠ和HindⅢ进行切割时，目的基因正向插入和反向插入的结果不同，所以可以用这两种酶切割进行判断，B正确，ACD错误。
15. 中国克隆牛“康康”的培育流程如下：将良种肉牛的体细胞直接注入去核卵母细胞中，经诱导融合形成重构胚；对重构胚人工激活与体外培养后，筛选合格胚胎移植至代孕母牛子宫内，使其完成胚胎发育。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 利用梯度离心法无需穿透透明带即可去除纺锤体-染色体复合物
B. 可用电刺激、聚乙二醇等激活重构胚，使其完成细胞分裂与发育进程
C. 将重构胚培养至囊胚期，取滋养层细胞进行DNA分析后方可移植
D. 代孕母牛需要体质健康、繁殖能力正常，无须有优良性状
【答案】B
【解析】
【详解】A、梯度离心法是利用纺锤体-染色体复合物密度较小的特点，使其移动到透明带附近后去除，无需穿透透明带，A正确；
B、电刺激、Ca2+载体、乙醇等是常用的重构胚激活方法，可诱导重构胚完成分裂和发育进程，B错误；
C、囊胚期的滋养层细胞将来发育为胎膜和胎盘，取该层细胞做DNA分析不会损伤发育为胎儿的内细胞团，筛选合格后再移植可提高培育成功率，C正确；
D、代孕母牛仅为胚胎提供发育的子宫环境，不决定子代的遗传性状，因此仅需体质健康、繁殖能力正常即可，无须具备优良生产性状，D正确。
二、多项选择题：共4题，每题3分，共12分。每题有不止一个选项符合题意。每题全选对者得3分，选对但不全的得1分，错选或不答的得0分。
16. 科研人员为实现咖啡渣资源化利用，开发出一款咖啡风味精酿啤酒，生产流程为：麦芽+咖啡渣→粉碎→糖化→过滤→蒸煮→主发酵→后发酵→消毒→终止。图为发酵过程中酒精度的变化情况。下列相关叙述正确的有（ ）
注：酒精度>5.2%vl时达到国家优级标准。
A. 糖化是让淀粉水解形成糖浆，蒸煮能使酶失活并对糖浆灭菌
B. 主发酵完成酵母菌的繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成
C. 随发酵天数的增加，酒精的产生速率逐渐上升
D. 若用于实际生产，图中35天为最佳发酵天数
【答案】AB
【解析】
【详解】A、糖化的作用是利用麦芽中的淀粉酶将淀粉分解为可发酵的糖浆；蒸煮通过高温使糖化相关酶失活，同时可以杀灭糖浆中的杂菌，起到灭菌作用，A正确；
B、酵母菌繁殖、大部分糖的分解和代谢物的生成都是在主发酵阶段完成，后发酵仅用于残留糖转化、改善啤酒风味和澄清度，B正确；
C、随发酵进行，营养物质减少、酒精积累抑制酵母菌无氧呼吸，酒精产生速率逐渐下降，28~35天酒精度几乎不再增加，产生速率接近0，C错误；
D、根据题意，28天和35天酒精度无显著差异，且均达到优级标准（酒精度>5.2%vl），从降低生产成本、缩短生产周期考虑，最佳发酵天数为28天，D错误。
17. 下图表示植株A（2n=14）和植株B（4n=48）培育植株①②③④⑤的过程。下列相关叙述错误的有（ ）
A. 细胞脱分化过程受基因选择性表达调控
B. 需要通过植物组织培养技术获得的植株是①③④
C. 所得植株①②的细胞中染色体数分别是7、14
D. 所得植株⑤的细胞中染色体数都是62
【答案】BD
【解析】
【详解】A、脱分化是已分化细胞经恢复分裂能力形成愈伤组织的过程，该过程受植物激素调节及基因选择性表达调控，A正确；
B、①将花粉培育成单倍体植株，③将愈伤组织培育成胚状体再形成植株，④将愈伤组织培育成植株，⑤需要将融合细胞培育成植株，都需要使用植物组织培养技术，B错误；
