西宁市2025-2026学年高三下学期联考生物试题含解析

这是一份西宁市2025-2026学年高三下学期联考生物试题含解析，共24页。试卷主要包含了某雄性动物的基因型为AaBb，艾滋病病毒等内容，欢迎下载使用。
1．请用2B铅笔将选择题答案涂填在答题纸相应位置上，请用0．5毫米及以上黑色字迹的钢笔或签字笔将主观题的答案写在答题纸相应的答题区内。写在试题卷、草稿纸上均无效。
2．答题前，认真阅读答题纸上的《注意事项》，按规定答题。
一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)
1．下列关于生长素及其作用的叙述，正确的是（ ）
A．植物的生长是由单侧光引起的
B．植物不同器官对生长素的敏感程度不相同
C．生长素由苗尖端产生并促进尖端的伸长
D．不同浓度的生长素对植物同一器官的作用效果一定不同
2．下列有关细胞中糖类的叙述，正确的是（ ）
A．纤维素是植物细胞的储能物质
B．葡萄糖遇碘变为蓝色
C．糖原的基本单位是葡萄糖
D．核糖是六碳糖
3．为在酵母中高效表达丝状真菌编码的植酸酶，通过基因改造，将精氨酸的密码子由原来CGG改变为酵母偏爱的AGA，由此发生的变化不包括（ ）
A．植酸酶基因的遗传信息发生改变B．酵母中植酸酶mRNA序列改变
C．配对的反密码子变为UCUD．植酸酶氨基酸序列改变
4．生物燃料是指以纤维素材料为原料生产的燃料乙醇和生物柴油，筛选出能高效分解纤维素的纤维素分解菌是制造生物燃料的重要前提。下列说法正确的是（ ）
A．能够分解纤维素的酶是一种复合酶，其中葡萄糖苷酶能把纤维素分解为纤维二糖
B．在筛选纤维素分解菌的过程中，刚果红染色法能通过颜色反应直接筛选微生物
C．倒平板时加入刚果红染色，优点是显示的颜色反应基本上就是纤维素分解菌的作用
D．用平板划线法对纤维素分解菌进行计数时，应选菌落数在30-300之间的平板计数
5．某雄性动物的基因型为AaBb。下图是其一个精原细胞减数分裂过程中的两个不同时期细胞的分裂图像。相关叙述正确的是（ ）
A．甲细胞处于减数第二次分裂，称为次级精母细胞，细胞中含有6条染色单体
B．四分体时期发生染色体结构变异，导致A和a出现在姐妹染色单体同一位置
C．图示该精原细胞整个减数分裂过程中，细胞中最多时可能含有四个B基因
D．该细胞经减数分裂形成的四个精子，其基因型可能分别为AB、Ab、ab、aB
6．2019年世界艾滋病日的宣传主题是“社区动员同防艾，健康中国我行动”。意在强调个人健康责任意识，为遏制艾滋病流行和健康中国建设做出贡献。艾滋病是由人类免疫缺陷病毒（HIV ） 引起的免疫性疾病。下列与艾滋病有关的叙述，错误的是（ ）
A．人类免疫缺陷病毒（HIV ）有高度变异性
B．HIV感染人群比健康人群更易患甲型H1N1流感
C．HIV破坏免疫系统，使机体无体液免疫，不能通过检测抗体来诊断HIV感染
D．共用注射器吸毒和性滥交是传播艾滋病的主要危险行为，因此要拒绝毒品、洁身自爱
7．艾滋病病毒（HIV）是一种球形的RNA病毒，蛋白质外壳内部有两条相同的RNA链，HIV侵染人体细胞并繁殖新一代病毒的过程中会形成RNA-DNA杂交分子和双链DNA这两种中间体，此双链DNA整合到宿主细胞的染色体DNA中，以它为模板合成mRNA和子代单链RNA，mRNA作模板合成病毒蛋白。据此分析下列叙述不正确的是（ ）
A．合成RNA-DNA和双链DNA分别需要逆转录酶、DNA聚合酶等多种酶
B．以RNA为模板合成生物大分子的过程包括翻译和逆转录
