浙江省台州十校联盟2024-2025学年高二下学期4月期中生物试题（原卷版+解析版）

这是一份浙江省台州十校联盟2024-2025学年高二下学期4月期中生物试题（原卷版+解析版），共22页。试卷主要包含了考试结束后，只需上交答题纸， 野生型伤寒沙门氏菌等内容，欢迎下载使用。
高二年级生物学科 试题
考生须知：
1.本卷共8页满分100分，考试时间90分钟。
2.答题前，在答题卷指定区域填写班级、姓名、考场号、座位号及准考证号并填涂相应数字。
3.所有答案必须写在答题纸上，写在试卷上无效。
4.考试结束后，只需上交答题纸。
选择题部分
一、选择题（本大题共25小题，每小题2分，共50分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的）
1. 用动物、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（ ）
A. 都要在无菌条件下进行
B. 都须用固体培养基
C. 都需用CO2培养箱
D. 都可体现细胞的全能性
2. 下列操作能达到灭菌目的的是（ ）
A. 实验操作者的双手用75%酒精擦拭
B. 制作泡菜前用开水烫洗容器
C. 尿素通过G6玻璃砂漏斗过滤
D. 流感期间用石炭酸喷洒教室
3. 基因工程是在分子水平上进行的操作，该过程中科学家所用的“手术刀”、“缝合针”和常采用的“运输车”分别是( )
A 限制酶、DNA连接酶、质粒
B. 限制酶、DNA聚合酶、噬菌体
C. DNA连接酶、限制酶、动植物病毒
D. DNA连接酶、限制酶、质粒
4. 下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（ ）
A. 动物细胞培养的理论基础是细胞增殖
B. 动物细胞原代培养后可用胃蛋白酶分散细胞
C. 动物细胞培养的培养基中需含维生素、血清等
D. 动物细胞培养的结果是获得细胞群，一般其遗传物质没有改变
5. 下图表示通过体外受精培育试管牛的过程，下列叙述错误的是（ ）
A. 体内受精过程与体外受精过程的实质是相同的
B. ②过程与细胞膜的选择透过性有关
C. ③过程细胞增殖方式是有丝分裂
D. ④过程属于胚胎移植过程
6. 某同学在利用血细胞计数板对酵母菌进行计数时，进行了如下操作，其中正确的是（ ）
A. 从静置的试管中直接吸取酵母菌培养液进行计数
B. 对压在小方格界线上的酵母菌，只计数上下两条界线上的细胞
C. 应先滴加菌液，再缓慢盖上盖玻片
D. 若视野中酵母菌数量过多，可先进行稀释后再计数
7. 制作泡菜时，向泡菜坛中加入一些“陈泡菜水”和一定浓度的食盐水，并于不同时间测定泡菜中亚硝酸盐含量，结果如图。下列说法错误的是（ ）

A. 加入“陈泡菜水”能缩短泡菜制作时间
B. 盐水浓度过高时，泡菜会“咸而不酸”
C. 图示中泡菜在腌制11天后食用较为适宜
D. 泡菜中的亚硝酸盐含量与泡菜质量成正相关
8. 植物组织培养在植物生产领域有着广泛的应用。下列关于植物组织培养技术的叙述正确的是（ ）
A. 诱导愈伤组织期间不需要光照
B. 接种时不需要在酒精灯火焰旁进行
C. 培养过程中不需要更换培养基
D. 接种前需要对外植体灭菌
9. 葡萄酒酿造技术历史悠久，唐代苏敬的《新修本草》云：“凡作酒醴须曲，而蒲桃（即葡萄）、蜜等酒独不用曲。”下列叙述错误的是（ ）
A. 为提高酒精产量，可在发酵瓶中适当添加白糖
B. 葡萄装入发酵瓶时，将瓶装满，可以一次得到较多葡萄酒
C. 装置密闭发酵过程中，酒精度的变化是先增加后趋于稳定
D. 若葡萄酒变酸且产生菌膜，一般可从菌膜中分离得到醋酸菌
10. 野生型伤寒沙门氏菌（his+）可合成组氨酸，某种突变体丧失了这种能力，必须在添加组氨酸的培养基上才能生长，称为组氨酸营养缺陷型（his），现用两种方法接种，甲为平板划线法，乙为稀释涂布平板法，下列叙述正确的是（ ）
A. 两种接种方法都需要稀释处理
B. 甲接种方法可用于对微生物的分离和计数
C. 乙接种方法可用于对微生物分离和计数
D. his菌株接种在不含组氨酸的培养基上能长出菌落
11. 选育高产、优质的菌种是发酵工程的前提条件，下列不属于发酵工程选育菌种的条件的是（ ）
A. 发酵产物需从菌中破碎分离
B. 菌种对环境应没有明显或潜在的伤害
C. 菌种遗传特性和生产能力稳定
D. 能利用充足且廉价的培养基原料
12. 将菊花外植体接种到MS培养基中，可以培育出菊花试管苗。下列叙述正确的是（ ）
A. 培养基中生长素与细胞分裂素的比值高时，有利于芽的形成
B. 在MS培养基中添加植物激素时，可直接添加，不需要配置母液
C. 培养基中添加蔗糖的目的是提供营养，同时调节渗透压
D. 长出丛状苗和生根的过程中，菊花组织遗传物质会发生改变
13. 驱蚊草散发的气味可在一定范围内驱除蚊子，驱蚊草是由天竺葵体细胞和香茅草体细胞杂交而得到的。下列关于驱蚊草培育的叙述，错误的是（ ）
A. 培育方法属于细胞工程育种，其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍
B. 培育手段是植物体细胞杂交，无愈伤组织和试管苗的形成
C. 培育过程中要用纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或离心、电融合等方法
D. 驱蚊草不能通过天竺葵和香茅草的有性杂交而获得是因为它们之间存在生殖隔离
14. 在分离、纯化细菌的实验中，划线接种（甲）、培养结果（乙）如下图，a、b、c、d是划线的四个区域。下列有关叙述错误的是（ ）

A. 操作过程中，接种环蘸取菌液1次，至少需灼烧五次
B. 连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落
C. 蘸取菌液和划线要在酒精灯火焰旁进行
D. 甲图中的a区域为划线的起始区域
15. 紫杉醇是红豆杉属植物产生的一种复杂的次生代谢产物，是天然抗癌药物。最初的紫杉醇是从红豆杉树皮中提取，但其产量少无法满足人们的需求，现利用图示过程来扩大来紫杉醇的产量。下列叙述错误的是（ ）
A. 培养的细胞收集后一般要经过破碎才能提取紫杉醇
B. ③过程一般采用液体培养基
C. 紫杉醇是细胞代谢产物，可以从愈伤组织中分离出来
D. 愈伤组织必须经再分化产生完整植株才能产生紫杉醇
以下所示为猕猴桃苹果复合果醋发酵工艺。
猕猴桃、苹果→榨汁→混合→酶解→巴氏杀菌→加入酵母菌→酒精发酵→过滤→加入醋酸菌→醋酸发酵→离心→调配→灌装→巴氏杀菌→成品
阅读材料完成下列小题：
16. 下列关于发酵过程中细胞代谢的叙述，正确的是（ ）
A. 酵母菌加入发酵液后只进行厌氧呼吸产生乙醇
B. 酵母菌在发酵中持续增殖导致其数量不断增多
C. 醋酸菌进行需氧发酵支持生命活动，主要在线粒体内进行
D. 氧气能将乙醇氧化成醋酸是醋酸发酵不能密闭的原因之一
17. 下列关于复合果醋发酵的叙述，正确的是（ ）
A. 果汁中加入纤维素酶和果胶酶有利于提高果汁产量
B. 发酵后进行巴氏杀菌是为了将发酵液中的微生物完全杀死
C. 果酒发酵和果醋发酵的温度都应控制在30℃
D. 发酵菌种的类型与比例不会影响复合果醋的口感
18. 关于DNA粗提取与鉴定实验的叙述，错误的是（ ）
A. DNA不溶于体积分数为95%的预冷酒精
B. 香蕉、鱼卵或猪血都是理想的实验材料
C. 提取植物材料的DNA需先研磨破碎细胞
D. 沸水浴中二苯胺试剂与DNA反应呈蓝色
19. 蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，下图为蛛丝蛋白基因对应的DNA片段结构示意图，其中1~4表示DNA上引物可能结合的位置，目前利用现代生物技术生产蜘蛛丝已取得成功。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 若从该DNA片段中直接获取蛛丝蛋白基因，会破坏4个磷酸二酯键
B. 若受体细胞为大肠杆菌，则需先用Ca2+处理，更利于实现转化