C、植株①是将植株A的花粉培育成单倍体植株，染色体数目为7，②是将植株①经过秋水仙素处理，染色体数目加倍，染色体数目为14，C正确；
D、植株⑤将植株A和植株B的原生质体融合，会出现多种融合细胞，例如两个A细胞融合，染色体数目为28，两个植株B原生质体融合，染色体数目为96，D错误。
18. 某团队探究了维生素C对猪肌肉干细胞体外增殖的影响，部分实验结果如图1所示，图2是验证维生素C通过影响PI3K（一种与细胞增殖相关的信号分子）水平来影响细胞增殖的实验结果。下列相关叙述错误的有（ ）
A. 在猪肌肉干细胞培养基中添加的维生素C属于生长因子
B. 100μM维生素C是促进猪肌肉干细胞体外增殖的最适浓度
C. 图2中实验②④添加的维生素C浓度可能是100或200μM
D. 图2中实验组合①③④对照可说明维生素C的促增殖作用被PI3K信号抑制剂抑制
【答案】BD
【解析】
【详解】A、维生素C是调节细胞生命活动的物质，在猪肌肉干细胞培养基中属于生长因子，A正确；
B、图1显示，100μM VC组的活细胞相对数量最高，说明该浓度促进增殖效果最好，但实验仅检测了0、50、100、200、400、800μM这些浓度，无法确定100μM就是最适浓度，最适浓度需要在100μM附近设置更精细的浓度梯度来验证，B错误；
C、图2中，组合②仅加PI3K抑制剂，细胞相对增殖能力远高于①；组合④同时加VC和抑制剂，增殖能力与①、③接近。 结合图1，100μM、200μM VC是促进增殖的浓度，若组合②、④添加该浓度VC，理论上④的增殖能力应高于②，但图中④的增殖能力与①、③接近，说明VC的促增殖作用被抑制剂抵消，符合实验逻辑。因此VC浓度可能是100或200μM，C正确；
D、与对照组不加维生素C组相比，100和200μM维生素C对猪肌肉干细胞体外增殖有促进作用。图2是验证维生素C通过影响PI3K水平来影响细胞增殖的实验及获得的数据，图2中实验组合①②④可对照说明维生素C的促增殖作用被PI3K信号抑制剂抑制，D错误。
19. 图示人体正常基因A突变为致病基因a及HindⅢ切割位点。AluⅠ限制酶识别序列及切割位点为，下列相关叙述正确的有（ ）
A. 基因A突变为a是一种碱基增添的突变
B. 用两种限制酶分别酶切A基因后，形成的末端类型不同
C. 用两种限制酶分别酶切a基因后，产生的片段大小一致
D. 产前诊断时，该致病基因可选用HindⅢ限制酶开展酶切鉴定
【答案】BD
【解析】
【分析】“分子手术刀”——限制酶：（1）来源：主要是从原核生物中分离纯化出来的。（2）功能：能够识别双链DNA分子的某种特定的核苷酸序列，并且使每一条链中特定部位的两个核苷酸之间的磷酸二酯键断开，因此具有专一性。（3）结果：经限制酶切割产生的DNA片段末端通常有两种形式，即黏性末端和平末端。
【详解】A 、对比 A 基因和 a 基因的序列，A 基因中 “AAGCTT” 变为 a 基因中 “AAGCTG” ，是碱基替换（T→G），并非碱基增添，A 错误；
B、HindⅢ 切割产生黏性末端，AluⅠ 切割后产生的是平末端，二者末端类型不相同，B正确；
C、a基因中有2个Hind Ⅲ切割位点，切割后产生3个片段，有3个Alu Ⅰ切割位点，切割后产生4个片段，用两种限制酶分别酶切a基因后，产生的片段大小不一致，C 错误；
D、因为正常基因 A 和致病基因 a 的 HindⅢ 切割位点数量不同，所以产前诊断时，该致病基因可选用 HindⅢ 限制酶开展酶切鉴定，D 正确。
故选BD。
三、非选择题：共5题，共58分。除特殊说明外，每空1分。