C．以mRNA为模板合成的蛋白质只有病毒蛋白质外壳
D．HIV的突变频率较高其原因是RNA单链结构不稳定
8．（10分）下列有关生物膜的说法，错误的是（ ）
A．植物类囊体薄膜上有能合成ATP的酶
B．植物根细胞膜上有运输矿质元素离子的蛋白质载体
C．人体线粒体内膜上有运输葡萄糖的蛋白质载体
D．人体黏膜细胞表面有与某些病毒结合的蛋白质受体
二、非选择题
9．（10分）科研人员调查了东北某个以白桦为主的群落。试回答相关问题：
（1）研究者采用________法进行调查白桦树的种群密度。可尺检乔木的胸径，对乔木的树龄划分为三个年龄组。幼龄林是10年生以下；中龄林和近熟林是10-40年生；成熟、过熟林是40年生以上。统计后绘成曲线如图，这种研究方法叫模型构建法，则该曲线属于________模型。
（2）图示结果出现的可能原因是：上层林冠茂密，林下________，导致________（填“幼龄林”、“中龄林”、“近熟林”）的生长难以进入下一龄级。据此预测白桦种群数量未来的变化趋势是________。
（3）在群落内部，捕食关系会使狼和兔的种群数量增长受到抑制，趋向于平衡稳定，这种自我调节的方式称为________________。
（4）该群落中，狼会依据兔残留的气味寻找到兔，而兔也会依据狼的痕迹躲避狼，这说明信息传递具有________________________________的功能。
10．（14分）果蝇的正常翅与展翅是一对相对性状，由等位基因A/a控制，取任意一对展翅果蝇交配，F1总会出现展翅：正常翅=2：1。回答下列问题：
（1）若将F1代果蝇逐代随机自由交配，预测子代展翅基因的基因频率会____（填上升或下降或不变），原因是____。若将F1代果蝇中表现型相同的个体自由交配得到F2，F2代果蝇中展翅与正常翅的比例是____。
（2）研究小组发现展翅和正常翅基因所在的染色体上还存在一对基因G/g，显性基因G使果蝇复眼表面无光亮而表现为黏胶眼，而且存在GG致死效应。若将展翅正常眼和正常翅黏胶眼果蝇杂交得到子代，子代中展翅黏胶眼果蝇产生的配子的基因型是____（不考虑突变和交叉互换），再将这些展翅黏胶眼果蝇连续自由交配若干代，随着繁殖代数的增加，子代成熟果蝇群体中A的基因频率____（填上升或下降或不变），原因是____。
11．（14分）近年来，化肥对农业生产的负面影响及对环境的污染日益引起人们的关注。由于固氮菌能固定大气中的氮气，提高土壤的氮含量，因而分离得到自生固氮菌（不与植物形成共生体）用以对土壤进行接种已成为一个新的研究方向。下表是微生物培养时常用的两种培养基，回答下列问题：
（1）分离固氮菌选用___(填“甲”或“乙”）培养基。从土壤深度看，选填____ ( “表层”或“深层”）的土壤容易得到自生固氮菌的菌种，获得的土样用______溶解后备用。
（2）接种前，将灭过菌的培养基放在37℃的恒温箱中培养24h，目的是______。
（3）用接种环蘸取少许稀泥浆，在培养基表面轻点15～20处，此操作过程中需对接种环进行______次灼烧灭菌。接好种的培养皿要在______处写明实验内容、接种人和日期。培养3～4天后可在接种的稀泥浆周围看到黏膜液状培养物，这是含有自生固氮菌的标志。
（4）某特定染液能使自生固氮菌着色，挑取黏液，用该染液染色后制成涂片，制成的涂片在______（填“低倍”或“高倍”）显微镜下观察固氮菌的形态特征。筛选到的菌落需进一步分离纯化，纯化自生固氮菌的培养接种方法最常用的两种是______。