C. 在PCR仪中根据选定的引物扩增4次后，得到的含有两种引物的DNA片段所占比例为7/8
D. 若用PCR技术获取目的基因，则图中的1、4分别是2种引物结合的位置
20. 如图所示为早期胚胎发育过程。下列叙述错误的是（ ）

A. 图中a到c的过程发育潜能基本不变
B. 图中c、d、e阶段可用于人的胚胎移植
C. 图中e分为3个胚层，其中3将来可发育成胎盘
D. 当受精卵进入子宫时，胚胎已经发育成e
21. 我国科研团队利用普通柑橘培育出了无籽柑橘，具体操作流程如下图所示，N代表一个染色体组。下列叙述错误的是（ ）
A. 用纤维素酶和果胶酶处理柑橘甲细胞、柑橘乙细胞可获得原生质体
B. 为防止杂菌污染，融合甲、乙原生质体时应置于无菌水中操作
C. 原生质体的活性、甲和乙原生质体的比例都会影响融合成功率
D. 诱导融合细胞发育为无籽柑橘植株的过程利用了植物细胞的全能性
22. 植物细胞工程在很多方面有着广泛的应用。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 作物脱毒一般选择植物顶端分生区进行组织培养
B. 快速繁殖技术能够保持植物优良品种的遗传特性
C. 人工种子虽可快速大量繁殖，但生产过程明显受季节限制
D. 单倍体植株可以作为体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料
23. PCR技术可用于临床上病原菌的检测。为检测病人是否感染了某种病原菌，医生进行了相关操作：①利用PCR扩增DNA片段；②从病人组织样本中提取DNA；③分析PCR扩增结果；④采集病人组织样本。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 若要得到正确的检测结果，操作顺序应该为②①③④
B. PCR扩增的原理是DNA半保留复制，所用缓冲液中常加入Mg2+
C. 利用PCR扩增病原菌DNA时，需要设计两种碱基互补配对的引物
D. 设计的引物中G、C碱基所占比例越高，复性所需的温度越低
24. 基因工程受体细胞可以是细菌、动物或者植物细胞，因此将目的基因导入受体细胞的方法也有所差异。下列叙述错误的是（ ）
A. 导入植物细胞常采用农杆菌转化法
B. 基因枪法可将目的基因导入植物叶绿体等细胞器中
C. 大肠杆菌作为受体细胞时，通常需要使用钙离子处理
D. 显微注射可以将目的基因直接注射给动物体受精卵细胞
25. 将乳酸菌的乳酸脱氢酶基因导入酿酒酵母，获得能产生乳酸的转基因酵母菌。如图为构建基因表达载体时所用的质粒，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 使用限制酶BamHⅠ处理，将乳酸脱氢酶基因插入质粒
B. 可用PCR技术扩增获得乳酸菌的乳酸脱氢酶基因
C. 在含有尿嘧啶的培养基上筛选含有重组质粒的酵母菌
D. 转基因酵母菌培育成功的标志是产生乳酸脱氢酶
非选择题部分
二、非选择题（本大题共5小题，共50分）
26. 脂肪酶酵母用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。请回答下列问题：
（1）制备培养基时，为满足微生物生长需求，加入的营养成分应包含碳源、水、无机盐、生长因子、______，还需加入______作为凝固剂，并对培养基用______法进行灭菌。
（2）称取1.0g某土壤样品，转入99mL无菌水中，制备成菌悬液，经______后，获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0.1mL菌悬液涂布在固体培养基上，其中100倍稀释的菌悬液培养后平均长出了48个酵母菌落，则该样本中每克土壤约含酵母菌______个。
（3）为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行______育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以______为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径______的菌落，纯化后获得A、B两个突变菌株。
（4）在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价A、B两个菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如图。据图分析，应选择菌株______进行后续相关研究，理由是______。
27. 野生黑芥（染色体数为2A）具有黑腐病的抗性基因，而花椰菜（染色体数为2B）易感染黑腐病菌而患病，用生物工程技术获得抗黑腐病杂种黑芥—花椰菜植株，操作流程如图。请据图回答下列问题：

（1）图中涉及到的生物工程技术是植物体细胞杂交、______。获得原生质体时培养液需要保持较______（低/高）的渗透压，使细胞处于微弱的______状态。过程①PEG的作用是______。一段时间后，加入过量培养基进行稀释的目的是______。
（2）经过①操作后，融合的原生质体只有重新形成______后，才可进行有丝分裂，筛选出融合的杂种细胞，多次分裂形成的小细胞团经过______形成愈伤组织，可通过器官发生途径或______途径再生植株。
（3）若要分析杂种植株的染色体变异类型，应剪取该植株根尖和双亲植株的根尖，制作临时装片，然后在显微镜下观察比较______期染色体的形态和数目。用上述方法培养的该杂种植株含有的染色体数目是______；用黑腐病菌感染杂种植株，筛选出具有______的杂种黑芥—花椰菜植株。
28. 长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机，请据图完成下列问题：

（1）超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射______。从供体公牛中采集成熟精液放入培养液中培养，使精子达到______状态。
（2）图中标号1为______，它将来可发育为胚胎。
（3）动物的早期胚胎移植到同种且______与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。若对早期胚胎进行______，可提高胚胎的利用率，从而获得更多同卵多仔后代。
（4）试管牛的性别为______。克隆羊多莉的遗传物质来自______。
（5）试管牛的快速繁殖和绵羊多莉繁殖的生殖方式不同之处在于______。
29. 特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是某双特异性抗体作用图，图2是科研人员通过杂交-杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。请分析回答下列问题：
（1）图2中过程②选用的骨髓瘤细胞______（选填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。
（2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行______和______才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是______（答出两点）。
（3）图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是______。与植物体细胞杂交相比，诱导动物细胞融合特有的方法是用______诱导融合。体外培养杂交瘤细胞从培养基的成分来看，由于人们对细胞所需营养物质还没有完全分析清楚还需要加入______，将培养基置于CO2培养箱中，其中CO2的主要作用是______。
