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高三一轮复习生物：3.3节 基因工程的应用课件
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这是一份高三一轮复习生物：3.3节 基因工程的应用课件，共54页。PPT课件主要包含了抗逆转基因植物，思考讨论，课堂小结等内容，欢迎下载使用。
胰岛素是治疗糖尿病的特效药物。传统生产胰岛素的方法是从猪、牛等动物的胰腺中提取。曾经生产供一位糖尿病病人使用一年的胰岛素需要上千头牛，生产的成本非常高。1978年，科学家将编码人胰岛素的基因导入大肠杆菌细胞中。
使大肠杆菌表达重组人胰岛素。我国拥有自主知识产权的基因工程物---重组人胰岛素已经研制成功并得到广泛应用。
抗虫棉、转基因大豆、重组人干扰素、促红细胞生成素等。
除了生产胰岛素，基因工程还有那些应用呢？
基因工程自20世纪70年代兴起后，得到飞速发展，展示出广阔前景。
①1996-2017年，全世界转基因作物种植面积增加了100多倍。转基因作物的种植使化学农药的施用量减少了8.2%，作物产量增加了6.6×108t,增加经济效益1.3万亿。
②美国是世界上转基因作物种植面积最大的国家。
③世界转基因作物种植面积最大的是大豆，其次是玉米、棉花。
④我国转基因作物的种植面积位居世界第八位，商业化种植的转基因作物有棉花和番木瓜。
①几乎每年都有令人瞩目的研究成果报道，有些成果正在进入实用化和商业化开发的阶段。
②2015年11月，第一种用于食用的转基因动物——转基因大西洋鲑（俗称“三文鱼”）在美国获得批准上市。
基因工程在农牧业中的应用发展迅速。已被广泛用于改良动植物品种、提高作物和畜产品产量等方面。
1. 基因工程在农牧业方面的应用
从某些生物中分离出具有抗虫功能的基因，导入作物，使其具有抗虫性。
转基因抗虫棉、玉米、大豆、水稻和马铃薯等。
Bt毒蛋白基因；蛋白酶抑制剂基因；淀粉酶抑制剂基因；植物凝集素基因等。
优点：减少因化学农药的使用而造成的环境污染和对人类健康的损害、降低生产成本、提高产量。
将来源于某些病毒、真菌等的抗病基因导入植物中，培育出转基因抗病植物。
抗病毒转基因甜椒、番木瓜和烟草等
病毒外壳蛋白基因（CP基因）病毒的复制酶基因
几丁质酶基因抗毒素合成基因
将降解或抵抗某种除草剂的基因导入作物，可培育出抗除草剂的作物品种。
转基因抗除草剂玉米、大豆、油菜和甜菜等
（1）哪些环境条件会造成农作物低产、减产？
盐碱、干旱、低温和涝害等
（2）盐碱和干旱对农作物的危害与什么有关？
（3）在抗盐碱和抗干旱作物中使用了什么基因？
调节细胞渗透压的基因
思考： 我国西北地区的主要气候特点是年降雨量小，从而影响粮食的产量，如果从基因工程的角度考虑，如何避免粮食减产？
可以用基因工程技术培育抗旱作物（筛选获取抗旱基因）
培育方法：利用转基因技术改良植物的营养价值、观赏价值等。
改善粮食作物的营养成分含量，如氨基酸、蛋白质
转基因鲤鱼的生长速率比非转基因鲤鱼提高了42%～115%。
转生长激素基因鲤鱼（下）与非转基因鲤鱼（上）
乳汁中乳糖的含量大大降低的转基因牛
1.从环境保护角度出发，分析转基因抗虫棉与普通棉相比在害虫防治方面的优越性有哪些？
减少了化学农药的使用量，降低了环境污染。降低生产成本。
2.种植转基因抗虫棉若干年后，害虫会不会对转基因抗虫棉产生抗性？为什么？
会。害虫会因遗传物质发生改变产生对转基因抗虫棉的抗性。
3.为什么将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组能降低牛奶中的乳糖含量？