20. 我国卫生部门规定饮用水标准是每1mL自来水检出的细菌菌落总数不超过100个，不得检出大肠杆菌菌落（37℃培养48h）。水中大肠杆菌的含量常采用伊红—亚甲蓝琼脂培养基进行检测，生长在此培养基上的大肠杆菌菌落呈深紫色且带有金属光泽。某校生物兴趣小组开展校园桶装矿泉水微生物含量检测活动。请回答下列问题：
（1）为了检测饮用水中细菌的数量，该兴趣小组按下表配方配制伊红—亚甲蓝琼脂培养基：
从物理状态角度分析，该培养基属于________培养基，其中蛋白胨可以为细菌生长提供________（至少写出两点）等营养物质。培养基灭菌________（填“前”或“后”）需要调节培养基的pH值。
（2）某同学分别向3个培养基中各加入1mL待测水样，涂布均匀后置于37℃的恒温培养箱中培养48h，结果如图1所示。检测时使用的接种量为1mL而不是0.1mL，其理由是________。根据实验结果，1mL水样中细菌总数约为________个。没有超过100个。该实验结果统计菌落数往往比活菌实际数目________（填“低”、“高”或“相等”）。
（3）下图为用滤膜法测定饮用水中大肠杆菌数目的流程示意图，请完成下表。
（4）从实验设计的角度看，老师建议本检测还需要设置两组对照组：一组将无菌水涂布在伊红——亚甲蓝琼脂培养基中并培养；另一组的操作是________，目的是检测该培养基能否培养出大肠杆菌。
【答案】（1） ①. 固体、鉴定 ②. 碳源、氮源、无机盐、维生素 ③. 前
（2） ①. 0.1mL水样中细菌数目较少，经培养后平板菌落数可能达不到30个 ②. 68 ③. 低
（3） ①. 滤膜消毒 ②. A面 ③. 倒置 ④. 呈深紫色且带有金属光泽
（4）将大肠杆菌涂布在伊红—亚甲蓝琼脂培养基中并培养
【解析】
【小问1详解】
从物理状态来看，该培养基含有琼脂等凝固剂，属于固体培养基；从用途来看，培养基中含有伊红—亚甲基蓝，用于鉴别是否存在大肠杆菌，所以该培养基属于鉴定培养基；蛋白胨富含有机氮化合物,也含有一些维生素和糖类，故其中蛋白胨可以为细菌生长提供碳源、氮源、无机盐、维生素等营养物质；培养基灭菌前需要调节培养基的pH， 一般培养基高温高压对其pH值影响不大，且灭菌后调pH培养基易受污染。
【小问2详解】
经稀释涂布平板法获得的平板上菌落数要求是30～300，图1中3个平板上所生长菌落数均位于30～300之间，适合计数，检测时使用的接种量为1mL而不是0.1mL，其理由是0.1mL水样中细菌数目较少，经培养后平板菌落数可能达不到30个，故在接种时吸取1mL样液。根据实验结果，（66+76+62)÷3=68，68÷1=68，1mL水样中细菌总数约为68个，没有超过100个。当两个或多个细菌连在一起时，在培养基上看到的是一个菌落，该实验结果统计菌落数往往比活菌实际数目低。
【小问3详解】
“将滤膜放入装有蒸馏水的烧杯中，加热煮沸15min，共煮沸三次”煮沸能起到消毒的作用，故步骤①的目的是对滤膜进行消毒；实验需要避免杂菌的污染，故冲洗漏斗壁时需要再向漏斗内加等量的无菌水，继续抽滤；在过滤细菌时，水样中的细菌会被截留在滤膜的A面(因为B面是与抽滤瓶接触的一面，细菌会留在A面)，所以在培养大肠杆菌时，应该将滤膜的A面紧贴在伊红一亚甲蓝培养基上，这样才能让A面上的细菌(包括大肠杆菌)接种到培养基上进行培养。将平板倒置，放入培养箱中培养，将平板倒置，既有利于培养基表面水分更好地挥发，又能防止冷凝水滴到培养基上造成杂菌污染；若存在大肠杆菌，伊红—亚甲蓝用于检测大肠杆菌，选取呈深紫色且带有金属光泽的菌落进行计数。
【小问4详解】
将无菌水涂布在伊红——亚甲蓝琼脂培养基中并培养目的是 检测培养基是否无菌及是否具有选择性； 第二组的操作是用已知的大肠杆菌菌液涂布在伊红-亚甲蓝琼脂培养基中并培养，目的是检测该培养基能否培养出大肠杆菌。