（4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是______。
30. 凝乳酶是食品生产中常用的凝结剂，科研人员从动物体内获得了凝乳酶mRNA，拟利用大肠杆菌通过基因工程生产凝乳酶。据图回答下列问题：
（1）利用凝乳酶mRNA，在______酶的作用下，可以得到凝乳酶的cDNA，进一步通过PCR技术扩增，扩增的原料是______。下列对引物的叙述错误的是______。
A.两个引物之间不应有互补性
B.引物自身不存在互补序列
C.引物与模板链复制起始端碱基互补
D.引物的碱基包含A、G、C、U四种
（2）图1和图2是选用的质粒及几种相关限制酶的识别位点，在构建基因表达载体时，最好选用的限制酶是______，这样选择的优点是______（答出两点）。为在凝乳酶基因两侧加上相应的酶切位点，设计引物时需在引物前添加相应酶切位点，PCR过程中至少复制______次可以得到含所需酶切位点的凝乳酶基因。
（3）将构建的重组质粒导入大肠杆菌，需要用钙离子处理，使大肠杆菌处于______状态。
（4）将在添加了青霉素培养基中得到的4个大肠杆菌菌落进行进一步检测，检测结果如图3所示，1~4号菌落中需要舍弃的是1号和______。其中舍弃1号菌落的理由是______。
考试结束前
2024学年第二学期台州十校联盟期中联考
高二年级生物学科 试题
考生须知：
1.本卷共8页满分100分，考试时间90分钟。
2.答题前，在答题卷指定区域填写班级、姓名、考场号、座位号及准考证号并填涂相应数字。
3.所有答案必须写在答题纸上，写在试卷上无效。
4.考试结束后，只需上交答题纸。
选择题部分
一、选择题（本大题共25小题，每小题2分，共50分。在每小题给出的四个选项中，只有一项是符合题目要求的）
1. 用动物、植物成体的体细胞进行离体培养，下列叙述正确的是（ ）
A. 都要在无菌条件下进行
B. 都须用固体培养基
C. 都需用CO2培养箱
D. 都可体现细胞的全能性
【答案】A
【解析】
【分析】在一般培养温度下呈固体状态的培养基都称固体培养基。在液体培养基中加入1.5%~2.0%左右的琼脂，加热至100℃溶解，40℃下冷却并凝固，使其成为固体状态即为固体培养基。
【详解】A、动、植物细胞培养都要在严格的无菌条件下进行，A正确；
B、动物细胞培养须用液体培养基，而植物组织培养需要用固体培养基，B错误；
C、动物细胞培养需要用CO2培养箱，但植物细胞培养不需要用CO2培养箱，C错误；
D、植物细胞培养能体现细胞的全能性，而动物细胞培养的原理是细胞增殖，不能体现全能性，D错误。
故选C。
2. 下列操作能达到灭菌目的的是（ ）
A. 实验操作者的双手用75%酒精擦拭
B. 制作泡菜前用开水烫洗容器
C. 尿素通过G6玻璃砂漏斗过滤
D. 流感期间用石炭酸喷洒教室
【答案】C
【解析】
【分析】灭菌是指使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞、芽孢和孢子的过程，常用的方法有灼烧灭菌、干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程，常用的方法有煮沸消毒法、巴氏消毒法、紫外线或化学药物消毒法等。
【详解】A、75%酒精擦拭双手属于消毒，仅能杀灭皮肤表面部分微生物，无法灭活芽孢，A错误；
B、开水烫洗容器是消毒，高温短时间处理可杀死多数微生物，但对耐高温芽孢无效，B错误；
C、G6玻璃砂漏斗过滤是灭菌方法。G6玻璃砂漏斗的孔径极小（约0.22μm），可截留细菌等微生物，实现无菌过滤，常用于不耐热液体的灭菌，C正确；
D、石炭酸喷洒教室属于消毒，仅能杀灭部分病原微生物，无法彻底灭菌，D错误。
故选C。
3. 基因工程是在分子水平上进行的操作，该过程中科学家所用的“手术刀”、“缝合针”和常采用的“运输车”分别是( )
A. 限制酶、DNA连接酶、质粒
B. 限制酶、DNA聚合酶、噬菌体
C. DNA连接酶、限制酶、动植物病毒
D. DNA连接酶、限制酶、质粒
【答案】A
【解析】
【详解】基因工程是在分子水平上进行的操作，该过程中科学家所用的“手术刀”是限制酶，“缝合针”为DNA连接酶，“运输车”为运载体，质粒是常用的运载体。故A正确。
4. 下列关于动物细胞培养的叙述，错误的是（ ）
A. 动物细胞培养的理论基础是细胞增殖
B. 动物细胞原代培养后可用胃蛋白酶分散细胞
C. 动物细胞培养的培养基中需含维生素、血清等
D. 动物细胞培养的结果是获得细胞群，一般其遗传物质没有改变
【答案】B
【解析】
【分析】动物细胞培养指从动物机体中取出相关的组织，将它分散成单个细胞，然后，在适宜的培养基中，让这些细胞生长和增殖。
【详解】A、动物细胞培养的原理是细胞增殖，A正确；
B、动物细胞原代培养后可用胰蛋白酶或胶原蛋白酶分散细胞，胃蛋白酶在强酸条件下发挥活性，在偏中性的pH下无活性，动物细胞培养液偏中性，B错误；
C、动物细胞培养的培养基中需含维生素、血清等，可以为动物细胞提供营养物质，C正确；
D、动物细胞培养利用的原理是细胞增殖，结果是获得细胞群，一般其遗传物质没有改变，D正确。
故选B。
5. 下图表示通过体外受精培育试管牛的过程，下列叙述错误的是（ ）
A. 体内受精过程与体外受精过程的实质是相同的
B. ②过程与细胞膜的选择透过性有关
C. ③过程的细胞增殖方式是有丝分裂
D. ④过程属于胚胎移植过程
【答案】B
【解析】
【分析】题图表示通过体外受精培育试管牛的流程图，图中①表示卵细胞的采集，②表示体外受精，③表示早期胚胎培养，④表示胚胎移植。
【详解】A、体内受精和体外受精过程的实质都是精子和卵子的结合形成受精卵，所以体内受精过程与体外受精过程的实质是相同的，A正确；
B、②过程是精子和卵子的结合，即受精作用，受精作用涉及精卵的识别和融合，主要与细胞膜的流动性有关，而不是选择透过性，B错误；
C、③过程是受精卵发育为早期胚胎，细胞增殖方式是有丝分裂，有丝分裂能保持亲子代细胞遗传物质的稳定性，保证胚胎正常发育，C正确；
D、④过程是将早期胚胎移植到母体子宫内，属于胚胎移植过程，D正确。
故选B。
6. 某同学在利用血细胞计数板对酵母菌进行计数时，进行了如下操作，其中正确的是（ ）
A. 从静置的试管中直接吸取酵母菌培养液进行计数
B. 对压在小方格界线上的酵母菌，只计数上下两条界线上的细胞
C. 应先滴加菌液，再缓慢盖上盖玻片
D. 若视野中酵母菌数量过多，可先进行稀释后再计数
【答案】D
【解析】
【分析】利用血细胞计数板在显微镜下直接计数，是一种常用的微生物计数方法。此法的优点是直观、快速。将经过适当稀释的菌悬液（或孢子悬液）放在血细胞计数板载玻片与盖玻片之间的计数室中，在显微镜下进行计数。由于计数室的容积是一定的，所以可以根据在显微镜下观察到的微生物数目来换算成单位体积内的微生物总数目。由于此法计得的是活菌体和死菌体的总和，故又称为总菌计数法。
【详解】A、静置的试管中酵母菌可能沉降，直接取样会导致浓度不均，需摇匀后再取样以确保准确性，A错误；
B、计数规则通常为“计上不计下，计左不计右”或类似原则，而非仅计数上下两条界线，选项描述不符合标准操作，B错误；
C、正确操作是先将盖玻片盖在计数室上，再从边缘滴加菌液，利用毛细作用填充。若先滴液再盖片，易产生气泡或溢出，影响结果，C错误；
D、若视野中酵母菌过多，稀释培养液可降低密度，使每个小方格内菌数适宜，确保计数准确，D正确。
故选D。
7. 制作泡菜时，向泡菜坛中加入一些“陈泡菜水”和一定浓度的食盐水，并于不同时间测定泡菜中亚硝酸盐含量，结果如图。下列说法错误的是（ ）

A. 加入“陈泡菜水”能缩短泡菜制作时间
B. 盐水浓度过高时，泡菜会“咸而不酸”
C. 图示中泡菜在腌制11天后食用较为适宜
D. 泡菜中的亚硝酸盐含量与泡菜质量成正相关
【答案】D
【解析】
【分析】泡菜的制作原理：泡菜的制作离不开乳酸菌。在无氧条件下，乳酸菌将葡萄糖分解成乳酸。据图可知，泡菜腌制的5-7天内亚硝酸盐的含量较高，不宜食用。