肠乳糖酶基因在奶牛乳腺细胞中表达出乳糖酶，可以分解乳汁中的乳糖。
【例1】下列关于培育转基因抗虫棉的叙述，正确的是（ ）
A.DNA连接酶能把Bt抗虫蛋白基因与噬菌体相连接B.Bt抗虫蛋白基因可借助花粉管通道进入受体细胞C.Bt抗虫蛋白对害虫和人都有不同程度的毒害作用D.需制备好相应抗原来检测Bt基因是否翻译成Bt抗虫蛋白
【例2】下列有关目的基因的操作能够改善产品品质的是（ ）A.将草鱼的生长激素基因导入鲤鱼体内B.将肠乳糖酶的基因导入奶牛的基因组C.将降解或抵抗某种除草剂的基因导入玉米D.将Bt抗虫蛋白基因整合到烟草或棉花的基因组并实现表达
让转基因哺乳动物批量生产药物
用转基因动物作为器官移植的供体
对微生物或动植物的细胞进行基因改造生产药物
2. 基因工程在医药卫生领域的应用
我国生产的重组人干扰素、血小板生成素、促红细胞生成素和粒细胞集落刺激因子等基因工程药物均已投放市场。
可以用来预防和治疗人类肿瘤、心血管疾病、传染病、糖尿病和类风湿关节炎等；
（1）对微生物或动植物的细胞进行基因改造生产药物
细胞因子、抗体、疫苗和激素等。
干扰素是一种具有干扰病毒复制作用的糖蛋白，在临床上被广泛用于治疗病毒感染性疾病。此外，干扰素对于治疗乳腺癌、淋巴癌、多发骨髓瘤和某些白血病等也有一定的疗效。
1993年我国批准生产重组人干扰素α-1b，它是我国批准生产的第一个基因工程药物，目前主要用于治疗慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎等。
1980-1982年，科学家用基因工程方法从大肠杆菌及酵母菌细胞内获得了干扰素，从1Kg培养物中可以得到20—40mg干扰素。
传统生产干扰素的方法是从人血液中的白细胞内提取，每300L血液只能提取1mg干扰素。
①干扰素的化学本质是什么？②干扰素的作用机理是怎样的？③干扰素用于哪些疾病的治疗？④传统生产干扰素的方法是什么？⑤目前大量生产干扰素的方法是什么？⑥我国批准生产的第一个基因工程药物的名称叫什么？ 用于治疗哪些疾病？
病毒感染性疾病、乳腺癌、淋巴癌、多发骨髓瘤和某些白血病等
从人血液中的白细胞内提取
用基因工程方法从大肠杆菌及酵母菌细胞内获得
主要用于治疗慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎等
（2）让转基因哺乳动物批量生产药物
目前已经在牛、山羊等动物的乳腺生物反应器中，获得了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素和α-抗胰蛋白酶等重要医药产品
乳腺生物反应器或乳房生物反应器
注意：启动子具有物种和组织的特异性
乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件
A.动物泌乳期有间隔B.有些蛋白不能在乳腺里表达C.某些蛋白在乳腺中的修饰可能与天然状态不同
A.适合于表达高等动物体内的复杂蛋白B.制备乳腺反应器的方法成熟C.乳腺是天然的高效合成蛋白质的器官D.乳汁中重组蛋白的提取和纯化相对容易
A.可以从动物一出生就收集产物，不论动物的性别和是否处于生殖期。B.从尿液中提取蛋白质比从乳汁中提取更简便、高效。
1.乳腺生物反应器指的是转基因动物的乳腺吗？2.为什么将药用蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起？3.药用蛋白基因存在于转基因动物的哪些细胞中？4.生物反应器除了用乳腺，还可以用什么器官？5.膀胱生物反应器哪些方面优于乳腺生物反应器？6.研制膀胱生物反应器时，应如何处理目的基因？7.用生物反应器生产药物的优点？