21. 奶啤是一种含牛奶的啤酒，是通过微生物发酵将麦汁中的麦芽糖和其他糖类转化为乙酸和乳酸，配以一定比例的原料乳，再经过酒精发酵制作而成，工艺流程如图所示。请回答下列问题：
（1）发芽的大麦释放________酶，参与糖化过程的发生。如果利用________处理大麦种子，可以使大麦种子无需发芽就能产生该酶。
（2）接种醋酸菌和乳酸菌制作发酵乳，促进前期酸味的形成。醋酸菌和乳酸菌在同一容器中进行发酵时，________（填“能”或“不能”）同时产生乙酸和乳酸。
（3）在菌种活化的过程中需定时取样，以检测酵母菌的生长状况。某次样品经4次10倍稀释后，经台盼蓝染色（体积不计），在25×16型血细胞计数板上计数________（填“蓝”或“无”）色细胞。若统计结果为5个中方格中的酵母菌为160个，该样品中活酵母细胞的密度约为________个细胞/mL。
（4）主发酵过程中要适时往外排气，后发酵时期应________（填“延长”或“缩短”）排气时间间隔。酒精发酵一定时间后，当观察到发酵装置内________，说明发酵完毕。从食品安全的角度考虑，上述工艺流程图中①的操作应该是________。
（5）敲除酿酒酵母中的某个蛋白酶基因，减少发酵液中蛋白的水解，有助于增强啤酒泡沫的稳定性。用蛋白固体培养基筛选敲除了该基因的酵母菌（野生型可以水解酪蛋白，在菌落周围形成透明圈），应选择菌落直径与周围透明圈直径比值________（填“较小”或“较大”）的菌落进行纯化，因其蛋白酶活性________（填“较低”或“较高”）
【答案】（1） ①. 淀粉 ②. 赤霉素
（2）不能 （3） ①. 无 ②. 2×109
（4） ①. 延长 ②. 无气泡产生（或气压不再变化） ③. 巴氏消毒（或灭菌），杀灭杂菌
（5） ①. 较大 ②. 较低
【解析】
【小问1详解】
发芽的大麦会释放淀粉酶 ，能将淀粉水解为可发酵的糖，参与糖化过程。 如果用赤霉素处理大麦种子，即使不发芽，也能诱导种子合成淀粉酶，从而简化生产流程。
【小问2详解】
醋酸菌是好氧菌，乳酸菌是厌氧菌。 二者的代谢条件相互矛盾，在同一容器中发酵时，不能同时产生乙酸和乳酸（有氧时乳酸菌受抑制，无氧时醋酸菌无法代谢）。
【小问3详解】
台盼蓝染色的原理是活细胞的细胞膜具有选择透过性，不会被染色；死细胞会被染成蓝色。因此计数时只统计无色细胞（活菌）。5个中方格共160个活菌，每个中方格活菌数：160÷5=32，血细胞计数板的大方格（1个计数室）有25个中方格，体积为0.1mm3=10−4 mL，稀释倍数104 （4 次10倍稀释）。活菌密度 32×25÷10−4×104=2×109 个/mL。
【小问4详解】
后发酵阶段，酵母菌的代谢活动减弱，产生的CO₂减少，因此应延长排气时间间隔。 酒精发酵完毕的标志是：发酵装置内不再有气泡产生（或气压不再变化），说明底物已基本消耗完，CO₂停止释放。从食品安全角度，罐装后的①操作应为灭菌处理或巴氏消毒处理，保证产品卫生。
【小问5详解】
野生型酵母菌能水解酪蛋白，在菌落周围形成透明圈；敲除蛋白酶基因的酵母菌，蛋白酶活性降低，水解酪蛋白的能力弱，透明圈小。应选择菌落直径与周围透明圈直径比值较大的菌落（说明透明圈相对菌落更小，蛋白酶活性低）。 原因是这类菌落的蛋白酶活性较低，蛋白水解少，有助于增强啤酒泡沫稳定性。
22. 青蒿素是治疗疟疾的有效药物。科研人员采用了不同的方法来处理黄花蒿，以期提高青蒿素的产量。请回答下列问题：
