2025年高考第三次模拟考试卷：生物（全国卷）（解析版）

这是一份2025年高考第三次模拟考试卷：生物（全国卷）（解析版），共13页。试卷主要包含了果蝇的卷翅等内容，欢迎下载使用。
注意事项：
1．答卷前，考生务必将自己的姓名、准考证号等填写在答题卡和试卷指定位置上。
2．回答选择题时，选出每小题答案后，用铅笔把答题卡上对应题目的答案标号涂黑。如需改动，用橡皮擦干净后，再选涂其他答案标号。回答非选择题时，将答案写在答题卡上。写在本试卷上无效。
3．考试结束后，将本试卷和答题卡一并交回
选择题：本题共6小题，每小题6分，共36分。在每小题给出的四个选项中，只有一项符合题目要求。
1．下列有关细胞中化合物的叙述中，不正确的是（ ）
A．几丁质广泛存在于所有动物细胞中，可用于制作包装纸和食品添加剂
B．脂肪、肝糖原、淀粉均为细胞内储存能量的物质
C．构成细胞的任何一种化学元素都能在无机自然界找到
D．脂质存在于所有细胞中，是组成细胞的重要化合物
【答案】A
【解析】1、生物体总是和外界环境进行着物质交换，细胞生命活动所需要的物质，归根结底是从无机自然界中获取的。因此，组成细胞的化学元素，在无机自然界中都能够找到，没有一种化学元素为细胞所特有。但是，细胞中各种元素的相对含量与无机自然界的大不相同。2、几丁质也是一种多糖，又称为壳多糖，广泛存在于甲壳类动物和昆虫的外骨骼中。几丁质及其衍生物在医药、化工等方面有广泛的用途。例如，几丁质能与溶液中的重金属离子有效结合，因此可用于废水处理；可以用于制作食品的包装纸和食品添加剂；可以用于制作人造皮肤等。3、脂肪是脂质的一种，脂质存在于所有细胞中，是组成细胞和生物体的重要有机化合物。与糖类相似，组成脂质的化学元素主要是C、H、O，有些脂质还含有P和N。所不同的是脂质分子中氧的含量远远少于糖类，而氢的含量更多。常见的脂质有脂肪、磷脂和固醇等，它们的分子结构差异很大，通常都不溶于水，而溶于脂溶性有机溶剂，如丙酮、氯仿、乙醚等。A、几丁质也是一种多糖，又称为壳多糖，广泛存在于甲壳类动物和昆虫的外骨骼中，A错误；B、脂肪、肝糖原、淀粉均为细胞内储存能量的物质，其中脂肪能够存在于动物和植物细胞中，肝糖原存在动物细胞中，淀粉存在于植物细胞中，B正确；C、细胞生命活动所需要的物质，归根结底是从无机自然界中获取的。因此，组成细胞的化学元素，在无机自然界中都能够找到，没有一种化学元素为细胞所特有，C正确；
D、脂质中的磷脂是膜结构的重要组成成分，故脂质存在于所有细胞中，是组成细胞的重要化合物，D正确。
故选A。
2．水稻在干旱时保卫细胞通过失水而使气孔关闭，从而降低蒸腾作用。研究发现，气孔关闭的过程中，保卫细胞膜上向外运输K+的转运蛋白活性增强。若抑制K+转运蛋白磷酸化，则气孔无法关闭。下列有关叙述，错误的是（ ）
A．气孔关闭是因为保卫细胞向外运输K+B．K+转运蛋白发生磷酸化可促进气孔关闭
C．气孔关闭会使光合作用速率降低D．保卫细胞失水只能通过自由扩散方式
【答案】D
【解析】题干分析，气孔关闭过程中，向外运输K+的转运蛋白活性增强，这过程涉转运蛋白的磷酸化过程，若抑制K+转运蛋白磷酸化，则K+外流受阻，进而导致气孔无法关闭。A、由题干信息“气孔关闭的过程中，保卫细胞膜上向外运输K+的转运蛋白活性增强。若抑制K+转运蛋白磷酸化，则气孔无法关闭”可知，气孔关闭是因为保卫细胞向外运输K+，A正确；B、K+转运蛋白发生磷酸化，其活性增强，促进K+的外流，进而促进气孔关闭，B正确；C、气孔关闭会导致CO2的吸收减少，进而导致光合作用速率降低，C正确；D、保卫细胞失水既有自由扩散方式，也有协助扩散方式，D错误。