让药用蛋白基因只在乳腺细胞中特异性表达
不局限于性别与生长期（乳腺生物反应器必须是雌性，且泌乳期才会分泌）
将目的基因与膀胱上皮细胞中特异表达的基因的启动子重组
不是，乳腺生物反应器指的就是这个转基因生物
思考： 根据前面学过的基因工程的操作程序，说出通过基因工程方法用酵母菌生产乙肝疫苗的过程是怎样的？（提示：乙肝病毒抗原蛋白基因）
①用PCR扩增乙肝病毒抗原蛋白基因；②将乙肝病毒抗原蛋白基因插入质粒，构建基因表达载体；③将该基因表达载体导入酵母菌(该过程也是将酵母菌制备成感受态细胞，但是并不是用Ca2+处理，而是用醋酸锂处理）；④检测并鉴定，筛选出成功转化的酵母菌，进行发酵培养，分离并提纯产物，获得乙肝病毒抗原蛋白。
寻求可替代的移植器官，如用猪的器官来解决人类器官移植的来源问题
（3）用转基因动物作为器官移植的供体
①人体器官移植的难题：
人体移植器官短缺是世界性难题
a.猪的内脏构造、大小、血管分布与人极为相似
b.猪体内隐藏的、可导致人类疾病的病毒远远少于灵长类动物
培育无免疫排斥的转基因克隆猪器官
抑制抗原决定基因表达或除去抗原决定基因
在器官供体基因组中导入某种调节因子
抗体恒定区（C区）在不同物种中存在差异，因此鼠源单抗会被人体免疫系统识别为抗原。科学家设法将鼠源抗体的恒定区（C区）替换成人的，或者只保留鼠源抗体中对抗原识别起决定性作用的部分（CDRs）。这两类的抗体都可以通过设计嵌合基因通过基因工程来实现工业化生产。不过，最安全的还是全人源化抗体。
免疫系统的“自我”识别是胚胎发育阶段发展出来的。在小鼠免疫系统发展出自我识别之前替换成人的抗体生成基因，就可以产生出全人源化抗体（并被小鼠识别为自我）。
部分利用基因工程技术生产的医用多肽和蛋白质类产品
哺乳动物基因的结构与人类结构基本相同
细菌或酵母菌等生物的基因结构与人类基因结构有较大差异
细菌细胞内缺少内质网、高尔基体等细胞器，合成的蛋白质可能不具有生物活性
Ca2+处理法（感受态细胞法）
不需要严格的灭菌，温度等外界条件对其影响不大
需严格灭菌，严格控制工程菌所需的温度、pH、营养物质浓度等外界条件
从动物乳汁中提取，相对简单
（一般经过工业发酵后）从微生物细胞（或发酵液）中提取，相对复杂
假如某位心脏病病人换上经过改造的猪心脏后，过上健康人的生活，在生活中，他会遭到歧视吗？对此你怎么看？
生命和健康是人最宝贵的东西，如果一个病人换上了经过改造的猪心脏重获了健康，我们不仅不能歧视他，还应该从他身上看到现代生物技术在维持人体健康、治疗疾病等方面的应用价值。
利用基因工程菌，除了可以生产药物，还能生产食品工业用酶、氨基酸和维生素等
用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类。
3.基因工程在食品工业方面的应用
一种普遍使用的甜味剂，主要由天冬氨酸和苯丙氨酸形成，这两种氨基酸可通过基因工程实现大规模生产。
奶酪生产中用来凝聚固化奶中的蛋白质
将编码牛凝乳酶的基因导入大肠杆菌、黑曲霉或酵母菌的基因组中，再通过工业发酵批量生产凝乳酶
传统制备方法：杀死未断奶的小牛，将其第四胃的黏膜取出来提取。
基因工程获得的工业用酶的纯度更高，生产成本显著降低，生产效率较高。
加工转化糖浆需要淀粉酶，加工烘烤食物要用到脂酶
构建基因工程菌，然后用发酵技术大量生产
鸡蛋白基因在大肠杆菌和酵母菌中表达获得成功。这表明，未来能用发酵罐培养的大肠杆菌或酵母菌来生产人类所需要的卵清蛋白。
（4）其他：基因工程使人们更容易培育出具有优良性状的动植物品种，获得很多过去难以得到的生物制品。