【详解】A、加入“陈泡菜水”是为了接种乳酸菌，因而能缩短泡菜成熟时间，A正确；
B、若食盐水浓度过高，则可能会抑制乳酸菌等的发酵，泡菜可能表现为“咸而不酸”，B正确；
C、结合图示可知，亚硝酸盐含量在第5天时最高，不适合食用，亚硝酸盐含量在第11天以后较低，此时适合食用，C正确；
D、泡菜中的亚硝酸盐是在硝酸还原菌的作用下产生的，与泡菜的质量不成正相关，D错误。
故选D。
8. 植物组织培养在植物生产领域有着广泛的应用。下列关于植物组织培养技术的叙述正确的是（ ）
A. 诱导愈伤组织期间不需要光照
B. 接种时不需要在酒精灯火焰旁进行
C. 培养过程中不需要更换培养基
D. 接种前需要对外植体灭菌
【答案】A
【解析】
【分析】植物组织培养与微生物的培养的成功的关键是无菌操作，即植物组织培养接种时应注意消毒、灭菌，防止微生物污染。
【详解】A、诱导愈伤组织期间，外植体的代谢主要是异养代谢，光照会使外植体进行光合作用等生理活动，可能影响愈伤组织的诱导，所以诱导愈伤组织期间不需要光照，A正确；
B、接种时需要在酒精灯火焰旁进行，因为酒精灯火焰旁存在无菌区域，在该区域操作可以减少杂菌污染的机会，B错误；
C、在植物组织培养过程中，不同的培养阶段对外植体的营养需求、激素种类和浓度等要求不同，所以需要更换培养基，例如从诱导愈伤组织到再分化形成幼苗阶段，培养基成分会有相应调整，C错误；
D、接种前需要对外植体进行消毒，而不是灭菌。灭菌会杀死外植体的细胞，导致无法进行组织培养，消毒是杀死外植体表面的杂菌，D错误。
故选A。
9. 葡萄酒的酿造技术历史悠久，唐代苏敬的《新修本草》云：“凡作酒醴须曲，而蒲桃（即葡萄）、蜜等酒独不用曲。”下列叙述错误的是（ ）
A. 为提高酒精产量，可在发酵瓶中适当添加白糖
B. 葡萄装入发酵瓶时，将瓶装满，可以一次得到较多葡萄酒
C. 装置密闭发酵过程中，酒精度的变化是先增加后趋于稳定
D. 若葡萄酒变酸且产生菌膜，一般可从菌膜中分离得到醋酸菌
【答案】B
【解析】
【分析】在葡萄酒的自然发酵过程中，起主要作用的是附着在葡萄皮上的野生型酵母菌。在发酵过程中，随着酒精度数的提高，红葡萄皮的色素也进入发酵液，使葡萄酒呈现深红色。在缺氧、呈酸性的发酵液中，酵母菌可以生长繁殖，而绝大多数其他微生物都因无法适应这一环境而受到抑制。
【详解】A、为提高酒精产量，可在发酵瓶中适当添加白糖，因为白糖可以为酵母菌提供碳源，A正确；
B、葡萄装入发酵瓶时，通常留1/3的空间，这样可以避免发酵过程中发酵液溢出，另一方面还能使酵母菌进行有氧呼吸产生较多的能量满足酵母菌增殖过程中对能量的需求，B错误；
C、装置密闭发酵过程中，随着发酵的进行酵母活细胞数量和酒精度逐渐增大，而在发酵后期酒精度趋于稳定，C正确；
D、若发现葡萄酒变酸且产生表面菌膜，是由于醋酸菌大量的繁殖产生的菌膜，故一般可从菌膜中分离得到醋酸菌，D正确。
故选B。
10. 野生型伤寒沙门氏菌（his+）可合成组氨酸，某种突变体丧失了这种能力，必须在添加组氨酸的培养基上才能生长，称为组氨酸营养缺陷型（his），现用两种方法接种，甲为平板划线法，乙为稀释涂布平板法，下列叙述正确的是（ ）
A. 两种接种方法都需要稀释处理
B. 甲接种方法可用于对微生物的分离和计数
C. 乙接种方法可用于对微生物的分离和计数
D. his菌株接种在不含组氨酸的培养基上能长出菌落
【答案】C
【解析】
【分析】微生物的接种方法：
（1）平板划线法：把混杂在一起的微生物或同一微生物群体中的不同细胞用接种环在平板培养基，通过分区划线稀释而得到较多独立分布的单个细胞，经培养后生长繁殖成单菌落，通常把这种单菌落当作待分离微生物的纯种。
（2）稀释涂布平板法：将菌波进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。在稀释度足够高的菌液里，聚集在一起的微生物将被分散成单个细胞，从而能在培养基表面形成单个的菌落。
【详解】A、平板划线法通过连续划线稀释菌液，无需预先梯度稀释；而稀释涂布平板法需对菌液进行系列稀释因此，并非两种方法均需稀释处理，A错误；
B、平板划线法仅用于微生物的分离纯化，无法直接计数（因无法确定原始菌液浓度），B错误；
C、稀释涂布平板法通过梯度稀释和涂布，既可分离单菌落，也可通过统计菌落数计算原始菌液浓度，兼具分离与计数功能，C正确；
D、组氨酸营养缺陷型（his）依赖外源组氨酸生长，在不含组氨酸的培养基上无法形成菌落，D错误。
故选C。
11. 选育高产、优质的菌种是发酵工程的前提条件，下列不属于发酵工程选育菌种的条件的是（ ）
A. 发酵产物需从菌中破碎分离
B. 菌种对环境应没有明显或潜在的伤害
C. 菌种遗传特性和生产能力稳定
D. 能利用充足且廉价的培养基原料
【答案】A
【解析】
【分析】发酵工程是指利用微生物的特定功能，通过现代工程技术，规模化生产对人类有用的产品，主要包括微生物的代谢物、酶及菌体本身。发酵工程一般包括菌种的选育，扩大培养，培养基的配置、火菌，接种，发酵、产品的分离、提纯等方面。发酵过程一般来说都是在常温常压下进行，条件温和、反应安全，原料简单、污染小，反应专一性强，因而可以得到较为专一的产物。
【详解】A、选育高产、优质的菌种需要根据人们的需要进行设计，而发酵产物需从菌中破碎分离不是选育菌种的条件，且发酵产物未必需要菌体破碎后获得，符合题意，A正确；
B、菌种对环境应没有明显或潜在的伤害这是选育高产、优质菌种的前提条件，不符合题意，B错误；
C、选育出的高产、优质的菌种应该具备遗传特性和生产能力稳定的特征，否则不能投入到生产中，不符合题意，C错误；
D、选育出的高产、优质的菌种应该具备能利用充足且廉价的培养基原料的特征，这样才能降低生产成本，获得较高的经济效益，不符合题意，D错误。
故选A。
12. 将菊花外植体接种到MS培养基中，可以培育出菊花试管苗。下列叙述正确的是（ ）
A. 培养基中生长素与细胞分裂素的比值高时，有利于芽的形成
B. 在MS培养基中添加植物激素时，可直接添加，不需要配置母液
C. 培养基中添加蔗糖的目的是提供营养，同时调节渗透压
D. 长出丛状苗和生根的过程中，菊花组织遗传物质会发生改变
【答案】C
【解析】
【分析】细胞分化是指同一来源的细胞逐渐产生出形态结构、功能特征各不相同的细胞类群的过程，其结果是在空间上细胞产生差异，在时间上同一细胞与其从前的状态有所不同。细胞分化的本质是基因组在时间和空间上的选择性表达。
【详解】A、生长素与细胞分裂素的用量比值高时，有利于根的形成，A错误；
B、在MS培养基中添加植物激素时，通常需要配置母液后再稀释使用，而不是直接添加‌，B错误；
C、植物组织培养时在培养基中添加蔗糖的目的是提供营养和调节渗透压，C正确；
D、长出丛芽和生根的过程是细胞分化的结果，细胞分化的本质是基因的选择性表达，因此，菊花组织细胞的遗传物质没有发生改变，D错误。
故选C。
13. 驱蚊草散发的气味可在一定范围内驱除蚊子，驱蚊草是由天竺葵体细胞和香茅草体细胞杂交而得到的。下列关于驱蚊草培育的叙述，错误的是（ ）
A. 培育方法属于细胞工程育种，其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍
B. 培育手段是植物体细胞杂交，无愈伤组织和试管苗的形成
C. 培育过程中要用纤维素酶、果胶酶、PEG等试剂或离心、电融合等方法
D. 驱蚊草不能通过天竺葵和香茅草的有性杂交而获得是因为它们之间存在生殖隔离
【答案】B
【解析】
【分析】植物体细胞杂交技术的意义：在克服远源杂交不亲和的障碍、培育作物新品种方面所取得的重大突破。
【详解】A、培育方法属于细胞工程育种，其优点是能克服远缘杂交不亲和的障碍，是培育作物新品种方面所取得的重大突破，A正确；
B、驱蚊草是通过天竺葵体细胞和香茅草体细胞杂交而得到的，在此技术中仍需要利用植物组织培养技术，有愈伤组织和试管苗的形成过程，B错误；
C、植物体细胞杂交培育过程中，要用纤维素酶、果胶酶去细胞壁，用PEG等试剂或离心、电融合等方法促进原生质融合，C正确；