（1）外植体消毒时，需要用到体积分数为________的酒精溶液。黄花蒿叶片容易在酒精溶液中失绿，原因是________。黄花蒿叶片在酒精溶液中的浸泡时间要短，取出后马上要用无菌水冲洗。若酒精浸泡时间过长会导致外植体失活，从细胞结构角度分析，原因是________。
（2）组织培养过程中外植体通常选取黄花蒿分生组织更易诱导形成愈伤组织，原因是________。当黄花蒿愈伤组织在只含有细胞分裂素的培养基上培养时，出现具有分生能力的绿色芽点，但要继续出芽，通常在培养基中添加________，以促进幼苗形成。研究中用光学显微镜可以观察到的现象是________（填下列序号）。
①绿色芽点细胞排列松散
②胚状体细胞中有叶绿体
③分化的愈伤组织的各细胞的形态大小一致
（3）研究人员在对黄花蒿进行组织培养时，发现愈伤组织中没有青蒿素或青蒿素含量极少，试分析根本原因是________。
（4）研究人员得到的黄花蒿幼苗叶片颜色为黄色，可能的原因是培养基中没有添加Mg元素，也可能是________。
（5）科研工作者研究发现黄花蒿的青蒿素主要在叶片腺毛中合成与积累，并受到如水杨酸（SA）和茉莉酸甲酯（MeJA）等植物激素的调节。研究表明，SA和MeJA通过调控miR160（miR160是一种微小RNA，能与靶mRNA结合，引起后者降解）的表达量，影响黄花蒿腺毛密度和青蒿素含量。miR160的一种靶mRNA编码ARF1蛋白，该蛋白影响青蒿素合成关键酶基因DBR2的表达。研究结果如图所示。
①据图分析可知，miR160的表达量与青蒿素含量间呈现________（填“正”或“负”）相关性，并且可以推测外源MeJA处理对青蒿素含量的影响是________，SA和MeJA在调控miR160的表达量时，这两种激素之间表现为________作用。
②基于上述材料，miR160通过直接影响________，调控青蒿素的合成。
【答案】（1） ①. 70% ②. 叶绿体中的色素(或叶绿素)可溶于酒精溶液中 ③. 酒精会破坏细胞的生物膜（原生质层）结构，导致细胞死亡
（2） ①. 分生组织的细胞分裂较为旺盛，容易得到愈伤组织 ②. 适量的生长素 ③. ②
（3）相关基因没有在愈伤组织中表达或表达程度较低
（4）培养过程中未给予光照
（5） ①. 负 ②. MeJA提高青蒿素含量 ③. 协同 ④. ARF1蛋白的合成（或ARF1基因的表达）
【解析】
【小问1详解】
植物组织培养中，外植体消毒常用体积分数为70%的酒精；酒精是有机溶剂，幼嫩材料中的色素易溶于酒精，易在酒精溶液中失绿；酒精会使蛋白质变性，破坏细胞生物膜结构，浸泡时间过长会导致细胞结构被破坏、细胞死亡，外植体失活。
【小问2详解】
植物组织培养过程中外植体通常选取黄花蒿分生组织的原因是分生组织的细胞分裂较为旺盛，容易得到愈伤组织；当黄花蒿愈伤组织在只含有细胞分裂素的培养基上培养时，出现具有分生能力的绿色芽点，但要继续出芽，通常在培养基中添加适量的生长素，以促进幼苗形成。
①绿色芽点属于分生组织，细胞排列紧密，①错误；
②胚状体已经分化出叶片细胞，细胞内含有叶绿体，光学显微镜可以观察到，②正确；
③分化后细胞的形态功能出现差异，大小并不一致，③错误。
【小问3详解】
研究人员在对黄花蒿进行组织培养时，发现愈伤组织中没有青蒿素或青蒿素含量极少，其根本原因是相关基因没有在愈伤组织中表达或表达程度较低。
【小问4详解】
植物叶片发黄，说明植物体内的叶绿素含量很少或几乎没有，原因可能是培养基中未添加Mg2+，影响叶绿素的合成，也可能是培育过程中没有给予光照，影响了叶绿素的合成。
【小问5详解】