基因工程为人类开辟新的食物来源。
用基因工程的方法从微生物中获得人们所需要的糖类、脂肪和维生素等产品。
4.其他应用：环保领域的应用
培育可以降解多种污染物的“超级细菌”来处理环境污染。
利用经过基因改造的微生物来生产清洁能源。
3种淀粉酶基因组成的复合基因
乙醇单位产量的利润提高了8%-15%
金属硫蛋白能结合Cd2+和Hg2+
1.与大肠杆菌相比，用酵母菌生产人的胰岛素有什么优势？
酵母菌为真核生物，有生物膜系统，可通过内质网和高尔基体对产生的胰岛素进行加工和修饰，从而产生有活性的胰岛素。
2.培育乳腺生物反应器时为什么要选用乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件与药用蛋白基因重组在一起？
目的是让药用蛋白基因只在乳腺细胞中表达。
3.与工厂化生产药用蛋白相比，用动物乳腺生物反应器生产药用蛋白的优势有哪些？
(1)动物乳腺有完整的蛋白质翻译后修饰系统，生产的蛋白质活性高，更稳定。(2)产物直接经乳汁分泌，易提取。
目前我国批准发放了哪些转基因作物的生产应用安全证书和进口安全证书？
截至2019年年底，我国批准发放过转基因耐储藏番茄、转基因抗虫棉、改变花色的转基因矮牵牛、转基因抗病辣椒、转基因抗病番木瓜、转基因抗虫水稻、转植酸酶基因玉米以及转基因耐除草剂大豆的生产应用安全证书；批准了转基因棉花、大豆、玉米、油菜、甜菜和番木瓜的进口安全证书，但我国进口的基本上是转基因棉花的纤维，其他进口转基因作物的用途仅限于用作加工原料；我国没有批准任何一种转基因粮食作物种子进口到我国境内商业化种植。
让哺乳动物批量生产药物
一.概念检测1.将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后，重新导入大肠杆菌的细胞内，再通过发酵工程就能大量生产人生长激素。下列相关叙述正确的是 ( )A. 转录生长激素基因需要解旋酶和DNA连接酶B. 发酵产生的生长激素属于大肠杆菌的初生代谢物C. 大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异可以遗传D. 大肠杆菌质粒标记基因中腺瞟吟和尿囉曉的含量相等
一.概念检测2.基因工程应用广泛，成果丰硕。下列不属于基因工程应用的是 ( )A.培育青霉菌并从中提取青霉素B.利用乳腺生物反应器生产药物C.制造一种能降解石油的“超级细菌”D.制造一种能产生干扰素的基因工程菌
二、拓展应用1. 除草剂的有效成分草甘膦能够专一地抑制EPSP合酶的活性，从而使植物体内多种代谢途径受到影响而导致植物死亡。草甘膦没有选择性，它在除掉杂草的同时也会使作物受损。解决这个问题的方法之一就是培育抗草甘膦的作物。(1) 下面是探究“转入外源EPSP合酶基因能否使矮牵牛抗草甘膦”的流程，请补充完整。①用_______________________等处理含有目的基因的DNA片段和Ti质粒，构建重组Ti质粒；②将重组Ti质粒转入农杆菌中；③利用含有重组Ti质粒的农杆菌侵染________细胞，再通过培育得到转基因植株；④用草甘膦同时喷洒转基因植和对照组植株。结果：对照组植株死亡，转基因植株存活,但也受到了影响。结论：_________________________________________________ 。
转基因矮牵牛对草甘膦产生了一定的抗性
二、拓展应用1. 除草剂的有效成分草甘膦能够专一地抑制EPSP合酶的活性，从而使植物体内多种代谢途径受到影响而导致植物死亡。草甘膦没有选择性，它在除掉杂草的同时也会使作物受损。解决这个问题的方法之一就是培育抗草甘膦的作物。(2) 请思考并回答下列问题。①在该实验中，对照组是怎样设计的？②如果增加转入的外源EPSP合酶基因的数量，转基因矮牵牛对草甘膦的抗性是否会增加？请你给出进一步探究的思路。