3．由于饲养员的长期投喂，大熊猫一听到该饲养员的脚步声就会分泌唾液。下列相关叙述错误的是（ ）
A．饲养员的脚步声引起大熊猫分泌唾液属于条件反射
B．条件反射和非条件反射有利于大熊猫对环境的适应
C．大熊猫吃竹笋时引起唾液分泌的过程需要大脑皮层的参与
D．园区内其他饲养员的脚步声可能不会引起大熊猫分泌唾液
【答案】C
【解析】1、反射一般可以分为两大类：非条件反射和条件反射。非条件反射是指人生来就有的先天性反射，是一种比较低级的神经活动，由大脑皮层以下的神经中枢（如脑干、脊髓）参与即可完成；条件反射是人出生以后在生活过程中逐渐形成的后天性反射，是在非条件反射的基础上，在大脑皮层参与下完成的，是高级神经活动的基本方式。2、饲养员长期给大熊猫喂食，大熊猫听到饲养员的脚步声就分泌唾液，属于条件反射，条件反射是高级神经活动的基本方式，它是在大脑皮层的参与下形成的。A、饲养员的脚步声引起大熊猫分泌唾液需要大脑皮层参与，属于条件反射，A正确；B、条件反射和非条件反射有利于大熊猫对环境的适应，条件反射使机体具有更强的预见性、灵活性和适应性，大大提高了动物应对复杂环境变化的能力，B正确；C、大熊猫吃竹笋时引起唾液分泌的过程属于非条件反射，是生来就有的，不需要大脑皮层的参与，C错误；D、园区内其他饲养员的脚步声不属于条件刺激，可能不会引起大熊猫分泌唾液，D正确。
4．下图是一个农业生态系统模式图，下列有关说法正确的是（ ）
A．流经该生态系统的总能量为农作物固定的太阳能
B．该生态系统含有两条食物链，人占有两个营养级
C．人产生的粪肥中的物质和能量可被农作物再利用
D．该生态系统的设计遵循生态工程的循环原理
【答案】D
【解析】生态系统可分为自然生态系统和人工生态系统，自然生态系统中能量输入来自生产者的固定，而人工生态系统的能量输入来自生产者的固定和人为投入部分。一个完整的生态系统中包含生产者、消费者、分解者和非生物的物质和能量。A、农业生态系统是人工生态系统，流经该生态系统的总能量为农作物固定的太阳能和人工添加饲料中的能量，A错误；B、无论家禽，还是家畜，都代表一群生物，所以无法判断该生态系统中含有几条食物链，B错误；C、人产生的粪肥中的物质，经微生物分解后，可以被农作物再利用，能量不能，C错误；D、该生态系统的设计，实现了不断循环，使前一环节产生的废物尽可能地被后一环节利用，减少了整个环节“废物”的产生，因而体现了生态工程中的循环原理，D正确。
5．果蝇的卷翅（A）对正常翅（a）为显性，灰身（B）对黑身（b）为显性，这两对基因均位于常染色体上。纯合正常翅灰身雌果蝇和纯合正常翅黑身雄果蝇交配，所得F1中有390只正常翅灰身果蝇，同时由于基因突变，出现了1只卷翅灰身雌果蝇和1只卷翅灰身雄果蝇。让F1中的卷翅灰身雌雄果蝇相互交配，产生的F2中卷翅灰身∶正常翅灰身∶卷翅黑身∶正常翅黑身＝6∶3∶2∶1，下列推断不合理的是（ ）
A．亲本中雌雄果蝇的基因型分别是 aaBB、aabb
B．F1的基因突变是在受精作用过程中发生的
C．F1的卷翅灰身果蝇的基因型都是AaBb
D．F1产生的雌雄配子结合时，基因A纯合致死
【答案】B
【解析】根据题干信息“F1卷翅灰身果蝇雄果蝇相互交配产生F2，F2代中卷翅灰身∶正常翅灰身∶卷翅黑身∶正常翅黑身”，说明卷翅对正常翅为显性，灰身对黑身是显性。F2代中，“6：3：2：1”是“9：3：3：1”的特殊情况，说明卷翅具有纯合致死效应，且两对等位基因位于两对同源染色体上，遵循基因的自由组合定律。
