生物选修1《生物技术实践》课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段课后练习题

这是一份生物选修1《生物技术实践》课题2 多聚酶链式反应扩增DNA片段课后练习题，共4页。试卷主要包含了 PCR技术的操作步骤依次是等内容，欢迎下载使用。

1． 在PCR反应中，只有一个DNA的片段作为模板，经过一次循环后，含引物Ⅰ的DNA单链占DNA总链数的( )
A．1/2 B.1/4 C.1 D.1/8
2． 多聚酶链式反应(PCR)是一种体外迅速扩增DNA片段的技术。请回答下列问题：
(1)DNA的两条链是反向平行的，通常将 的末端称为5，端，当引物与DNA母链通过碱基互补配对结合后，DNA聚合酶就能从引物的 开始延伸DNA链。
(2)PCR利用了DNA的热变性原理解决了打开DNA双链的问题，但又导致了DNA聚合酶失活的新问题。到20世纪80年代，科学家从一种Taq细菌中分离到 ，它的发现和应用解决了上述问题。要将Taq细菌从其它普通的微生物中分离出来。所用的培养基叫 。
(3)PCR的每次循环可以分为 三步。假设在PCR反应中，只有一个DNA片段作为模板，请计算在5次循拜后，反应物中大约有 个这样的DNA片段。
(4)简述PCR技术的主要应用(要求答2项)___________________________________________
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3． 在PCR扩增循环过程中，下列说法正确的是（ ）
A．在每次循环中，变性所用的时间是一样多的
B．在每次循环中，复性所用的时间是一样多的
C．在每次循环中，延伸所用的时间是一样多的
D．以上说法都不正确
4． PCR技术的操作步骤依次是（ ）
A．高温变性、中温延伸、低温退火
B．高温变性、低温退火、中温延伸
C．中温延伸、高温变性、低温退火
D．中温延伸、低温退火、高温变性
5． 分离血红蛋白溶液时，离心后试管的溶液分四层，血红蛋白在第( )层。
A．一 B．二
C．三 D．四
6． 在血红蛋白的整个提取过程中，不断用磷酸缓冲液处理的目的是( )
A．防止血红蛋白被氧化
B．血红蛋白是一种两性物质，需要酸中和
C．磷酸缓冲液会加速血红蛋白的提取过程
D．让血红蛋白处在稳定的pH范围内，维持其结构和功能
7． 在PCR的实验操作中,下列说法正确的是( )
①PCR所用的缓冲液和酶要在常温下储存
②离心管的盖子一定要盖严
③用手指轻弹离心管壁
④离心的目的是使反应液集中在离心管的底部
A．①②③ B.①②④ C.②③④ D.①③④
8． PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比,主要有两点不同,它们是( )
①PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNA或RNA
②PCR过程不需要DNA聚合酶
③PCR过程中DNA的解旋不依靠解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的
④PCR过程中,DNA不需要解旋,直接以双链DNA为模板进行复制
A．③④ B.①② C.①③ D.②④
9． PCR技术的操作步骤依次是（ ）
A．高温变性、中温延伸、低温复性 B. 高温变性、低温复性、中温延伸
C．中温延伸、高温变性、低温复性 D. 中温延伸、低温复性、高温变性
10． 关于DNA粗提取与鉴定实验的有关说法正确的是（ ）
充分溶解DNA的盐溶液是0.14ml/L的NaCl溶液
实验中提取较纯净的DNA利用了DNA不溶于酒精的特点
对最后提取出DNA用二苯胺试剂鉴定时需用酒精灯直接加热
实验操作过程中先后两次加入蒸馏水的作用相同
参考答案：
1． 答案： B
解析： 经过一次循环后，DNA单链共4条，含引物Ⅰ的DNA单链只有1条。
2． 答案： ⑴磷酸基团 3‘端 ⑵耐高温的TaqDNA聚合酶 选择培养基 ⑶变性、复性和延伸 32 ⑷遗传疾病的诊断、刑侦破案、古生物学、基因克隆和DNA序列测定等（要求答2项）
解析： 本题考查PCR技术有关知识。DNA的两条链是反向平行的，通常将含有游离的磷酸基团的末端称为5，端，而DNA聚合酶从引物的3‘开始延伸DNA链；在体外扩增DNA时不用解旋酶而是用热变性处理的方法打开DNA双链，因此需要使用耐高温的DNA聚合酶；PCR的每次循环可以分为变性、复性和延伸三个步骤，五次循环后得到25个DNA片段。PCR技术有广泛的应用，可以用于遗传疾病的诊断、刑侦破案、克隆基因等方面。
3． 答案： D
解析：
4． 答案： B
解析： PCR技术的操作步骤依次是：高温变性、低温退火、中温延伸。
5． 答案： C
解析： 分离血红蛋白溶液时，离心后可明显观察到试管中液体分四层，从上向下数依次为：无色透明的甲苯层，白色薄层固体(脂溶性物质的沉淀层)、红色透明液体(血红蛋白水溶液)、暗红色沉淀物(其他杂质)，故血红蛋白分布于第三层。
6． 答案： D
解析： 利用磷酸缓冲液模拟细胞内pH环境，保证血红蛋白的正常结构和功能，便于分离观察和研究。
7． 答案： C
解析： PCR所用的缓冲液和酶需装成小份,并在-20℃储存;盖严离心管口的盖子,防止实验中外源DNA污染;用手指轻轻弹击管的侧壁,使反应液混合均匀;离心的目的是使反应液集中在离心管的底部,提高反应效果。
8． 答案： C
解析： PCR过程与细胞内的DNA复制过程相比较,主要有两点不同:(1)PCR过程需要的引物是人工合成的单链DNA或RNA,长度通常为20~30个核苷酸。(2)PCR过程中,DNA解旋不依赖解旋酶,而是通过对反应温度的控制来实现的
9． 答案： B
10． 答案： B