对照组为非转基因矮牵牛理论上增加转入的外源EPSP合酶基因的数量，矮牵牛体内EPSP合酶的表达水平会升高，它对草甘膦的抗性会增强
将不同拷贝数的EPSP合酶基因分别转入矮牵牛细胞中，培育转基因植株，比较它们对草甘膦抗性的差异
胰岛素是治疗糖尿病的特效药物。传统生产胰岛素的方法是从猪、牛等动物的胰腺中提取。曾经生产供一位糖尿病病人使用一年的胰岛素需要上千头牛，生产的成本非常高。1978年，科学家将编码人胰岛素的基因导入大肠杆菌细胞中。
使大肠杆菌表达重组人胰岛素。我国拥有自主知识产权的基因工程物---重组人胰岛素已经研制成功并得到广泛应用。
抗虫棉、转基因大豆、重组人干扰素、促红细胞生成素等。
除了生产胰岛素，基因工程还有那些应用呢？
基因工程自20世纪70年代兴起后，得到飞速发展，展示出广阔前景。
①1996-2017年，全世界转基因作物种植面积增加了100多倍。转基因作物的种植使化学农药的施用量减少了8.2%，作物产量增加了6.6×108t,增加经济效益1.3万亿。
②美国是世界上转基因作物种植面积最大的国家。
③世界转基因作物种植面积最大的是大豆，其次是玉米、棉花。
④我国转基因作物的种植面积位居世界第八位，商业化种植的转基因作物有棉花和番木瓜。
①几乎每年都有令人瞩目的研究成果报道，有些成果正在进入实用化和商业化开发的阶段。
②2015年11月，第一种用于食用的转基因动物——转基因大西洋鲑（俗称“三文鱼”）在美国获得批准上市。
基因工程在农牧业中的应用发展迅速。已被广泛用于改良动植物品种、提高作物和畜产品产量等方面。
1. 基因工程在农牧业方面的应用
从某些生物中分离出具有抗虫功能的基因，导入作物，使其具有抗虫性。
转基因抗虫棉、玉米、大豆、水稻和马铃薯等。
Bt毒蛋白基因；蛋白酶抑制剂基因；淀粉酶抑制剂基因；植物凝集素基因等。
优点：减少因化学农药的使用而造成的环境污染和对人类健康的损害、降低生产成本、提高产量。
将来源于某些病毒、真菌等的抗病基因导入植物中，培育出转基因抗病植物。
抗病毒转基因甜椒、番木瓜和烟草等
病毒外壳蛋白基因（CP基因）病毒的复制酶基因
几丁质酶基因抗毒素合成基因
将降解或抵抗某种除草剂的基因导入作物，可培育出抗除草剂的作物品种。
转基因抗除草剂玉米、大豆、油菜和甜菜等
（1）哪些环境条件会造成农作物低产、减产？
盐碱、干旱、低温和涝害等
（2）盐碱和干旱对农作物的危害与什么有关？
（3）在抗盐碱和抗干旱作物中使用了什么基因？
调节细胞渗透压的基因
思考： 我国西北地区的主要气候特点是年降雨量小，从而影响粮食的产量，如果从基因工程的角度考虑，如何避免粮食减产？
可以用基因工程技术培育抗旱作物（筛选获取抗旱基因）
培育方法：利用转基因技术改良植物的营养价值、观赏价值等。
改善粮食作物的营养成分含量，如氨基酸、蛋白质
转基因鲤鱼的生长速率比非转基因鲤鱼提高了42%～115%。
转生长激素基因鲤鱼（下）与非转基因鲤鱼（上）
乳汁中乳糖的含量大大降低的转基因牛
1.从环境保护角度出发，分析转基因抗虫棉与普通棉相比在害虫防治方面的优越性有哪些？
减少了化学农药的使用量，降低了环境污染。降低生产成本。
2.种植转基因抗虫棉若干年后，害虫会不会对转基因抗虫棉产生抗性？为什么？
会。害虫会因遗传物质发生改变产生对转基因抗虫棉的抗性。
3.为什么将肠乳糖酶基因导入奶牛基因组能降低牛奶中的乳糖含量？
肠乳糖酶基因在奶牛乳腺细胞中表达出乳糖酶，可以分解乳汁中的乳糖。
