高中生物人教版 (2019)选择性必修3动物细胞培养优秀课件ppt

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动物细胞培养动物细胞融合动物细胞核移植等
动物细胞培养是其他动物细胞工程技术的基础。
动物细胞工程常用的技术
第2节 动物细胞工程一 动物细胞培养（1）
1、认同动物细胞培养是模拟体内生理条件在体外进行的培养，由此分析、推理培养动物细胞需要满足的基本条件。2、尝试构建动物细胞培养的基本流程。3、认同动物细胞培养是动物细胞工程的基础。
重点：动物细胞培养的条件和过程难点：动物细胞培养的过程
取自体细胞在体外培养，能获得大量的自体健康皮肤用于自体移植。
1.动物细胞培养的概念
指从动物机体中取出相关的组织,将它分散成 单个细胞，然后在 适宜的培养条件下,让这些细胞生长和增殖的技术。
因为这些组织或细胞的生命力旺盛，分化程度低，分裂能力强，容易培养
营养容易供应，代谢废物容易排出
2.动物细胞培养的培养条件：
（1）营养条件， （2）无菌无毒的环境，（3）适宜的温度、PH和渗透压，（4）适宜的气体环境。
细胞所需的各种营养物质：
糖类、氨基酸、无机盐、维生素……
培养基类型：合成培养基——将细胞所需的营养物质按种类和所需量严格配制而成的培养基。液体培养基，也称培养液。
含有人们尚未研究清楚的细胞所需的营养物质。
（2）无菌、无毒的环境：
①培养液和所有培养用具灭菌处理；②无菌操作；③培养液要定期更换。
以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成伤害。
（3）适宜的温度、PH和渗透压：
①适宜的温度：哺乳动物细胞培养的温度多以___________为宜；②适宜的pH：多数动物细胞生存的适宜pH为________ ；③适宜的渗透压：适宜，以维持细胞正常的形态和功能。
不含细菌、真菌等微生物
不含动物细胞的代谢废物
培养液中往往添加抗生素！
（4）适宜的气体环境：
①动物细胞培养所需的气体主要是O2和CO2，②O2的作用是：细胞代谢所必需的。CO2的主要作用是：维持培养液的PH。③通常采用培养皿或松盖培养瓶，置于含有95%空气 和 5%CO2 的CO2 培养箱中培养
3.动物细胞培养的过程：
新鲜的动物胚胎或幼龄动物的组织、器官易培养
用机械法、或用胰蛋白酶或胶原蛋白酶等处理，避免限制生长增殖
注意：①胰蛋白酶等分散细胞，说明细胞间的主要物质是蛋白质。（相关酶可使细胞裂解，应注意用量和时间）②不能用胃蛋白酶的原因：胃蛋白酶作用的适宜pH约为1.5，多数动物细胞培养的适宜pH为7.2~7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性。
分散成单个细胞的原因：细胞和细胞靠在一起，彼此限制了生长和繁殖。
①细胞贴壁：某些细胞需要贴附于某些基质表面才能增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上
细胞密度过大、有害代谢物积累、营养物质缺乏等
②接触抑制：当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖。
（经处理后的初次培养）
②制成细胞悬液，分瓶培养
　 区分两种“培养”的关键是看用胰蛋白酶处理的对象。 用胰蛋白酶对剪碎的动物组织进行处理，使其分散成单个细胞后进行培养，为原代培养； 细胞培养过程中出现接触抑制，用胰蛋白酶处理使其从瓶壁上脱离下来分散成单个细胞，然后再用离心法收集，之后，将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养，为传代培养。
圆球形细胞刚开始铺展贴壁生长（100×）
培养的动物细胞贴壁生长,并进行有丝分裂（100×）
细胞单层贴壁生长铺满瓶壁后出现接触抑制（100×）
思考：“细胞增殖到互相接触的时候，糖蛋白识别了这种信息，就会使细胞停止继续繁殖，出现接触抑制的现象”试结合上述解释，举例说明哪种细胞无接触抑制现象，并阐述原因
癌细胞；癌细胞的细胞膜上糖蛋白等物质减少
传代培养一般培养有限代次后，细胞就会死亡，如果细胞不死，就意味着细胞的遗传物质发生了改变.目前用于冷冻保存的正常细胞通常为10代以内的细胞，以保持细胞正常的二倍体核型。
从原代培养细胞群中筛选出进行传代培养的细胞，能传到40-50代，其遗传物质没有发生变化。
传到40-50代后，有部分细胞遗传物质发生了变化，具有癌细胞的特点，失去接触抑制，可能在培养条件下无限制的传代下去。
4．动物细胞培养与植物组织培养的比较