12．近年来，在处理富营养化水体的污水过程中，与化学、物理除氮方法比较，目前认为微生物反硝化去除氮素污染更为经济有效。科研工作者采用基因工程技术构建具有定向高效降解含氮化合物能力的工程菌，进行了相关研究。请回答问题。
（1）微生物的反硝化作用，是氮循环中一个重要的生物过程。亚硝酸盐还原酶（Nir）是该过程的关键酶，是由野生菌株YP4的反硝化基因（nirS）转录后，再翻译出具有___________作用的蛋白质。
（1）工程菌的构建
①研究者利用NCBI数据库查到nirS基因的碱基序列，设计引物，利用PCR技术扩增nirS基因。PCR技术利用了___________的原理，使用耐高温Taq酶而未使用普通DNA聚合酶的主要原因是______________________。
②研究者用HindⅢ和BamHI两种限制酶处理nirS基因与p质粒，在_______________酶的作用下进行体外连接，用连接产物转化大肠杆菌DH5，在含庆大霉素的培养基中进行培养并提取质粒，如果用HindⅢ和BamHI双酶切，得到两个片断电泳结果分别与_______________电泳结果基本一致，说明获得重组质粒pYP4S。
③将pYP4S转化到野生菌株YP4中形成工程菌YP4S，培养后进行PCR鉴定。为鉴定筛选出的菌落中是否含有正确插入目的基因的重组质粒，拟设计引物进行PCR鉴定。图1所示为甲、乙、丙3条引物在正确重组质粒中的相应位置，PCR鉴定时应选择的最佳一对引物组合是_________。某学生错选了图中的另外一对引物组合，扩增出长度为1．1kb的片段，原因是_______________。
（3）检测工程菌YP4S除氮的效能
①工程菌株YP4S在已灭菌的模拟污水中培养36h后，检测结果如图1。结果表明___________________。
②要进一步证明工程菌对含氮污水治理更有效，应___________________________。
参考答案
一、选择题(本大题共7小题,每小题6分,共42分。)
1、B
【解析】
生长素是植物产生的、对植物有调节作用的激素之一。生长素的作用与浓度有关，低浓度起促进作用，高浓度起抑制作用，这称为生长素的两重性，而且生长素的作用往往与发生作用的器官有密切关系。植物的不同部位对同样浓度的生长素有不一样的反应，如禾本科植物的向光生长，即为单侧光引起尖端生长素的横向运输，导致背光侧的生长素浓度高于向光侧，因此植物弯向光源生长；又如植物根的向地性，由于重力作用，近地侧的生长素浓度比远地侧的生长素浓度高，而根对生长素比较敏感，所以根向地生长，而茎对生长素浓度没有根敏感，所以茎向上（背地）生长。
【详解】
A、植物的向光生长是由单侧光引起的，而生长与植物激素、环境、植物自身条件等有关，A错误；
B、植物不同器官对生长素的敏感程度不相同，如根对生长素比茎对生长素更敏感，B正确；
C、生长素由苗尖端产生并促进尖端以下的伸长，C错误；
D、不同浓度的生长素对植物同一器官的作用效果有可能相同，如处于最适浓度的两侧的效果可能相同，D错误。
故选B。
2、C
【解析】试题分析：糖类由C、H、O三种元素组成，分为单糖、二糖和多糖，是主要的能源物质．常见的单糖有葡萄糖、果糖、半乳糖、核糖和脱氧核糖等．植物细胞中常见的二糖是蔗糖和麦芽糖，动物细胞中常见的二糖是乳糖．植物细胞中常见的多糖是纤维素和淀粉，动物细胞中常见的多糖是糖原．淀粉是植物细胞中的储能物质，糖原是动物细胞中的储能物质．构成多糖的基本单位是葡萄糖．
解：A、纤维素为植物细胞壁的组成成分，不提供能量，A错误；