【例1】下列关于培育转基因抗虫棉的叙述，正确的是（ ）
A.DNA连接酶能把Bt抗虫蛋白基因与噬菌体相连接B.Bt抗虫蛋白基因可借助花粉管通道进入受体细胞C.Bt抗虫蛋白对害虫和人都有不同程度的毒害作用D.需制备好相应抗原来检测Bt基因是否翻译成Bt抗虫蛋白
【例2】下列有关目的基因的操作能够改善产品品质的是（ ）A.将草鱼的生长激素基因导入鲤鱼体内B.将肠乳糖酶的基因导入奶牛的基因组C.将降解或抵抗某种除草剂的基因导入玉米D.将Bt抗虫蛋白基因整合到烟草或棉花的基因组并实现表达
让转基因哺乳动物批量生产药物
用转基因动物作为器官移植的供体
对微生物或动植物的细胞进行基因改造生产药物
2. 基因工程在医药卫生领域的应用
我国生产的重组人干扰素、血小板生成素、促红细胞生成素和粒细胞集落刺激因子等基因工程药物均已投放市场。
可以用来预防和治疗人类肿瘤、心血管疾病、传染病、糖尿病和类风湿关节炎等；
（1）对微生物或动植物的细胞进行基因改造生产药物
细胞因子、抗体、疫苗和激素等。
干扰素是一种具有干扰病毒复制作用的糖蛋白，在临床上被广泛用于治疗病毒感染性疾病。此外，干扰素对于治疗乳腺癌、淋巴癌、多发骨髓瘤和某些白血病等也有一定的疗效。
1993年我国批准生产重组人干扰素α-1b，它是我国批准生产的第一个基因工程药物，目前主要用于治疗慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎等。
1980-1982年，科学家用基因工程方法从大肠杆菌及酵母菌细胞内获得了干扰素，从1Kg培养物中可以得到20—40mg干扰素。
传统生产干扰素的方法是从人血液中的白细胞内提取，每300L血液只能提取1mg干扰素。
①干扰素的化学本质是什么？②干扰素的作用机理是怎样的？③干扰素用于哪些疾病的治疗？④传统生产干扰素的方法是什么？⑤目前大量生产干扰素的方法是什么？⑥我国批准生产的第一个基因工程药物的名称叫什么？ 用于治疗哪些疾病？
病毒感染性疾病、乳腺癌、淋巴癌、多发骨髓瘤和某些白血病等
从人血液中的白细胞内提取
用基因工程方法从大肠杆菌及酵母菌细胞内获得
主要用于治疗慢性乙型肝炎、慢性丙型肝炎等
（2）让转基因哺乳动物批量生产药物
目前已经在牛、山羊等动物的乳腺生物反应器中，获得了抗凝血酶、血清白蛋白、生长激素和α-抗胰蛋白酶等重要医药产品
乳腺生物反应器或乳房生物反应器
注意：启动子具有物种和组织的特异性
乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件
A.动物泌乳期有间隔B.有些蛋白不能在乳腺里表达C.某些蛋白在乳腺中的修饰可能与天然状态不同
A.适合于表达高等动物体内的复杂蛋白B.制备乳腺反应器的方法成熟C.乳腺是天然的高效合成蛋白质的器官D.乳汁中重组蛋白的提取和纯化相对容易
A.可以从动物一出生就收集产物，不论动物的性别和是否处于生殖期。B.从尿液中提取蛋白质比从乳汁中提取更简便、高效。
1.乳腺生物反应器指的是转基因动物的乳腺吗？2.为什么将药用蛋白基因与乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件重组在一起？3.药用蛋白基因存在于转基因动物的哪些细胞中？4.生物反应器除了用乳腺，还可以用什么器官？5.膀胱生物反应器哪些方面优于乳腺生物反应器？6.研制膀胱生物反应器时，应如何处理目的基因？7.用生物反应器生产药物的优点？
让药用蛋白基因只在乳腺细胞中特异性表达
不局限于性别与生长期（乳腺生物反应器必须是雌性，且泌乳期才会分泌）
将目的基因与膀胱上皮细胞中特异表达的基因的启动子重组