A、依据题干信息“果蝇的卷翅（A）对正常翅（a）为显性，灰身（B）对黑身（b）为显性”，则亲本中的纯合正常翅灰身雌果蝇和纯合正常翅黑身雄果蝇的基因型分别是aaBB、aabb，A正确；B、F1的基因突变若是在受精过程中发生，则不可能出现1只卷翅灰身雌果蝇和1只卷翅灰身雄果蝇，B错误；C、F1的卷灰身果蝇的基因型是AaBb，C正确；D、根据F2中卷翅灰身∶正常翅灰身∶卷翅黑身∶正常翅黑身＝6∶3∶2∶1可知，卷翅基因A具有显性纯合致死效应，D正确。
6．兴趣小组为探究某细菌在不同条件下的种群数量变化，共设置了四组实验，a、b、c三组分别每3h、12h和24h更新培养液，d为对照组，其他培养条件相同，结果如图所示。下列叙述正确的是（ ）
A．用细菌计数板进行计数时，先在计数室滴加培养液再盖上盖玻片
B．随时间推移，a组细菌将持续呈“J”形增长
C．若增大细菌初始接种量，d组的环境容纳量会增大
D．营养物质和有害代谢产物是影响细菌种群数量变化的密度制约因素
【答案】D
【解析】分析题意，本实验目的是探究某细菌在不同条件下的种群数量变化，实验的自变量是培养时间和培养液的更新时间，因变量是种群数量，据此分析作答。
A、细菌计数板的使用方法是先盖上盖玻片，然后在盖玻片边缘滴加培养液，利用毛细作用使培养液进入计数室，A错误；B、a组每3小时更新培养液，意味着营养物质供应充足，细菌在初期可能会呈“J”形增长。但随着时间推移，即使营养物质充足，细菌的种群数量也会受到空间、代谢产物积累等因素的限制，最终会趋于稳定，不会持续呈“J”形增长，B错误；C、环境容纳量（K值）是由环境资源（如营养物质、空间等）决定的，与初始接种量无关。增大初始接种量可能会加快种群达到环境容纳量的速度，但不会改变环境容纳量本身，C错误；D、密度制约因素是影响程度与种群密度有密切关系的因素，营养物质是细菌生长所必需的，随着种群密度的增加，营养物质会逐渐耗尽，限制种群增长。有害代谢产物会随着种群密度的增加而积累，抑制细菌生长。因此，营养物质和有害代谢产物都是密度制约因素，D正确。
二、非选择题（共5题，共54分）。
31．睡莲科植物莲（也称莲藕）的花称荷花、种子称莲子、叶称荷叶、根状茎称藕，均既可食用也可药用，是我国广泛栽培的重要经济作物。请回答下列相关问题：
(1)荷叶制成的荷叶茶具有降血压、降血脂等多种功效，《本草纲目》等古今药（食）学典籍均有记载。荷叶的这些功效是由于其叶肉细胞中含有生物碱、黄酮甙等成分，这些物质在细胞中的主要储存场所是 。莲藕切开后会变为褐色，这是由于细胞内的多酚氧化酶催化单宁中的酚类产生醌的聚合物形成褐色素引起的。有经验的厨师将切好的藕片用开水烫过后存放，可减轻褐变的程度，
其中的科学道理是 。
(2)若荷塘中的Mg2+供应不足，会引起减产。研究人员在实验室用完全培养液连续培养莲一段时间后，发现培养液中的Mg2+的浓度反而较开始时升高了，其合理的解释是 。
(3)将莲培养在密闭的透明玻璃罩内，培养液中加入H218O，18O也会出现在淀粉中，18O转移的最简路径是H218O→ →淀粉。
(4)如图是将莲培养在不同CO2浓度下，其光合作用强度受光照强度影响的曲线，图中a、b、c三点中叶绿体中C3的含量最高的是 ，理由是

。
【答案】(1) 液泡 高温破坏了多酚氧化酶的空间结构，抑制酚类的氧化
(2)培养过程中莲吸收水的速率大于吸收Mg2+的速率
(3)C18O2（→C3）
(4) a 与c点相比，a点CO2浓度高生成的C3浓度也相应较高，光照强度相同，（光反应供应的ATP和NADPH相同，）对C3的消耗速率相同，a点高于c点；与b点相比，CO2浓度相同生成的C3浓度也相同，b点光照强度较高，（光反应供应的ATP和NADPH较多，）对C3的消耗速率较高，a点高于b点