B、淀粉遇碘变蓝，葡萄糖不可以，B错误；
C、糖原属于多糖，构成多糖的基本单位是葡萄糖，C正确；
D、核糖是五碳糖，D错误．
故选：C．
考点：糖类的种类及其分布和功能．
3、D
【解析】
本题考查基因表达的相关知识，基因的表达是通过DNA控制蛋白质的合成来实现的。基因控制蛋白质的合成过程包括转录和翻译两个阶段。转录是指以DNA的一条链为模板，按照碱基互补配对的原则，合成RNA的过程。翻译是指以mRNA为模板，合成具有一定氨基酸顺序的蛋白质的过程。
【详解】
由题干可知，控制合成植酸酶的基因被改造过了，因此植酸酶基因的遗传信息发生改变，A正确；由于控制合成植酸酶的基因被改造过后，植酸酶基因的遗传信息发生改变，因此转录出来的mRNA序列也就发生了改变，B正确；植酸酶基因被改造后，转录出的控制精氨酸的密码子由CGG改变为AGA，因此配对的反密码子就由GCC变为UCU，C正确；由于密码子具有简并性，因此控制合成的植酸酶的氨基酸序列并未改变，D错误；因此选D。
1、遗传信息：基因中特定的脱氧核苷酸的排列顺序（碱基顺序）。
2、密码子：mRNA中相邻的三个碱基的排列顺序决定一个氨基酸，每三个这样的碱基称做密码子。密码子种类共有64种，其中3种是终止密码子，不决定氨基酸，其余61种密码子决定了20种氨基酸。
3、密码子简并的意义：当密码子中有一个碱基改变时，由于密码的简并性，可能并不会改变其对应的氨基酸；当某种氨基酸使用频率高时，几种不同的密码子都编码一种氨基酸可以保证翻译的速度。
4、反密码子：tRNA的一端有三个碱基能够与mRNA上的密码子互补配对，这样的三个碱基叫反密码子。
4、B
【解析】
1.纤维素酶是一种复合酶，一般认为它至少含有三种组分，即C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶，前两种酶使纤维素分解成纤维二糖，第三种酶将纤维二糖分解成葡萄糖；
2. 常用的刚果红染色法有两种：
方法一 在长出茵落的培养基上，覆盖质量浓度为1 mg／mI。的CR溶液，10～15 min后，倒去CR溶液，加入物质的量浓度为l ml／I。的NaCI溶液，15 min后倒掉NaCl溶液，此时，产生纤维素酶的茵落周围将会出现透明圈。
方法二 配制质量浓度为10 mg／mI。的CR溶液，灭菌后，按照每200 mI。培养基加入1 mI。的比例加入CR溶液，混匀后倒平板。等培养基上长出茵落后，产生纤维素酶的菌落周围将会出现明显的透明圈。
3.两种刚果红染色法的比较：方法一的缺点是操作繁琐，加入刚果红溶液会使菌落之间发生混杂；其优点是这样显示出的颜色反应基本上是纤维素分解菌的作用；方法二的优点是操作简便，不存在菌落混杂问题，缺点是由于在纤维素粉和琼脂、土豆汁中都含有淀粉类物质，可以使能够产生淀粉酶的微生物出现假阳性反应。但这种只产生淀粉酶的微生物产生的透明圈较为模糊，因为培养基中纤维素占主要地位，因此可以与纤维素酶产生的透明圈相区分。方法二的另一缺点是：有些微生物具有降解色素的能力，它们在长时间培养过程中会降解刚果红而形成明显的透明圈，与纤维素分解菌不易区分。
【详解】
A、由分析可知，纤维素酶是一种复合酶，至少含有三种组分，即C1酶、Cx酶、葡萄糖苷酶，其中C1酶、Cx酶能把纤维素分解为纤维二糖，A错误；
B、在筛选纤维素分解菌的过程中，发明了刚果红染色法，刚果红染色法能通过颜色反应直接筛选微生物，B正确；