①据题图信息可知，miR160基因过表达时，青蒿素含量降低；敲除miR160基因时，青蒿素含量升高，所以miR160的表达量与青蒿素含量间呈现负相关性。从图中看到，MeJA 处理组与对照组相比，miR160 表达量降低，而 miR160 表达量与青蒿素含量负相关，所以可以推测外源 MeJA 处理会使青蒿素含量增加。从图中看到，SA和MeJA都可以降低miR160的表达量，作用方向一致，表现为协同作用。
②已知miR160是一种微小RNA，能与靶mRNA结合，引起后者降解，且miR160的一种靶mRNA编码ARF1蛋白，所以miR160通过直接影响 ARF1蛋白的合成（或 ARF1基因的表达），调控青蒿素的合成。
根据题意，miR160可特异性结合编码ARF1蛋白的靶mRNA并使其降解，因此miR160直接影响ARF1蛋白的合成（翻译过程），进而调控青蒿素合成。
23. 羊乳中的β-乳球蛋白（BLG）是人体主要过敏原。为解决奶制品过敏问题，科研人员利用基因编辑技术敲除山羊细胞中的BLG基因，同时转入人乳铁蛋白（hLF）基因。下图是制备转基因山羊的流程图，请据此回答：
注：sgBLG/Cas9复合物中，sgBLG是能准确识别山羊DNA特定序列的RNA，并引导Cas9蛋白对DNA进行切割。
（1）Cas9蛋白类似于基因工程中常用到的________酶，能断开________键，但Cas9蛋白特性与该酶的区别是________。
（2）图中复合物1识别的DNA序列为5′-TATACTGGC-3′，则sgBLG序列为________。
A. 5′-AUAUGACCG-3′B. 5′-GCCAGTATA-3′
C. 5′-ATATGACCG-3′D. 5′-GCCAGUAUA-3′
（3）过程③中，作为受体细胞的“母羊丙卵细胞”实际是培养成熟的________（时期）卵母细胞，在对其去核时，还应同时去除位于________内的第一极体。
（4）过程④体外培养重构胚时，须提供适宜的营养物质、创造________的环境、适宜的________和适宜的气体环境。过程⑤一般选择培养发育到桑葚胚或囊胚阶段的胚胎移植到母羊丁子宫中。
（5）正常胚胎发育初期会发生染色质重塑：DNA去甲基化和染色体上组蛋白的乙酰化。重构胚中来自体细胞的染色质会抵抗这种重塑。有研究表明用去甲基化酶（K）处理核移植得到的胚胎，可提高胚胎发育率。科研人员用K和T（去乙酰化酶抑制剂）处理重构胚后再进行胚胎移植，检测并计算出发育成囊胚的比例（囊胚率=囊胚数/重构胚），结果如图，T+K处理的结果明显高于T单独处理。下列相关推测不合理的有________。
A. 对照组与实验组重构胚的核DNA序列不同
B. K、T分别降低了DNA甲基化与组蛋白乙酰化程度
C. K、T可能通过类似方式提高重构胚的囊胚率
D. K、T通过改变重构胚中DNA的碱基排序提高囊胚率
【答案】（1） ①. 限制##限制性内切核酸 ②. 磷酸二酯 ③. Cas9蛋白没有限制酶具有专一识别DNA分子特定核苷酸序列的特性 （2）D
（3） ①. MⅡ期##减数分裂Ⅱ中期##减数第二次分裂中期 ②. 透明带
（4） ①. 无菌、无毒 ②. 温度、pH、渗透压 （5）AD
【解析】
【小问1详解】
图注表明：Cas9蛋白可以切割DNA分子，所以与限制酶作用类似，作用是断开磷酸二酯键。sgBLG能准确识别图中山羊DNA特定序列的RNA，并引导Cas9蛋白对DNA进行切割，说明Cas9蛋白没有限制性内切核酸酶具有专一识别DNA分子特定核苷酸序列的特性。
【小问2详解】
sgBLG为能准确识别图中山羊DNA特定序列的RNA，转录的方向是从DNA模板的3′到5′，因此转录产生的RNA序列是5′-GCCAGUAUA-3′，D正确。