不是，乳腺生物反应器指的就是这个转基因生物
思考： 根据前面学过的基因工程的操作程序，说出通过基因工程方法用酵母菌生产乙肝疫苗的过程是怎样的？（提示：乙肝病毒抗原蛋白基因）
①用PCR扩增乙肝病毒抗原蛋白基因；②将乙肝病毒抗原蛋白基因插入质粒，构建基因表达载体；③将该基因表达载体导入酵母菌(该过程也是将酵母菌制备成感受态细胞，但是并不是用Ca2+处理，而是用醋酸锂处理）；④检测并鉴定，筛选出成功转化的酵母菌，进行发酵培养，分离并提纯产物，获得乙肝病毒抗原蛋白。
寻求可替代的移植器官，如用猪的器官来解决人类器官移植的来源问题
（3）用转基因动物作为器官移植的供体
①人体器官移植的难题：
人体移植器官短缺是世界性难题
a.猪的内脏构造、大小、血管分布与人极为相似
b.猪体内隐藏的、可导致人类疾病的病毒远远少于灵长类动物
培育无免疫排斥的转基因克隆猪器官
抑制抗原决定基因表达或除去抗原决定基因
在器官供体基因组中导入某种调节因子
抗体恒定区（C区）在不同物种中存在差异，因此鼠源单抗会被人体免疫系统识别为抗原。科学家设法将鼠源抗体的恒定区（C区）替换成人的，或者只保留鼠源抗体中对抗原识别起决定性作用的部分（CDRs）。这两类的抗体都可以通过设计嵌合基因通过基因工程来实现工业化生产。不过，最安全的还是全人源化抗体。
免疫系统的“自我”识别是胚胎发育阶段发展出来的。在小鼠免疫系统发展出自我识别之前替换成人的抗体生成基因，就可以产生出全人源化抗体（并被小鼠识别为自我）。
部分利用基因工程技术生产的医用多肽和蛋白质类产品
哺乳动物基因的结构与人类结构基本相同
细菌或酵母菌等生物的基因结构与人类基因结构有较大差异
细菌细胞内缺少内质网、高尔基体等细胞器，合成的蛋白质可能不具有生物活性
Ca2+处理法（感受态细胞法）
不需要严格的灭菌，温度等外界条件对其影响不大
需严格灭菌，严格控制工程菌所需的温度、pH、营养物质浓度等外界条件
从动物乳汁中提取，相对简单
（一般经过工业发酵后）从微生物细胞（或发酵液）中提取，相对复杂
假如某位心脏病病人换上经过改造的猪心脏后，过上健康人的生活，在生活中，他会遭到歧视吗？对此你怎么看？
生命和健康是人最宝贵的东西，如果一个病人换上了经过改造的猪心脏重获了健康，我们不仅不能歧视他，还应该从他身上看到现代生物技术在维持人体健康、治疗疾病等方面的应用价值。
利用基因工程菌，除了可以生产药物，还能生产食品工业用酶、氨基酸和维生素等
用基因工程的方法，使外源基因得到高效表达的菌类。
3.基因工程在食品工业方面的应用
一种普遍使用的甜味剂，主要由天冬氨酸和苯丙氨酸形成，这两种氨基酸可通过基因工程实现大规模生产。
奶酪生产中用来凝聚固化奶中的蛋白质
将编码牛凝乳酶的基因导入大肠杆菌、黑曲霉或酵母菌的基因组中，再通过工业发酵批量生产凝乳酶
传统制备方法：杀死未断奶的小牛，将其第四胃的黏膜取出来提取。
基因工程获得的工业用酶的纯度更高，生产成本显著降低，生产效率较高。
加工转化糖浆需要淀粉酶，加工烘烤食物要用到脂酶
构建基因工程菌，然后用发酵技术大量生产
鸡蛋白基因在大肠杆菌和酵母菌中表达获得成功。这表明，未来能用发酵罐培养的大肠杆菌或酵母菌来生产人类所需要的卵清蛋白。
（4）其他：基因工程使人们更容易培育出具有优良性状的动植物品种，获得很多过去难以得到的生物制品。
基因工程为人类开辟新的食物来源。
用基因工程的方法从微生物中获得人们所需要的糖类、脂肪和维生素等产品。
4.其他应用：环保领域的应用
培育可以降解多种污染物的“超级细菌”来处理环境污染。
利用经过基因改造的微生物来生产清洁能源。
3种淀粉酶基因组成的复合基因
乙醇单位产量的利润提高了8%-15%