D、天竺葵和香茅草是两种物种，具有生殖隔离，不能通过有性杂交而获得驱蚊草，D正确。
故选B。
14. 在分离、纯化细菌的实验中，划线接种（甲）、培养结果（乙）如下图，a、b、c、d是划线的四个区域。下列有关叙述错误的是（ ）

A. 操作过程中，接种环蘸取菌液1次，至少需灼烧五次
B. 连续划线的目的是获得单个细菌形成的菌落
C. 蘸取菌液和划线要在酒精灯火焰旁进行
D. 甲图中的a区域为划线的起始区域
【答案】D
【解析】
【分析】分析题干可看出本实验接种微生物的方法为平板划线法，该方法中会通过多次划线来逐步稀释以便获得单个菌落，因此在最后的一个区域中可能获得单个菌落，该方法实施时为了严格的无菌操作，需要全程在酒精灯火焰附近操作。
【详解】A、平板划线法中每次划线前都要灼烧接种环，保证菌种来自于上一次划线的末端，划线结束后也要灼烧接种环，防止污染环境、感染接种者；操作过程中，划线了四次，因此接种环蘸取菌液1次，至少需灼烧五次，A正确；
B、连续划线可以将聚集的菌种逐步稀释，以便获得单个菌落，B正确；
C、为了防止空气中杂菌的污染，蘸取菌液和划线都要在酒精灯火焰旁进行，C正确。
D、分析图乙，a对应的区域出现了单个菌落，d区域菌落最多，因此a区域应该为划线的最终区域，d区域为划线的起始区域，D错误；
故选D。
15. 紫杉醇是红豆杉属植物产生的一种复杂的次生代谢产物，是天然抗癌药物。最初的紫杉醇是从红豆杉树皮中提取，但其产量少无法满足人们的需求，现利用图示过程来扩大来紫杉醇的产量。下列叙述错误的是（ ）
A. 培养的细胞收集后一般要经过破碎才能提取紫杉醇
B. ③过程一般采用液体培养基
C. 紫杉醇是细胞代谢产物，可以从愈伤组织中分离出来
D. 愈伤组织必须经再分化产生完整植株才能产生紫杉醇
【答案】D
【解析】
【分析】1、植物细胞培养即在离体条件下对单个植物细胞或细胞团进行培养使其增殖的技术。利用植物细胞培养来获得目标产物（次生代谢产物），这个过程就是细胞产物的工厂化生产。
2、植物组织培养技术是指将离体的植物器官、组织或细胞等，在人工配制的培养基上，给予适宜的培养条件，诱导其形成完整植株的技术。其具体流程为：接种外植体→诱导愈伤组织→诱导生芽→诱导生根→移栽成活。
【详解】A、因为紫杉醇是细胞内的代谢产物，存在于细胞内部。 所以培养的细胞收集后一般要经过破碎，使细胞破裂释放出紫杉醇，才能提取到紫杉醇，A正确；
B、③过程是从单个细胞培养成高产细胞群。 液体培养基具有营养物质分布均匀、能更好地满足细胞生长对营养的需求等优点，有利于细胞的生长和增殖，所以一般采用液体培养基，B正确；
C、从图中可知，①过程形成了愈伤组织。 且紫杉醇是细胞代谢产物，愈伤组织也是细胞，所以可以从愈伤组织中分离出紫杉醇，C正确；
D、从图中流程来看，是从愈伤组织培养得到单个细胞、高产细胞群，然后从细胞分泌物中提取紫杉醇。 说明不一定要经过再分化产生完整植株才产生紫杉醇，在愈伤组织培养等阶段就可以产生，D错误。
故选D。
以下所示为猕猴桃苹果复合果醋发酵工艺。
猕猴桃、苹果→榨汁→混合→酶解→巴氏杀菌→加入酵母菌→酒精发酵→过滤→加入醋酸菌→醋酸发酵→离心→调配→灌装→巴氏杀菌→成品
阅读材料完成下列小题：
16. 下列关于发酵过程中细胞代谢的叙述，正确的是（ ）
A. 酵母菌加入发酵液后只进行厌氧呼吸产生乙醇
B. 酵母菌在发酵中持续增殖导致其数量不断增多
C. 醋酸菌进行需氧发酵支持生命活动，主要在线粒体内进行
D. 氧气能将乙醇氧化成醋酸是醋酸发酵不能密闭的原因之一
17. 下列关于复合果醋发酵的叙述，正确的是（ ）
A. 果汁中加入纤维素酶和果胶酶有利于提高果汁产量
B. 发酵后进行巴氏杀菌是为了将发酵液中的微生物完全杀死
C. 果酒发酵和果醋发酵的温度都应控制在30℃
D. 发酵菌种的类型与比例不会影响复合果醋的口感
【答案】16. D 17. A
【解析】
【分析】1、果酒的制作离不开酵母菌，酵母菌是异养兼性厌氧型生物，在有氧条件下，酵母菌进行有氧呼吸，大量繁殖，在无氧条件下，酵母菌进行酒精发酵。
2、醋酸菌是一种好氧细菌，当氧气、糖源都充足时，醋酸菌将糖分解成醋酸；当缺少糖源时，醋酸菌将乙醇变为乙醛，再将乙醛变为醋酸。
【16题详解】
A、酵母菌加入发酵液后，初期氧气充足时进行有氧呼吸大量繁殖，氧气减少后才进行厌氧呼吸产生乙醇，并非只进行厌氧呼吸，A错误；
B、在发酵后期，由于营养物质减少、酒精浓度升高、pH 变化等因素，酵母菌的繁殖会受到抑制，数量不会持续增多，B错误；
C、醋酸菌是原核生物，没有线粒体，其需氧发酵是在细胞质基质中进行的，C错误；
D、醋酸菌是好氧菌，且醋酸发酵时，氧气能将乙醇氧化成醋酸，所以醋酸发酵不能密闭，D正确。
故选D。
【17题详解】
A、果汁中加入纤维素酶和果胶酶，可以分解植物细胞壁和胞间层，使果汁更容易释放出来，有利于提高果汁产量，A正确；
B、巴氏杀菌是采用较低温度在规定的时间内对食品进行加热处理，达到杀死微生物营养体的目的，不能将发酵液中的微生物完全杀死，B错误；
C、果酒发酵（酵母菌主导）的最适温度为18-25℃，而果醋发酵（醋酸菌主导）需30-35℃。二者温度控制不同，统一设为30℃不符合微生物的最适需求，C错误；
D、不同的发酵菌种以及它们的比例不同，发酵产生的代谢产物不同，会影响复合果醋的口感，D错误。
故选A。
18. 关于DNA粗提取与鉴定实验的叙述，错误的是（ ）
A. DNA不溶于体积分数为95%的预冷酒精
B. 香蕉、鱼卵或猪血都是理想的实验材料
C. 提取植物材料的DNA需先研磨破碎细胞
D. 沸水浴中二苯胺试剂与DNA反应呈蓝色
【答案】B
【解析】
【分析】DNA粗提取和鉴定的原理：
1、DNA的溶解性：DNA和蛋白质等其他成分在不同浓度NaCl溶液中溶解度不同，DNA不溶于冷酒精溶液，但细胞中的某些蛋白质溶于酒精。
2、DNA的鉴定：在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色。
【详解】A、根据以上分析可知，DNA不溶于95%的冷酒精，但溶于2ml•L-1的NaCl溶液，A正确；
B、猪为哺乳动物，其成熟的红细胞中不含细胞核和细胞器，即不含DNA，因此不能作为该实验的材料，B错误；
C、利用植物组织提取DNA时，须先破碎细胞，破碎细胞时需添加食盐和洗涤剂进行研磨，添加该物质的目的是瓦解细胞膜，而加入食盐的目的是溶解并提取DNA，C正确；
D、在沸水浴的条件下，DNA遇二苯胺会被染成蓝色，D正确。
故选B。
19. 蜘蛛丝（丝蛋白）被称为“生物钢”，有着超强的抗张强度，下图为蛛丝蛋白基因对应的DNA片段结构示意图，其中1~4表示DNA上引物可能结合的位置，目前利用现代生物技术生产蜘蛛丝已取得成功。下列有关叙述错误的是（ ）
A. 若从该DNA片段中直接获取蛛丝蛋白基因，会破坏4个磷酸二酯键
B. 若受体细胞为大肠杆菌，则需先用Ca2+处理，更利于实现转化
C. 在PCR仪中根据选定的引物扩增4次后，得到的含有两种引物的DNA片段所占比例为7/8
D. 若用PCR技术获取目的基因，则图中的1、4分别是2种引物结合的位置
【答案】D
【解析】
【分析】由图可知，由于DNA聚合酶只能从5′→3′延伸子链，图中的磷酸基团为5'端，羟基为3′端，由于引物要延伸子链，子链和模板链反向平行，因此根据引物的延伸方向可知图中与引物结合的部位是2、3。
【详解】A、若从该DNA片段中直接获取蛛丝蛋白基因，DNA每条链上会破坏2个磷酸二酯键，共会破坏4个磷酸二酯键，A正确；
B、自然条件下，细菌的转化效率很低，通过化学和物理方法的处理可以增强细菌捕获外源DNA的能力，成为感受态细胞。因钙离子能促进细菌摄取外源的DNA，科学家常使用CaCl2溶液制备感受态细胞，进而转入外源DNA。若受体细胞为大肠杆菌，大肠杆菌常用的转化方法是：先用Ca2+处理细胞，再将载体DNA分子溶于缓冲液中与此种细胞混合，在一定的温度下促进感受态细胞吸收DNA分子，B正确；