C、由分析可知，倒平板时加入刚果红染色是第二种方法，其优点是操作简便，不存在菌落混杂问题，而显示的颜色反应基本上就是纤维素分解菌的作用是方法一的典型优点，C错误；
D、用稀释涂布平板法对纤维素分解菌进行计数时，应选菌落数在30-300之间的平板计数，D错误。
故选B。
5、D
【解析】
分析题图：图示是其一个精原细胞减数分裂过程中的两个不同时期细胞分裂图象，这两个细胞都不含同源染色体，前者出于减数第二次分裂前期，后者处于减数第二次分裂末期。
【详解】
A、甲细胞中含4条染色体，每条染色体含有2条染色单体，因此该细胞含有8条染色单体，A错误；
B、四分体时期染色体发生交叉互换，由此引起的变异属于基因重组，B错误；
C、由于该细胞的基因型是AaBb，只含有1个B基因，所以在减数分裂过程中，由于复制，细胞中最多含有两个B基因，C错误；
D、该细胞经由于发生了交叉互换，所以减数分裂形成的四个精子，其基因型分别为AB、aB、Ab、ab，D正确。
故选D。
本题需要考生分析出图中细胞所处时期，关键点是看出细胞发生了交叉互换。
6、C
【解析】
关于“艾滋病”，考生可以从以下几方面把握：
（1）艾滋病的中文名称是获得性免疫缺陷综合征（AlDS），其病原体是人类免疫缺陷病毒（HIV）。
（2）艾滋病的致病原理：HIV病毒进入人体后，与人体的T淋巴细胞结合，破坏T淋巴细胞，使免疫调节受到抑制，使人的免疫系统瘫痪，最后使人无法抵抗其他细菌、病毒的入侵，让人死亡。
（3）艾滋病的传播途径包括：血液传播、性传播、母婴传播。
【详解】
A、艾滋病病毒是RNA病毒，遗传物质是RNA，有高度变异性，A正确；
B、HIV破坏免疫系统，防卫功能减弱，HIV感染人群比健康人群更易患甲型H1N1流感，B正确；
C、艾滋病病毒主要攻击T淋巴细胞，可以保留部分体液免疫，C错误；
D、艾滋病主要通过性接触、血液和母婴三种途径传播，D正确。
故选C。
7、C
【解析】
1、中心法则：（1）遗传信息可以从DNA流向DNA，即DNA的复制；（2）遗传信息可以从DNA流向RNA，进而流向蛋白质，即遗传信息的转录和翻译。后来中心法则又补充了遗传信息从RNA流向RNA以及从RNA流向DNA两条途径。
2、HIV为逆转录病毒。
【详解】
A、合成RNA-DNA的过程为逆转录过程，需要逆转录酶的催化；合成双链DNA需要DNA聚合酶的催化，A正确；
B、HIV侵染细胞后，以mRNA作模板合成病毒蛋白的过程为翻译过程，以RNA为模板合成DNA的过程为逆转录过程，B正确；
C、以mRNA为模板合成的蛋白质包括病毒蛋白质外壳和逆转录酶等，C错误；
D、HIV的突变频率较高其原因是RNA单链结构不稳定，D正确。
故选C。
本题考查中心法则及其发展，要求考生识记中心法则的主要内容及后人对其进行的补充和完善；识记和理解HIV侵染人体细胞后遗传信息的传递过程，能结合所学的知识准确判断各选项。
8、C
【解析】
1、细胞膜的主要成分是脂质和蛋白质，此外还有少量的糖类。
2、膜的组成成分可以转化，由分泌蛋白的合成和分泌过程可知，内质网膜、高尔基体膜和细胞膜之间可以相互转化。
3、生物膜的组成成分相似，主要是脂质和蛋白质，蛋白质的种类和数量越多，功能越复杂。
4、许多化学反应在生物膜上进行，广阔的膜面积为化学反应所需是酶提供了大量附着点，为化学反应提供了广阔的场所。
【详解】
A、类囊体薄膜能进行光反应合成ATP，因此膜上具有ATP合成酶，A正确；
B、植物根细胞吸收矿质离子是主动运输，需要载体蛋白的协助，B正确；
C、线粒体运输丙酮酸，不运输葡萄糖，C错误；