【解析】光合作用的光反应是水在光下分解成[H]和O2，ADP和Pi合成ATP，暗反应是CO2固定和C3还原，经过一系列反应，产生糖类。（1）荷叶叶肉细胞中的生物碱、黄酮甙等成分主要储存在细胞的液泡中。由于细胞内的多酚氧化酶催化单宁中的酚类产生醌的聚合物形成褐色素，所以为减轻褐变的程度，有经验的厨师会将切好的藕片用开水烫过后存放，因为高温会破坏多酚氧化酶的空间结构，抑制酚类的氧化，减少褐色素的形成。
（2）培养过程中莲吸收水的速率大于吸收Mg2+的速率，所以培养莲一段时间后会发现培养液中的Mg2+的浓度反而较开始时升高了。（3）由光合作用过程可知，将莲处于H218O的环境，H218O进入有氧呼吸的第二阶段中生成C18O2，C18O2形参与光合作用的暗反应阶段被C5固定生成C3，故18O转移的路径为H218O→C18O2（→C3）。（4）分析坐标图可知与c点相比，a点CO2浓度高生成的C3浓度也相应较高，光照强度相同，（光反应供应的ATP和NADPH相同，）对C3的消耗速率相同，a点高于c点；与b点相比，CO2浓度相同生成的C3浓度也相同，b点光照强度较高，（光反应供应的ATP和NADPH较多，）对C3的消耗速率较高，a点高于b点，所以a、b、c三点中叶绿体中C3的含量最高的是a，
32．研究发现，人类感染EB病毒后可能会诱发一种名为“多发性硬化”的中枢神经系统疾病。在多发性硬化症患者中，免疫系统错误地将神经纤维的髓鞘视为外来物质并加以破坏。其部分机制如图所示。回答下列问题：
(1)多发性硬化患者的免疫 功能发生异常，这属于免疫失调中的 病。
(2)图中无法特异性识别抗原的免疫细胞有 ，推测其直接原因可能是 。
(3)研究发现，EB病毒编码的蛋白质与中枢神经系统髓鞘脂碱性蛋白（MBP）结构相似，推测多发性硬化患者体内与EB病毒抗体结合的抗原可能有 和 ；
该患者的CD8+T细胞可以特异性识别并结合MBP，引起髓鞘细胞裂解，据此推测CD8+T细胞属于 细胞，该细胞活化的信号是 。
【答案】(1) 自稳 自身免疫
(2) 树突状细胞和浆细胞 细胞表面没有特异性识别抗原的受体
(3) EB 病毒编码的蛋白质 中枢神经系统髓鞘脂碱性蛋白（MBP） 细胞毒性T 靶细胞膜表面的某些分子发生变化被细胞毒性T细胞识别以及辅助性T细胞分泌的细胞因子的刺激
【解析】免疫系统具有免疫防御、免疫自稳和免疫监视功能。免疫自稳是指机体清除衰老或损伤的细胞，进行自身调节，维持内环境稳态的功能。自身免疫病是指免疫系统异常敏感、反应过度，“敌我不分” 地将自身物质当作外来异物进行攻击而引起的疾病
（1）免疫系统具有免疫防御、免疫自稳和免疫监视功能。免疫自稳是指机体清除衰老或损伤的细胞，进行自身调节，维持内环境稳态的功能。在多发性硬化症患者中，免疫系统错误地将神经纤维的髓鞘视为外来物质并加以破坏，说明免疫自稳功能发生异常。 自身免疫病是指免疫系统异常敏感、反应过度，“敌我不分” 地将自身物质当作外来异物进行攻击而引起的疾病。多发性硬化症患者免疫系统攻击自身的神经纤维髓鞘，属于自身免疫病。
（2）图中的免疫细胞有树突状细胞、 CD4+ T细胞、 CD4+Th2细胞、 CD4+Th1 细胞、 CD8+T细胞和浆细胞。其中树突状细胞能识别抗原，但不具有特异性；浆细胞不能识别抗原。所以无法特异性识别抗原的免疫细胞有树突状细胞和浆细胞。细胞识别抗原依靠细胞表面的特异性受体，树突状细胞和浆细胞无法特异性识别抗原，直接原因可能是细胞表面没有特异性识别抗原的受体。