C、在PCR仪中进行扩增，第1次循环得到2个DNA分子，其中2个DNA分子都只含一种引物，第2次循环得到4个DNA分子，其中2个DNA分子含两种引物，2个DNA分子只含一种引物，第3次循环得到8个DNA分子，其中6个DNA分子含两种引物，2个DNA分子只含一种引物，第4次循环得到16个DNA分子，其中14个DNA分子含两种引物，2个DNA分子只含一种引物，所以扩增4次后，含有两种引物的DNA片段所占比例为14/16=7/8，C正确；
D、由于DNA聚合酶只能从5′→3′延伸子链，图中的磷酸基团为5'端，羟基为3′端，由引物3′端延伸子链，子链和模板链反向平行，因此根据引物的延伸方向可知图中与引物结合的部位是2、3，D错误。
故选D。
20. 如图所示为早期胚胎发育过程。下列叙述错误的是（ ）

A. 图中a到c的过程发育潜能基本不变
B. 图中c、d、e阶段可用于人胚胎移植
C. 图中e分为3个胚层，其中3将来可发育成胎盘
D. 当受精卵进入子宫时，胚胎已经发育成e
【答案】C
【解析】
【分析】胚胎发育的过程：受精卵→卵裂期→桑椹胚→囊胚→原肠胚→幼体。
【详解】A、图中a到c的过程属于受精卵的卵裂过程，这些细胞全能性均最高，发育潜能基本不变，A正确；
B、用于人的胚胎移植的阶段包括c四细胞胚阶段、d桑椹胚阶段、e囊胚阶段，B正确；
C、e为囊胚阶段，此阶段的胚胎没有胚层的分化，C错误；
D、当受精卵进入子宫时，胚胎已经发育成e囊胚，D正确。
故选C。
21. 我国科研团队利用普通柑橘培育出了无籽柑橘，具体操作流程如下图所示，N代表一个染色体组。下列叙述错误的是（ ）
A. 用纤维素酶和果胶酶处理柑橘甲细胞、柑橘乙细胞可获得原生质体
B. 为防止杂菌污染，融合甲、乙原生质体时应置于无菌水中操作
C. 原生质体的活性、甲和乙原生质体的比例都会影响融合成功率
D. 诱导融合细胞发育为无籽柑橘植株的过程利用了植物细胞的全能性
【答案】B
【解析】
【分析】诱导原生质体融合的方法是离心、电刺激、聚乙二醇等试剂诱导。
【详解】A、植物细胞壁的主要成分是纤维素和果胶，用纤维素酶和果胶酶处理能除去细胞壁获得原生质体，A正确；
B、融合原生质体时应置于等渗溶液中，置于无菌水中操作会导致其吸水涨破，B错误；
C、原生质体的活性、甲、乙原生质体的比例、诱导融合的时间等都会影响融合成功率，C正确；
D、诱导融合细胞发育为无籽柑橘植株过程是将杂种细胞培育成杂种植株，利用了植物细胞的全能性，D正确。
故选B。
22. 植物细胞工程在很多方面有着广泛的应用。下列相关叙述错误的是（ ）
A. 作物脱毒一般选择植物顶端分生区进行组织培养
B. 快速繁殖技术能够保持植物优良品种的遗传特性
C. 人工种子虽可快速大量繁殖，但生产过程明显受季节限制
D. 单倍体植株可以作为体细胞诱变育种和研究遗传突变的理想材料
【答案】C
【解析】
【分析】植物细胞工程技术的应用：植物繁殖的新途径（包括微型繁殖，作物脱毒、人工种子等）、作物新品种的培育（单倍体育种、突变体的利用）、细胞产物的工厂化生产。单倍体育种通常需要花药离体培养获得单倍体幼苗，而后通过诱导染色体数目加倍获得纯合体植株。
【详解】A、茎尖组织含病毒极少，甚至无病毒，因此利用茎尖组织培养技术可以实现作物脱毒，即作物脱毒一般选择茎尖进行组织培养，A正确；
B、快速繁殖技术的原理是植物细胞的全能性，属于无性繁殖，因此，能够保持植物优良品种的遗传特性，B正确；
C、人工种子的生产在实验室可控条件下进行，理论上不受季节限制，可全年工厂化生产，C错误；
D、单倍体植株仅含一个染色体组，诱变后隐性突变易直接表现，是理想的育种和遗传研究材料，D正确。
故选C。
23. PCR技术可用于临床上病原菌的检测。为检测病人是否感染了某种病原菌，医生进行了相关操作：①利用PCR扩增DNA片段；②从病人组织样本中提取DNA；③分析PCR扩增结果；④采集病人组织样本。下列有关叙述正确的是（ ）
A. 若要得到正确的检测结果，操作顺序应该为②①③④
B. PCR扩增的原理是DNA半保留复制，所用缓冲液中常加入Mg2+
C. 利用PCR扩增病原菌DNA时，需要设计两种碱基互补配对的引物
D. 设计的引物中G、C碱基所占比例越高，复性所需的温度越低
【答案】B
【解析】
【分析】利用PCR获取和扩增目的基因：
（1）PCR：即聚合酶链式反应，是一项根据DNA半保留复制的原因，在体外提供参与DNA复制的各种组分与反应条件，对目的基因的核苷酸序列进行大量复制的技术。
（2）步骤：变性、复性、延伸。
【详解】A、依据题干信息，若要得到正确的检测结果，操作顺序应该为④②①③，A错误；
B、PCR扩增的原理是DNA半保留复制，所用缓冲液中常加入Mg2+，以激活耐高温的DNA聚合酶的活性，B正确；
C、PCR扩增所需要的两引物不需要彼此碱基互补配对，C错误；
D、设计的引物中G、C碱基所占比例越高，氢键的数目就越多，复性所需的温度越高，D错误。
故选B。
24. 基因工程受体细胞可以是细菌、动物或者植物细胞，因此将目的基因导入受体细胞的方法也有所差异。下列叙述错误的是（ ）
A. 导入植物细胞常采用农杆菌转化法
B. 基因枪法可将目的基因导入植物叶绿体等细胞器中
C. 大肠杆菌作为受体细胞时，通常需要使用钙离子处理
D. 显微注射可以将目的基因直接注射给动物体受精卵细胞
【答案】D
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。将目的基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法、基因枪法和花粉管通道法；将目的基因导入动物细胞最有效的方法是显微注射法；将目的基因导入微生物细胞的方法是感受态细胞法。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测：①检测转基因生物染色体的DNA是否插入目的基因--DNA分子杂交技术；②检测目的基因是否转录出了mRNA--分子杂交技术；③检测目的基因是否翻译成蛋白质--抗原-抗体杂交技术。个体水平上的鉴定：抗虫鉴定、抗病鉴定、活性鉴定等。
【详解】A、将目的基因导入植物细胞采用最多的方法是农杆菌转化法，此外还有基因枪法和花粉管通道法等，A正确；
B、基因枪法可将目基因导入植物叶绿体等细胞器中，这样可以避免目的基因随着花粉进行传播，B正确；
C、将目的基因导入微生物细胞，如大肠杆菌时，常用感受态转化法，即需要使用钙离子处理大肠杆菌细胞，使之成为感受态细胞，C正确；
D、显微注射可以将目的基因的DNA溶液直接注射给动物受精卵细胞，从而可获得转基因动物，D错误。
故选D。
25. 将乳酸菌的乳酸脱氢酶基因导入酿酒酵母，获得能产生乳酸的转基因酵母菌。如图为构建基因表达载体时所用的质粒，下列相关叙述正确的是（ ）
A. 使用限制酶BamHⅠ处理，将乳酸脱氢酶基因插入质粒
B. 可用PCR技术扩增获得乳酸菌的乳酸脱氢酶基因
C. 在含有尿嘧啶的培养基上筛选含有重组质粒的酵母菌
D. 转基因酵母菌培育成功的标志是产生乳酸脱氢酶
【答案】B
【解析】
【分析】基因工程的基本操作步骤主要包括：（1）目的基因的获取；（2）基因表达载体的构建（核心）；（3）将目的基因导入受体细胞；（4）目的基因的检测与鉴定。
【详解】A、从图中可知，BamHⅠ酶切位点位于酿酒酵母基因终止子之后，若用限制酶BamHⅠ处理，将乳酸脱氢酶基因插入质粒，由于启动子在XbaⅠ酶切位点附近，这样插入的乳酸脱氢酶基因不在启动子之后，无法正常转录，所以不能用限制酶BamHⅠ处理，A错误；
B、PCR技术可以在体外大量扩增特定的DNA片段，乳酸菌的乳酸脱氢酶基因是一段特定的DNA序列，所以可以使用PCR技术扩增获得乳酸菌的乳酸脱氢酶基因，B正确；
C、含有重组质粒的酵母菌具有尿嘧啶合成酶基因，可以产生尿嘧啶，所以应该在不含尿嘧啶的培养基上筛选含有重组质粒的酵母菌，C错误；
D、转基因酵母菌培育成功的标志是能产生乳酸，而不是产生乳酸脱氢酶，产生乳酸脱氢酶只是具备了产生乳酸的一个条件，D错误。
故选B。
非选择题部分