D、病毒通过与细胞膜上的受体结合进而通过胞吞的方式进入宿主细胞，D正确。
故选C。
二、非选择题
9、样方 数学 光照不足（或弱）（意思对即可） 幼龄林 逐渐减少（或下降） （意思对即可） 负反馈调节 调节种间关系，以维持生态系统的稳定性
【解析】
分析曲线图：图中白桦10～20年生的数目较少，而40～50年生的数目较多，其种群的年龄结构属于衰退型；预测白桦种群未来的变化趋势是逐渐减少。
【详解】
（1）植物种群密度的调查常用样方法。模型包括物理模型、数学模型和概念模型，对于绘制的曲线图属于数学模型。
（2）由图分析可以看出，白桦10～20年生的数目较少，而40～50年生的数目较多，推测可能的原因是由于上层林冠茂密，林下照不足，导致幼龄林生长难以进入下一龄级。据此预测白桦种群未来的变化趋势是逐渐减少。
（3）在群落内部，生物种群之间的关系会使两者数量增长受到抑制，趋向于平衡稳定，这种自我调节的方式称为负反馈调节。
（4）狼会依据兔残留的气味寻找到兔，而兔也会依据狼的痕迹躲避狼，这体现了信息传递具有调节种间关系，以维持生态系统的稳定性的功能。
本题借助于曲线图考查不同群的年龄结构，预测种群数量的变化，意在考查考生分析曲线图，获取信息的能力，属于中等难度试题。
10、下降 展翅基因纯合致死，展翅基因纯合的个体被淘汰 2：3 Ag、aG 不变 AA、GG都有致死效应，子代只有基因型为AaGg的果蝇能存活
【解析】
任意一对展翅果蝇交配，F1总会出现展翅：正常翅=2：1。说明展翅为显性（A），正常翅为隐性（a），且展翅纯合（AA）致死。F1中A的基因频率为：2/3×1/2=1/3，a的基因频率为2/3。
【详解】
（1）若将F1代果蝇随机自由交配，F2的基因型为：AA的基因型频率为：1/3×1/3=1/9，Aa的基因型频率为1/3×2/3×2=4/9，aa的基因型频率为：2/3×2/3=4/9，又因为AA致死，故F2的基因型为1/2Aa、1/2aa，展翅基因（A）的频率为1/2×1/2=1/4，与F1中相比下降。因此若将F1代果蝇逐代随机自由交配，预测子代展翅基因的基因频率会下降，原因是展翅基因纯合致死，展翅基因纯合的个体被淘汰。若将F1代果蝇中表现型相同的个体自由交配得到F2，即2/3Aa×Aa→1/6AA（2/3×1/4）、1/3Aa（2/3×1/2）、1/6aa（2/3×1/4），1/3aa×aa→1/3aa，AA：1/6，Aa：1/3，aa：1/6+1/3=1/2，AA致死，因此F2的基因型为2/5Aa、3/5aa。展翅（Aa）与正常翅（aa）的比例是2：3。
（2）若将展翅正常眼（Aagg）和正常翅黏胶眼（aaGg）果蝇杂交得到子代，展翅正常眼（Aagg）产生配子Ag∶ag=1∶1，正常翅黏胶眼（aaGg）产生配子aG∶ag=1∶1，Ag与aG结合得到展翅黏胶眼果蝇（AaGg），因此子代中展翅黏胶眼果蝇（AaGg）产生的配子的基因型是Ag、aG。再将这些展翅黏胶眼果蝇连续自由交配若干代，由于AA、GG都有致死效应，子代只有基因型为AaGg的果蝇能存活，因此子代成熟果蝇群体中A的基因频率不变。
熟悉基因的分离定律及其应用是解答本题的关键，另外学会用配子法解答随机交配的问题。
11、乙 表层 无菌水 检验培养基灭菌是否合格 两 皿底 高倍 稀释涂布平板法、平板划线法
【解析】
分析表中两种培养基：乙培养基中无氮源，而甲培养基的马铃薯中含有碳源、氮源、水、无机盐等多种成分，分离固氮菌要用无氮培养基，因此，乙培养基更适合。在操作过程中要注意杂菌的污染，如培养基灭菌是否合格的检验、接种工具的灭菌等；在恒温箱中要倒置培养，因此，要在皿底处写明实验内容、接种人和日期。