（3）因为EB病毒编码的蛋白质与中枢神经系统髓鞘脂碱性蛋白（MBP）结构相似，所以多发性硬化患者体内与EB病毒抗体结合的抗原可能有EB病毒编码的蛋白质和中枢神经系统髓鞘脂碱性蛋白（MBP）。CD8+T细胞可以特异性识别并结合MBP，引起髓鞘细胞裂解，说明CD8+T细胞属于细胞毒性T细胞。细胞毒性T细胞活化需要两个信号，一是被病原体感染的宿主细胞（靶细胞）膜表面的某些分子发生变化，细胞毒性T细胞识别变化的信号；二是辅助性T细胞分泌的细胞因子的刺激。
33．“作物—蚯蚓”种养模式是一种重要的菜田生态模式。某农科所在2019～2021年连续3年调查“花菜—蚯蚓”种养田杂草物种数，调查时挑选5块地势平坦、大小接近（约3000m2）的田地开展杂草调查。于花菜移栽后45d左右，采用随机取样计数法，每块田调查10个点，每个点面积1m2，记录杂草物种数，得到图1所示结果。图2为生态系统的物质循环部分示意图，甲、乙、丙、丁表示生态系统的相关成分。回答下列问题：
调查“花菜—蚯蚓”种养田杂草物种数时，实验组为“ ，对照组为 ，在实验期间，不同田地栽培和管理措施相同， （填“使用”或“不使用”）除草剂。调查中发现，“花菜—蚯蚓”种养田中的蚯蚓在土壤中随机分布，这 （填“属于”或“不属于”）群落的水平结构。
(2)调查的“花菜—蚯蚓”种养田就是一个生态系统，其中的蚯蚓以腐烂的有机物为食，从生态系统组成成分看，“花菜—蚯蚓”种养田中的蚯蚓对应图2中的 ，它们在生态系统中的作用有 。图2要表示完整的碳循环过程，还应补充的两个重要过程是 （用文字和箭头的形式表示）。
(3)从图1调查结果看，蚯蚓对花菜田间杂草物种数的影响是 。蚯蚓在花菜田间生活过程中，同化的能量一部分用于自身 ，一部分在进行 的过程中以热能形式散失，该过程也促进了生态系统的碳循环。
【答案】(1) 菜花-蚯蚓种养田 （未接种蚯蚓的）花菜单一种植田 不使用 不属于
(2) 丙 将动植物遗体和动物的排遗物分解成无机物 大气CO2→丁、甲→丙
(3) 降低了田间杂草物种数 生长、发育和繁殖等生命活动 呼吸作用
【解析】分析图1：与花菜单一种植田这一组相比，“花菜一蚯蚓”种养田这一组的杂草物种数更少。分析图2：该图为生态系统物质循环的部分示意图，甲为初级消费者，乙为次级消费者，丙为分解者，丁为生产者。
（1）根据图1中有“花菜-蚯蚓”种养田和花菜单一种植田这两个组别可知，对照组为（未接种蚯蚓的）花菜单一种植田，实验组为菜花-蚯蚓种养田。实验的目的是调查“花菜-蚯蚓”种养田中杂草物种数，因此实验期间不能使用除草剂，避免影响植物的生长。蚯蚓是一个物种，不属于群落，因此蚯蚓在土壤中随机分布，这不属于群落的水平结构。
（2）因为蚯蚓以腐烂的有机物为食，所以此时蚯蚓属于分解者，对应图2中的丙，蚯蚓在生态系统中的作用为将动植物遗体和动物的排遗物分解成无机物。据图分析可知，丁为生产者，甲和乙为消费者，丙为分解者，该图中缺少大气CO2→丁，表示光合作用的箭头，还缺少甲→丙，表示消费者甲的遗体残骸等被分解者利用的箭头。
（3）由图1可知，与花菜单一种植田这一组相比，“花菜-蚯蚓”种养田这一组的杂草物种数更少，说明蚯蚓对花菜田间杂草的影响是降低了田间杂草物种数。摄入量等于粪便量加上同化量，其中同化的能量一部分用于自身的生长、发育和繁殖等生命活动，一部分通过呼吸作用以热能的形式散失。