二、非选择题（本大题共5小题，共50分）
26. 脂肪酶酵母用于含油废水处理。为筛选产脂肪酶酵母菌株，科研人员开展了相关研究。请回答下列问题：
（1）制备培养基时，为满足微生物生长需求，加入的营养成分应包含碳源、水、无机盐、生长因子、______，还需加入______作为凝固剂，并对培养基用______法进行灭菌。
（2）称取1.0g某土壤样品，转入99mL无菌水中，制备成菌悬液，经______后，获得细胞密度不同的菌悬液。分别取0.1mL菌悬液涂布在固体培养基上，其中100倍稀释的菌悬液培养后平均长出了48个酵母菌落，则该样本中每克土壤约含酵母菌______个。
（3）为了进一步提高酵母菌产酶能力，对分离所得的菌株，采用射线辐照进行______育种。将辐照处理后的酵母菌涂布在以______为唯一碳源的固体培养基上，培养一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选择直径______的菌落，纯化后获得A、B两个突变菌株。
（4）在处理含油废水的同时，可获得单细胞蛋白，实现污染物资源化。为评价A、B两个菌株的相关性能，进行了培养研究，结果如图。据图分析，应选择菌株______进行后续相关研究，理由是______。
【答案】（1） ①. 氮源 ②. 琼脂 ③. 高压蒸汽灭菌
（2） ①. 梯度稀释 ②. 4.8×106（或4800000）
（3） ①. 诱变 ②. 脂肪（或油脂） ③. 较大
（4） ①. B ②. 该菌株增殖速度快，单细胞蛋白产量高；降解脂肪能力强，净化效果好
【解析】
【分析】虽然各种培养基的配方不同，但一般都含有水、碳源（提供碳元素的物质）、氮源（提供氮元素的物质）和无机盐等营养物质。在提供上述几种主要营养物质的基础上，培养基还需要满足微生物生长对pH、特殊营养物质以及O2的需求。例如，在培养乳酸杆菌时，需要在培养基中添加维生素；在培养霉菌时，需要将培养基调至酸性；在培养细菌时，需要将培养基调至中性或弱碱性；在培养厌氧微生物时，需要提供无氧的条件。
【小问1详解】
培养基的主要成分：碳源、水、无机盐、生长因子、氮源，需要加入琼脂作为凝固剂，对培养基一般采用高压蒸汽灭菌法进行灭菌。
【小问2详解】
稀释涂布平板法是将样品进行一系列梯度稀释后，获得细胞密度不同的菌悬液，然后涂布到平板上。根据题意，1.0g土壤样品转入99mL无菌水中，制备成菌悬液，经系列梯度稀释后，分别取0.1mL菌悬液涂布在固体培养基上，其中100倍稀释的菌悬液培养后长出了48个酵母菌落，故每克土壤中含酵母菌数为48÷0.1×100×100=4.6×106个。
【小问3详解】
根据题意，欲提高酵母菌产酶能力，可对分离得到的产脂肪酶酵母菌菌株进行射线辐射，该育种方式为诱变育种。为了能筛选出符合要求的产脂肪酶酵母菌突变株，可配制以脂肪为唯一碳源的培养基，将辐射处理的酵母菌涂布在该固体培养基上，形成单菌落；产脂肪酶能力越强的酵母菌，分解利用脂肪的能力越强，菌落生长越好，一段时间后，按照菌落直径大小进行初筛，选取直径较大的菌落即可。
【小问4详解】
据题图分析可知，相同时间内，菌株B的细胞密度高于菌株A，而菌株B的脂肪剩余量低于菌株A的脂肪剩余量，故进行相关研究可选择菌株B，原因是菌株B增殖速度快，单细胞蛋白的产量也高，同时降解脂肪的能力强，净化效果更好。
27. 野生黑芥（染色体数为2A）具有黑腐病的抗性基因，而花椰菜（染色体数为2B）易感染黑腐病菌而患病，用生物工程技术获得抗黑腐病杂种黑芥—花椰菜植株，操作流程如图。请据图回答下列问题：

（1）图中涉及到的生物工程技术是植物体细胞杂交、______。获得原生质体时培养液需要保持较______（低/高）的渗透压，使细胞处于微弱的______状态。过程①PEG的作用是______。一段时间后，加入过量培养基进行稀释的目的是______。
（2）经过①操作后，融合的原生质体只有重新形成______后，才可进行有丝分裂，筛选出融合的杂种细胞，多次分裂形成的小细胞团经过______形成愈伤组织，可通过器官发生途径或______途径再生植株。
（3）若要分析杂种植株的染色体变异类型，应剪取该植株根尖和双亲植株的根尖，制作临时装片，然后在显微镜下观察比较______期染色体的形态和数目。用上述方法培养的该杂种植株含有的染色体数目是______；用黑腐病菌感染杂种植株，筛选出具有______的杂种黑芥—花椰菜植株。
【答案】（1） ①. 植物组织培养 ②. 高 ③. 质壁分离 ④. 诱导原生质体融合 ⑤. 终止原生质体融合
（2） ①. 细胞壁 ②. 脱分化 ③. 体细胞胚发生（途径）
（3） ①. 有丝分裂中（期） ②. 2A+2B ③. 抗黑腐病
【解析】
【分析】分析题图：本题是植物体细胞杂交过程，①是诱导原生质体融合，②是再分化形成再生植株，培养液需要保持一定渗透压能保持原生质体原有的形态。
【小问1详解】
图中涉及到的生物工程技术有植物体细胞杂交、植物组织培养。获得原生质体时，培养液需要保持较高的渗透压，使细胞处于微弱的质壁分离状态。过程①PEG的作用是诱导原生质体融合。一段时间后加入过量培养基进行稀释是为了终止原生质体融合，防止过度融合等不良现象发生。
【小问2详解】
融合的原生质体只有重新形成新的细胞壁后，才表示完成体细胞杂交，杂种细胞才可进行有丝分裂，多次分裂形成的小细胞团经过脱分化形成愈伤组织，可通过体细胞胚发生或器官发生的途径再生植株。
【小问3详解】
观察染色体的形态最好是观察分生组织有丝分裂中期的临时装片，此时期染色体的形态和数目最清晰，因此要分析杂种植株的染色体变异类型，应剪取该植株根尖和双亲植株的根尖，制成临时装片，然后在显微镜下观察比较有丝分裂中期染色体的形态和数目。用上述方法培养的该杂种植株含有的染色体数目是2A+2B，染色体组有4组，用黑腐病菌感染杂种植株，筛选出具有抗黑腐病杂种黑芥-花椰菜的杂种植株。
28. 长期以来，优良种畜的繁殖速度始终是限制畜牧养殖业发展的瓶颈，近年来发展起来的细胞工程和胚胎工程技术为优良种畜的快速繁殖带来了无限生机，请据图完成下列问题：

（1）超数排卵技术的处理措施是对供体母牛注射______。从供体公牛中采集成熟精液放入培养液中培养，使精子达到______状态。
（2）图中标号1为______，它将来可发育为胚胎。
（3）动物的早期胚胎移植到同种且______与供体相同的动物体内，使之继续发育为新个体的技术叫做胚胎移植。若对早期胚胎进行______，可提高胚胎的利用率，从而获得更多同卵多仔后代。
（4）试管牛的性别为______。克隆羊多莉的遗传物质来自______。
（5）试管牛的快速繁殖和绵羊多莉繁殖的生殖方式不同之处在于______。
【答案】（1） ①. 促性腺激素 ②. 获能
（2）内细胞团 （3） ①. 生理状态 ②. 胚胎分割
（4） ①. 雌性或雄性（不能确定） ②. 白面绵羊和黑面绵羊
（5）试管牛属于有性生殖，多莉属于无性生殖
【解析】
【分析】1.试管牛用到的技术手段有动物细胞培养、体外受精、体外胚胎培养和胚胎移植，克隆羊用到的技术有动物细胞培养、细胞核移植、早期胚胎培养和胚胎移植。
2.图2中A是受精卵分裂形成的2细胞，B是4细胞，C是8细胞，D是桑椹胚时期，E是囊胚。
【小问1详解】
超数排卵技术通常是对供体母牛注射促性腺激素，促性腺激素可以促进母牛排出多个卵子。从供体公牛中采集成熟精液放入培养液中培养，使精子达到获能状态，只有获能后的精子才具备受精能力。
【小问2详解】
图中标号 1 为内细胞团，内细胞团细胞具有发育的全能性，它将来可发育为胚胎。
【小问3详解】
动物的早期胚胎移植到同种且生理状态与供体相同的动物体内，这样可以为胚胎的发育提供适宜的环境，使之继续发育为新个体，这就是胚胎移植技术。若对早期胚胎进行胚胎分割，将一个胚胎分割成多个部分，每个部分都有可能发育成一个新个体，可提高胚胎的利用率，从而获得更多同卵多仔后代。
【小问4详解】