【小问3详解】
在核移植技术中，作为受体细胞的卵母细胞需要培养到减数分裂Ⅱ中期（MⅡ期），此时的卵母细胞才具有较高的全能性。在对卵母细胞去核时，还应同时去除位于透明带内的第一极体。
【小问4详解】
培养重构胚时，须提供适宜的营养物质，创造无菌、无毒环境，适宜的温度、pH、渗透压和适宜的气体环境。
【小问5详解】
A、DNA去甲基化和染色体上组蛋白的乙酰化不影响DNA序列，所以对照组与实验组重构胚的核DNA序列相同，A错误；
B、由题干可知：去甲基化酶（K）处理核移植得到的胚胎，可提高胚胎发育率，由图可知，T（去乙酰化酶抑制剂）处理核移植得到的胚胎，可提高胚胎发育率，K、T分别升高了DNA去甲基化与组蛋白去乙酰化程度，即K、T分别降低了DNA甲基化与组蛋白乙酰化程度，B正确；
C、由题干可知：去甲基化酶（K）处理核移植得到的胚胎，可提高胚胎发育率，由图可知，T（去乙酰化酶抑制剂）处理核移植得到的胚胎，可提高胚胎发育率，K、T可能通过影响基因的表达这一途径提高重构胚的囊胚率，C正确；
D、DNA去甲基化和染色体上组蛋白的乙酰化不影响碱基排序，所以K、T不改变重构胚中DNA的碱基排序，D错误。
24. 某生物兴趣小组尝试用多种方法开展DNA粗提取与鉴定。
Ⅰ：盐析法：
材料处理：称取新鲜的花菜、辣椒和蒜黄各2份，每份10g。剪碎后分成两组，一组置于20℃、另一组置于-20℃条件下保存24h。
（1）DNA粗提取：
第一步：将上述材料切碎后分别放入研钵中，各加入一定量的研磨液，进行充分研磨，过滤后收集滤液。
第二步：先向6只小烧杯中分别注入10mL滤液，再加入20mL冷却的体积分数为95%的________，然后用玻璃棒缓缓地向一个方向搅拌，使絮状物缠绕在玻璃棒上。
第三步：取6支试管，分别加入等量的2ml/L________溶液溶解上述絮状物。
（2）DNA检测：
在上述试管中各加入4mL________试剂。混合均匀后，置于沸水中加热5min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅，结果如表。
（3）实验分析：
①该探究性实验课题名称是：________。
②根据实验结果，得出结论并分析：
结论1：与20℃相比，相同实验材料在-20℃条件下保存，DNA的提取量较________（填“多”或“少”）。
结论2：等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从________中提取的DNA量最多。
③针对结论1，请提出合理的解释：低温抑制了________的活性，DNA降解速度慢。
Ⅱ：“CTAB法”和“SDS法”：
CTAB提取液含有CTAB、EDTA等成分，SDS提取液含SDS、EDTA等成分。CTAB能破坏膜结构，使蛋白质变性，并提高DNA在提取液中的溶解度；SDS能破坏膜结构，使蛋白质变性；EDTA能螯合Mg2+、Mn2+，抑制DNA酶的活性。为了寻找提取腊梅DNA的优良方法，比较了两种提取DNA的方法，主要操作如下：
实验测定结果如下（表中OD260反映溶液中核酸的浓度，OD280反映溶液中蛋白质的浓度。理论上，纯DNA溶液的OD260/OD280为1.8，纯RNA溶液的OD260/OD280为2.0）。
请回答下列问题。
（4）CTAB法和SDS法提取液中都加入EDTA的目的是________。
（5）氯仿-异戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA不溶于氯仿-异戊醇，蛋白质等杂质可溶于氯仿-异戊醇。实验过程中加入氯仿-异戊醇离心后，应取①________，将其加入异丙醇（异丙醇与水互溶）并离心进行纯化，利用异丙醇溶液纯化DNA的原理是________。