34．番茄花为两性花，开花后受粉。基因型为mm的植株表现为小花、雄性不育，基因型为MM、Mm的植株表现为大花、育性正常。番茄R/r基因同时控制果实的成熟时期和果实颜色。选用大花晚熟红果植株与小花正常熟黄果植株做亲本杂交，结果如表：
请回答以下问题：
(1)据实验结果分析可知，R/r与M/m基因在染色体上的位置关系是 。
(2)根据实验结果可知，正常熟对晚熟为 （填“显性”或“隐性”）性状，F2中大花晚熟红果基因型有 种。
(3)若使F2中全部大花黄果与全部小花红果个体随机交配，则后代中黄果个体占比为 。
(4)四倍体番茄的维生素C含量几乎是二倍体番茄的两倍，有一定的经济价值。请写出两种以二倍体番茄为材料获得四倍体番茄的方法：
。
(5)科研工作者以二倍体番茄为父本，以四倍体番茄为母本培育了3株三倍体无子番茄，用核酸探针对亲本及子代进行PCR及凝胶电泳，结果如图所示。母本产生配子时同源染色体两两配对后移向细胞两极，结合电泳结果可知，母本基因型为 ，理论上上述亲本杂交所得子代为纯合子的概率是 。
【答案】(1)位于两对同源染色体上（或位于非同源染色体上）
(2) 隐性 4
(3)2/3
(4)方法一：利用低温或秋水仙素处理二倍体番茄，使其减数分裂错误，形成含有两个染色体组的配子，这样的雌雄配子结合后发育成的个体即为四倍体。
方法二：利用秋水仙素或低温诱导等方法处理二倍体番茄的幼苗或萌发的种子，使体细胞在进行有丝分裂时，染色体只复制未分离，即可获得四倍体番茄。
方法三：将两个二倍体番茄的原生质体在一定条件下诱导融合，并将融合所得细胞培育为四倍体番茄植株。
(5) B1B1B2b 1/6
【解析】基因自由组合定律的实质是：位于非同源染色体上的非等位基因的分离或自由组合是互不干扰的；在减数分裂过程中，同源染色体上的等位基因彼此分离的同时，非同源染色体上的非等位基因自由组合。
（1）根据F2中9∶3∶3∶1的数量比可知，R/r与M/m基因应遵循基因的自由组合定律，两对等位基因分别位于两对同源染色体上。
（2）F2中正常熟∶晚熟=1∶3，由此判定正常熟为隐性性状，F2中大花晚熟红果为双显类型，其基因型为MMRR、MMRr、MmRR、MmRr共4种。
（3）F2中全部大花黄果基因型及比例为MMrr∶Mmrr=1∶2，小花红果个体基因型及比例为mmRR∶mmRr=1∶2，由于mm个体雄性不育，因此在随机交配中，小花红果个体只能做母本，大花黄果个体既能做父本也能做母本，该群体中雌配子的比例为1/3Mr、1/3mr、1/3mR，雄配子的比例为2/3Mr、1/3mr，由此可列出棋盘：
，则后代中黄果个体占比为6/9=2/3。
（4）四倍体番茄的维生素C含量几乎是二倍体番茄的两倍，有一定的经济价值，因此需要获得四倍体，用二倍体番茄为材料获得四倍体番茄的方法有用低温诱导或秋水仙素处理直接获得，也可通过获得染色体数目加倍的配子通过受精获得，具体方法如下：
方法一：利用低温或秋水仙素处理二倍体番茄，使其减数分裂错误，形成含有两个染色体组的配子，这样的雌雄配子结合后发育成的个体即为四倍体。
方法二：利用秋水仙素或低温诱导等方法处理二倍体番茄的幼苗或萌发的种子，使体细胞在进行有丝分裂时，染色体只复制未分离，即可获得四倍体番茄。
方法三：将两个二倍体番茄的原生质体在一定条件下诱导融合，并将融合所得细胞培育为四倍体番茄植株。。
（5）根据电泳结果可知，父本的基因型为B1B1，子代2号的基因型为B1B1B1，说明母本能产生B1B1的卵细胞，再结合母本电泳结果，可判定母本的基因型为B1B1B2b。母本产生的配子种类及比例为B1B1∶B2b∶B1B2∶B1b=1∶1∶2∶2，因此理论上子代中出现纯合子的概率是1/6.