试管牛是通过有性生殖产生的，其性别由精子和卵细胞结合时的性染色体决定，所以试管牛的性别为雌性或雄性。克隆羊多莉是由白面绵羊提供的乳腺细胞核和黑面绵羊提供的去核卵细胞重组后发育而来的，其遗传物质主要来自提供细胞核的白面绵羊，细胞质遗传物质可来自黑面绵羊。
【小问5详解】
试管牛是由精子和卵细胞结合形成受精卵，再发育成新个体，属于有性生殖；而绵羊多莉是通过核移植技术，将白面绵羊的乳腺细胞核移植到去核卵细胞中发育而来的，属于无性生殖。所以试管牛的快速繁殖和绵羊多莉繁殖的生殖方式不同之处在于试管牛是有性生殖，绵羊多莉是无性生殖。
29. 特异性抗体是指一个抗体分子可以与两个不同抗原或同一抗原的两个不同抗原表位相结合，目前最常利用杂交瘤杂交法来制备。长春花是原产于非洲东海岸的野生花卉，其所含的长春碱具有良好的抗肿瘤作用。下图1是某双特异性抗体作用图，图2是科研人员通过杂交-杂交瘤细胞技术（免疫的B淋巴细胞和杂交瘤细胞杂交技术）生产能同时识别癌胚抗原和长春碱的双特异性单克隆抗体的部分过程。请分析回答下列问题：
（1）图2中过程②选用的骨髓瘤细胞______（选填“能”或“不能”）在HAT培养基上生长。
（2）对③筛选出的杂交瘤细胞，还需进行______和______才能筛选出足够量的既能无限增殖又能产生特异性抗体的杂交瘤细胞。与传统血清抗体相比，单克隆抗体最主要的优点是______（答出两点）。
（3）图2中①步骤注射癌胚抗原的目的是______。与植物体细胞杂交相比，诱导动物细胞融合特有的方法是用______诱导融合。体外培养杂交瘤细胞从培养基的成分来看，由于人们对细胞所需营养物质还没有完全分析清楚还需要加入______，将培养基置于CO2培养箱中，其中CO2的主要作用是______。
（4）与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小，原因是______。
【答案】（1）不能 （2） ①. （专一抗体检测）抗原抗体检测 ②. 克隆化培养（顺序可变） ③. 特异性强、灵敏度高、纯度高，可大量制备（答出其中两点）
（3） ①. 刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞 ②. （灭活的仙台）病毒 ③. 血清 ④. 维持培养液的pH
（4）双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞；避免抗癌药物在消灭肿瘤细胞的同时对人体正常细胞的损伤
【解析】
【分析】根据题图分析：双特异性抗体制备流程为，先给小鼠注射特定癌胚抗原使之发生免疫反应，然后获取已经免疫的B淋巴细胞。诱导免疫的B细胞和骨髓瘤细胞融合，利用选择培养基筛选出杂交瘤细胞；再把单克隆杂交瘤细胞与经注射长春碱后从小鼠中获得的免疫的B淋巴细胞再杂交，得到单克隆杂交—杂交瘤细胞，再培养该细胞，最终生产出能同时识别癌胚抗原和长春碱（一种抗癌药物）的双特异性单克隆抗体。
【小问1详解】
B淋巴细胞和骨髓瘤细胞在HAT培养基上不能生长，而骨髓瘤细胞与B淋巴细胞之间形成的融合细胞能在HAT培养基上正常生活，并无限增殖，据此可以筛选出杂交瘤细胞。
【小问2详解】
③在HAT培养基上筛选出的杂交瘤细胞，产生的抗体可能不是所需要的抗体，因此还需要用抗原（决定簇）进行抗体检测，筛选出的产生特定抗体的杂交瘤细胞进行克隆化培养，可以使其数量大增；传统血清抗体是一群混合物，其中抗体种类很多，纯度较低，而单克隆抗体特异性强、灵敏度高、可大量制备。
【小问3详解】
图中步骤①注射癌胚抗原，是为了刺激小鼠产生相应的B淋巴细胞。 ②诱导动物细胞融合特有的方法是用灭活的（仙台）病毒诱导融合。 ③由于人们对细胞所需营养物质还没有完全分析清楚，所以在体外培养杂交瘤细胞的培养基中需要加入血清，补充未知的营养成分。 ④将培养基置于CO2培养箱中，CO2的主要作用是维持培养液的pH。
【小问4详解】
双特异性单克隆抗体能将抗癌药物定向带到癌细胞所在位置，在原位杀死癌细胞；避免抗癌药物在消灭肿瘤细胞的同时对人体正常细胞的损伤，因此与直接使用长春碱相比，将长春碱与双特异性单克隆抗体结合后给药，对人体的副作用更小。
30. 凝乳酶是食品生产中常用的凝结剂，科研人员从动物体内获得了凝乳酶mRNA，拟利用大肠杆菌通过基因工程生产凝乳酶。据图回答下列问题：
（1）利用凝乳酶mRNA，在______酶的作用下，可以得到凝乳酶的cDNA，进一步通过PCR技术扩增，扩增的原料是______。下列对引物的叙述错误的是______。
A.两个引物之间不应有互补性
B.引物自身不存在互补序列
C.引物与模板链复制起始端碱基互补
D.引物的碱基包含A、G、C、U四种
（2）图1和图2是选用的质粒及几种相关限制酶的识别位点，在构建基因表达载体时，最好选用的限制酶是______，这样选择的优点是______（答出两点）。为在凝乳酶基因两侧加上相应的酶切位点，设计引物时需在引物前添加相应酶切位点，PCR过程中至少复制______次可以得到含所需酶切位点的凝乳酶基因。
（3）将构建的重组质粒导入大肠杆菌，需要用钙离子处理，使大肠杆菌处于______状态。
（4）将在添加了青霉素的培养基中得到的4个大肠杆菌菌落进行进一步检测，检测结果如图3所示，1~4号菌落中需要舍弃的是1号和______。其中舍弃1号菌落的理由是______。
【答案】（1） ①. 逆转录 ②. dNTP（四种脱氧核苷三磷酸） ③. D
（2） ①. EcR Ⅰ、Bgl Ⅱ或EcR Ⅰ、BamH Ⅰ ②. 避免标记基因被破坏、防止质粒自身环化和目的基因的反向连接 ③. 3##三
（3）感受态（容易吸收外源DNA分子的状态）
（4） ①. 2号、3号 ②. 目的基因未导入
【解析】
【分析】基因工程技术的基本步骤：
（1）目的基因的获取：方法有从基因文库中获取、利用PCR技术扩增和人工合成。
（2）基因表达载体的构建：是基因工程的核心步骤，基因表达载体包括目的基因、启动子、终止子和标记基因等。
（3）将目的基因导入受体细胞：根据受体细胞不同，导入的方法也不一样。
（4）目的基因的检测与鉴定：分子水平上的检测和个体水平上的鉴定。
【小问1详解】
利用凝乳酶mRNA合成cDNA的过程为逆转录过程，需要逆转录酶的作用，PCR技术扩增的原料是dNTP（四种脱氧核苷三磷酸）。
A、两个引物之间不应有互补性，否则会影响引物与模板链的结合，A正确；
B、引物自身不存在互补序列，防止自身折叠等影响其功能，B正确；
C、引物与模板链复制起始端碱基互补，才能引导DNA的合成，C正确；
D、引物是DNA片段，其碱基包含A、G、C、T四种，不包含U，U是RNA特有的碱基，D错误。
故选D
【小问2详解】
首先坚持的原则是不能破坏标记基因，所以首先排除EcR V，第二要防止质粒自身环化和目的基因的反向连接（确保目的基因与质粒正向连接），所以要选择两种限制性核酸内切酶，产生不同的黏性末端，防止其自连，且由图可知Bgl Ⅱ和BamH Ⅰ会产生相同的黏性末端，故在构建基因表达载体时，最好选用的限制酶是EcR Ⅰ、Bgl Ⅱ或EcR Ⅰ、BamH Ⅰ。PCR扩增的第一个循环扩增出来的新片段很长，第二个循环以新的长片段为模板进行，但新片段的一端是引物开头的，所以第二个循环得到的片段就是我们需要的长度，但只是一条链，所以还不能分离出目的基因，第三个循环，当以第二个循环得到的新片段为模板时，因为这个片段的长度就是需要扩增的长度，当第三个循环完成时，这个片段是需要的长度，且是双链DNA，故PCR过程中至少复制三次可以得到含所需酶切位点的凝乳酶基因。
【小问3详解】
钙离子处理大肠杆菌可以使大肠杆菌细胞膜的通透性增大，使大肠杆菌处于感受态（容易吸收外源DNA分子的状态）。
【小问4详解】
首先在青霉素培养基中得到的菌落，则都含有青霉素抗性基因，但1号进行DNA-DNA分子杂交没有结果，则说明1号菌落目的基因未导入，应舍去， 2号菌落含有目的基因，也可以正常转录，但翻译生成的蛋白质无法与受体结合，则舍弃， 3号菌落虽然含有目的基因，但不能与RNA进行杂交，说明该目的基因不能正常转录，应舍弃。