【详解】
（1）乙培养基中无氮源，而甲培养基的马铃薯中含有碳源、氮源、水、无机盐等多种成分，分离固氮菌要用无氮培养基，因此，乙培养基更适合。自生固氮菌的氮源来自空气，又是需氧型细菌，因此，在表层土壤中容易获得该菌。为了避免杂菌污染，获得的土壤要用无菌水溶解。
（2）培养基灭菌是否合格可通过将未接种的培养基在适合的条件下先行培养来检验。
（3）为了减少外来杂菌污染，在接种环蘸取泥浆前要进行灼烧灭菌，为了避免细菌污染环境和感染操作者，轻点稀泥浆结束后，还要进行灼烧灭菌。因为在恒温箱中要倒置培养，因此，要在皿底处写明实验内容、接种人和日期。
（4）挑取黏液用特定染液染色后再制成涂片，着色的为自生固氮菌，可在高倍显微镜下看清固氮菌的形态特征。微生物的接种方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法。
根据要选择菌种的特征恰当地选择相应的选择性培养基，实验操作的基本流程的熟练掌握，明确实验中一些关键的操作等，以上是本题的关键考点。
12、催化 DNA复制 PCR过程中DNA在高温下解链，这样的高温下，普通的DNA聚合酶的生物活性丧失 DNA连接 p质粒和插入片段（目的基因） 乙和丙 目的基因反向连接 工程菌株除氮效果优于野生菌 Ⅰ．工程菌YP4S与野生菌分别处理实际污水36hⅡ．检测除氮率
【解析】
分析题干可知：目前认为微生物反硝化去除氮素污染更为经济有效，科研工作者采用基因工程技术构建具有定向高效降解含氮化合物能力的工程菌，故需依据基因工程的相关原理进行分析作答。
【详解】
（1）亚硝酸盐还原酶（Nir）是该过程的关键酶，酶是经基因的转录和翻译过程形成的有催化作用的蛋白质。
（1）①PCR技术依据的原理是DNA分子的复制；因PCR过程中DNA解旋是在在高温下进行的（90-95℃），这样的高温下，普通的DNA聚合酶的生物活性丧失，故在PCR技术中应采用使用耐高温的Taq酶。
②连接两个DNA片段所用的酶是DNA连接酶；因实验中nirS基因与p质粒是分别用HindⅢ和BamHI两种限制酶处理的，故若再用HindⅢ和BamHI双酶切之后，得到两个片断电泳结果分别与p质粒和插入片段（nirS基因）电泳结果基本一致，可说明获得重组质粒pYP4S。
③PCR技术要求两种引物分别和目的基因的两条单链结合，沿相反方向合成子链，结合目的基因的插入位置可知，PCR鉴定时应选择的最佳一对引物组合是乙和丙；若某学生错选了图中的另外一对引物组合（甲和乙），只有反向连接后才能扩增出长度为1．1kb的片段 （1＋0.1kb）。
（3）①图1结果表明，无论是总氮还是NH4＋、NO3—的去除率，工程菌株除氮效果优于野生菌。
②因图1是工程菌株YP4S在已灭菌的模拟污水中的处理结果，故要进一步证明工程菌对含氮污水治理更有效，应用工程菌YP4S与野生菌分别处理实际污水36h，检测除氮率。
解答本题需要透彻理解基因工程的基本工具、PCR技术的原理，并能读懂实验结果的数据分析，进而分析作答。
培养基甲
马铃薯
葡萄糖
琼脂
蒸馏水
pH
200g
20 g
15~20g
1000 ml
自然
培养基乙
甘露醇(或蔗糖、葡萄糖)
KH2PO4
MgSO4·7H2O
NaCl
CaSO4·2H2O
CaCO2
琼脂
水
pH
10g
0.2 g
0.2 g
0.2g
0.1 g
5g
20 g
1000 ml
自然