（6）两种方法中，________法提取的DNA较多，其可能原因是________。
【答案】（1） ①. 酒精 ②. 多
（2）二苯胺 （3） ①. 探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响 ②. 二苯胺 ③. 蒜黄 ④. DNA酶
（4）EDTA抑制DNA酶的活性，减少DNA水解
（5） ①. 上清液 ②. DNA不溶于异丙醇，而杂质能溶于异丙醇
（6） ①. CTAB法 ②. CTAB提高了DNA在 提取液中的溶解度，从而能提取出更多的DNA
【解析】
【小问1详解】
进行DNA粗提取，需要将滤液加入冷却的体积分数为95%的酒精中，因为DNA不溶于酒精，而蛋白质溶于酒精，可以进行粗提取。由于DNA在2ml/l NaCl溶液溶解度最大，所以将絮状物溶于2ml/l NaCl溶液。
【小问2详解】
DNA可以用二苯胺试剂检测，所以在DNA溶液中加入4ml二苯胺试剂，置于沸水中加热5min，待试管冷却后比较溶液的颜色深浅。
【小问3详解】
实验自变量有温度和实验材料，因变量是提取的DNA的量，所以实验课题名称是：探究不同材料和不同保存温度对DNA提取量的影响。
结论1：与20℃相比，相同实验材料在-20℃条件下保存，与二苯胺沸水浴加热后蓝色更深，说明DNA的提取量较多。
结论2：等质量的不同实验材料，在相同的保存温度下，从蒜黄提取的DNA量最多，因此其与二苯胺沸水浴加热后蓝色最深。
②出现结论1的原因是：低温抑制了DNA酶的活性，DNA降解速度慢。
【小问4详解】
EDTA能螯合Mg2+、Mn2+，抑制DNA酶的活性，减少DNA水解，提高DNA的完整性和总量。
【小问5详解】
氯仿-异戊醇密度均大于水且不溶于水，DNA不溶于氯仿-异戊醇，离心后，氯仿-异戊醇位于试管的底部，DNA溶于上清液中，所以离心后应该取上清液；含DNA的上清液中加异丙醇离心后取的是沉淀物，说明DNA不溶于异丙醇，而杂质能溶于异丙醇。
【小问6详解】
从表中数据可知，CTAB法提取的DNA的OD260/OD280是1.833，而SDS法提取的DNA的OD260/OD280是1.200，与1.833相比，1.200偏离1.800更多，所以SDS法提取的DNA纯度较低，CTAB法提取的DNA较多。可能得原因是CTAB提高了DNA在 提取液中的溶解度，从而能提取出更多的DNA。蛋白胨
乳糖
磷酸氢二钾
琼脂
蒸馏水
2%伊红水溶液
0.5%亚甲蓝水溶液
10g
10g
2g
20~30g
1000ml
20mL
13mL
实验目的
简要操作步骤
________
将滤膜放入装有蒸馏水的烧杯中，加热煮沸15min，共煮沸三次。
过滤细菌
装置安装好后，向漏斗内分次加入l000mL水样，加盖抽滤。
冲洗漏斗壁
再向漏斗内加等量无菌水继续抽滤。
培养大肠杆菌
完成过滤后用无菌镊子取滤膜，将其________（填“A面”或“B面”）紧贴在伊红一亚甲蓝培养基上。然后将平板________，37℃培养48小时。
统计大肠杆菌菌落数
选取________的菌落进行计数，统计结果为0个。
保存温度
材料
花菜
辣椒
蒜黄
20℃
++
+
+++
-20℃
+++
++
+++
CTAB
SDS
OD260
OD280
OD260/OD280
OD260
OD280
OD260/OD280
0.003
0.018
1.833
0.006
0.005
1.200