金属硫蛋白能结合Cd2+和Hg2+
1.与大肠杆菌相比，用酵母菌生产人的胰岛素有什么优势？
酵母菌为真核生物，有生物膜系统，可通过内质网和高尔基体对产生的胰岛素进行加工和修饰，从而产生有活性的胰岛素。
2.培育乳腺生物反应器时为什么要选用乳腺中特异表达的基因的启动子等调控元件与药用蛋白基因重组在一起？
目的是让药用蛋白基因只在乳腺细胞中表达。
3.与工厂化生产药用蛋白相比，用动物乳腺生物反应器生产药用蛋白的优势有哪些？
(1)动物乳腺有完整的蛋白质翻译后修饰系统，生产的蛋白质活性高，更稳定。(2)产物直接经乳汁分泌，易提取。
目前我国批准发放了哪些转基因作物的生产应用安全证书和进口安全证书？
截至2019年年底，我国批准发放过转基因耐储藏番茄、转基因抗虫棉、改变花色的转基因矮牵牛、转基因抗病辣椒、转基因抗病番木瓜、转基因抗虫水稻、转植酸酶基因玉米以及转基因耐除草剂大豆的生产应用安全证书；批准了转基因棉花、大豆、玉米、油菜、甜菜和番木瓜的进口安全证书，但我国进口的基本上是转基因棉花的纤维，其他进口转基因作物的用途仅限于用作加工原料；我国没有批准任何一种转基因粮食作物种子进口到我国境内商业化种植。
让哺乳动物批量生产药物
一.概念检测1.将大肠杆菌的质粒连接上人生长激素的基因后，重新导入大肠杆菌的细胞内，再通过发酵工程就能大量生产人生长激素。下列相关叙述正确的是 ( )A. 转录生长激素基因需要解旋酶和DNA连接酶B. 发酵产生的生长激素属于大肠杆菌的初生代谢物C. 大肠杆菌获得的能产生人生长激素的变异可以遗传D. 大肠杆菌质粒标记基因中腺瞟吟和尿囉曉的含量相等
一.概念检测2.基因工程应用广泛，成果丰硕。下列不属于基因工程应用的是 ( )A.培育青霉菌并从中提取青霉素B.利用乳腺生物反应器生产药物C.制造一种能降解石油的“超级细菌”D.制造一种能产生干扰素的基因工程菌
二、拓展应用1. 除草剂的有效成分草甘膦能够专一地抑制EPSP合酶的活性，从而使植物体内多种代谢途径受到影响而导致植物死亡。草甘膦没有选择性，它在除掉杂草的同时也会使作物受损。解决这个问题的方法之一就是培育抗草甘膦的作物。(1) 下面是探究“转入外源EPSP合酶基因能否使矮牵牛抗草甘膦”的流程，请补充完整。①用_______________________等处理含有目的基因的DNA片段和Ti质粒，构建重组Ti质粒；②将重组Ti质粒转入农杆菌中；③利用含有重组Ti质粒的农杆菌侵染________细胞，再通过培育得到转基因植株；④用草甘膦同时喷洒转基因植和对照组植株。结果：对照组植株死亡，转基因植株存活,但也受到了影响。结论：_________________________________________________ 。
转基因矮牵牛对草甘膦产生了一定的抗性
二、拓展应用1. 除草剂的有效成分草甘膦能够专一地抑制EPSP合酶的活性，从而使植物体内多种代谢途径受到影响而导致植物死亡。草甘膦没有选择性，它在除掉杂草的同时也会使作物受损。解决这个问题的方法之一就是培育抗草甘膦的作物。(2) 请思考并回答下列问题。①在该实验中，对照组是怎样设计的？②如果增加转入的外源EPSP合酶基因的数量，转基因矮牵牛对草甘膦的抗性是否会增加？请你给出进一步探究的思路。
对照组为非转基因矮牵牛理论上增加转入的外源EPSP合酶基因的数量，矮牵牛体内EPSP合酶的表达水平会升高，它对草甘膦的抗性会增强
将不同拷贝数的EPSP合酶基因分别转入矮牵牛细胞中，培育转基因植株，比较它们对草甘膦抗性的差异
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