高中生物浙科版选修1《生物技术概述》大肠杆菌的培养和分离教学ppt课件

这是一份高中生物浙科版选修1《生物技术概述》大肠杆菌的培养和分离教学ppt课件，共30页。PPT课件主要包含了酵母菌，放线菌，微生物，培养基，无菌技术，微生物包括五类，培养基的类型，成分区别琼脂，细菌喜荤霉菌喜素，培养基的用途等内容，欢迎下载使用。
1.进行大肠杆菌的扩增，利用液体培养基进行细菌培养的操作。2.进行大肠杆菌的分离，用固体培养基进行细菌的划线培养。3.说明大肠杆菌培养的条件和操作要求。
上图都是一些常见的微生物，微生物是结构简单、形体微小的单细胞、多细胞或没有细胞结构的低等生物，与人类关系密切。人工的培养和分离，使得我们更进一步认识微生物。 今天我们就来学习如何培养和分离大肠杆菌！
1.特点：结构都相当简单,个体多数十分微小，通常要用光学显微镜或电子显微镜才能看到，有的甚至没有细胞结构，且体内一般不含有叶绿素，不能进行光合作用。
病 毒细 菌放线菌真 菌原生动物
培养基（培养液）是由人工方法配制而成的，专供微生物生长繁殖使用的混合营养液。
固体培养基 液体培养基 半固体培养基
2.不同的微生物往往需要采用不同的培养基配方
大肠杆菌配方 酵母提取物：0.25g 蛋白胨：0.5g Nacl：0.5g 琼脂：1g 水：50ml
3.培养基内所含的基本物质
①一般营养物质水、碳源、氮源、无机盐②其他物质pH、特殊营养物质,例如:生长因子(即细菌生长必需，而自身不能合成的化合物)以及氧气、二氧化碳、渗透压等的要求。
液体培养基：扩增细菌、工业生产固体培养基：纯化（分离），鉴定、保藏菌种
1.无菌操作泛指在培养微生物的操作中，所有防止杂菌污染的方法。 无菌操作是培养微生物成功的关键！
2.消毒与灭菌的概念及两者的区别
是指杀灭病原微生物的方法。
是指杀灭或清除环境中一切微生物（包括芽胞、孢子）的方法
b.干热灭菌：160-170℃ 下加热1-2h。c.高压蒸气灭菌：100kPa、121℃ 下维持15-30min.
取2个250ml的三角瓶中分别装入50mlLB液体培养基和50mlLB固体培养基（刚配好，尚未凝固），加上封口膜，牛皮纸包装后高压锅灭菌15min。
LB液体培养基——细菌的扩大培养LB固体培养基——细菌的划线分离
灭菌后的培养基在无菌操作台上倒入4个培养皿中，倒后立即置于水平位置上，轻轻晃动，使培养基铺满平皿底部，待凝，使之形成平面。
将斜面上培养的大肠杆菌菌种接种到灭菌后的液体培养基中，使其在37℃摇床培养12小时。
注意事项:1.火焰旁从斜面上用接种环取菌；2.取菌前接种环要用酒精灯灼烧灭菌，冷却后方能取菌；3.取菌后封口膜和棉塞复原。
1）灼烧接种环； 2）接种环冷却后，蘸取带菌培养物； 3）在近火焰处，让带菌接种环在固体培养基上划线。
注意事项:1.接种环只蘸一次菌液，但要在培养基不同位置连续划线多次。2.划线首尾不能相接。3.划线后，培养皿倒置培养12~24h。
2-3.从上次的末端开始，交叉2~3条线
4.最后的划线不能与第一区相连。
分离后，一个菌体便会形成一个菌落，这是消除污染杂菌的通用方法，也是用于筛选菌株的最简便方法之一。
1.临时保藏：接种到固体斜面培养基，菌落长成 后置于4℃冰箱保存。2.长期保存：甘油冷冻管藏法
大肠杆菌的培养和分离过程总结
1．关微生物营养物质的叙述中，正确的是（ ） A.是碳源的物质不可能同时是氮源 B.凡碳源都提供能量 C.除水以外的无机物只提供无机盐 D.无机氮源也能提供能量