35．四甲基吡嗪（TTMP）是枯草芽孢杆菌的一种代谢产物，是影响白酒风味的重要物质。bdhA基因的表达产物是降低TTMP含量的关键酶，研究人员欲通过敲除枯草芽孢杆菌的bdhA基因提高TTMP产量。回答下列问题：
(1)为获取枯草芽孢杆菌的纯净培养物E，可取少量枯草芽孢杆菌菌液接种到牛肉膏蛋白胨 （填“固体”或“液体”）培养基中，蛋白胨提供的主要营养是 。
(2)利用下图中的3对引物扩增出bdhA基因的上、下游片段和cat基因，将3种扩增产物和质粒1分别酶切后进行连接以获得质粒2。为使cat基因位于质粒2的上、下游片段之间，在设计引物5、6时，应在引物的 端分别加入限制酶 和 的识别序列。
(3)用质粒2转化菌株E时，可用 处理菌株E以提高转化的成功率。质粒2与菌株E的DNA发生同源重组（质粒2中的上、下游片段分别与E中bdhA基因上、下游片段配对，并发生交换）使E的bdhA基因替换为cat基因。将转化处理的枯草芽孢杆菌置于含有 的培养基中以筛选出目的菌株E-。
(4)为检验E-的bdhA基因被成功敲除，以E-的基因组DNA为模板，选用引物 进行PCR，预期扩增只获得一种大小为 bp的DNA片段。对于PCR产物电泳结果符合预期的DNA片段，通常还需进一步通过基因测序确认，原因是 。为研究敲除bdhA基因是否影响菌株生长，可用接种环挑取E⁻后直接用 法进行接种，观察到菌落大小和形态与菌株E一致。
【答案】(1) 固体 碳源、氮源、维生素
(2) 5' BamHI XbaI
(3) CaCl2 氯霉素
(4) 1和4 1540 可能存在非特异性扩增 平板划线
【解析】基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达。其中，基因表达载体的构建是基因工程的核心。
（1）取少量枯草芽孢杆菌菌液接种到牛肉膏蛋白胨固体培养基上，挑选单菌落，获得纯培养物；蛋白胨是将肉、酪素或明胶用酸或蛋白酶水解后干燥而成的外观呈淡黄色的粉剂，能为微生物提供碳源、氮源、维生素。
（2）为了在目的基因两侧加上限制酶识别序列，应在引物的5，端加上限制酶序列；结合图示可知，引物5、6扩增出的cat基因，同源替换到引物1、3扩增出的基因，需要相同的限制酶，引物1、3的两侧加入限制酶BamHI、XbaI的识别序列，因此引物5、6两侧应加入限制酶BamHI、XbaI的识别序列。
（3）CaCl2可以增加细胞膜的通透性，提高转化的成功率；E的bdhA基因替换为cat基因（氨苄青霉素抗性基因），将转化处理的枯草芽孢杆菌置于含有氨苄青霉素的培养基中以筛选出目的菌株E-（目的基因被破坏，替换成氨苄青霉素抗性基因）。
（4）选用引物1、4进行PCR，如果bdhA基因被敲除，则只扩增出两边的序列，长度加起来为1540；由于引物可能与其他地方发生配对，可能存在非特异性扩增，因此通常还需进一步通过基因测序确认；平板划线法是指用接种环在固体培养基表面连续划线，逐步使接种物随所划之线分散，便于形成单个菌落的操作。
P
F1
F1自交后代F2的表型及比例
大花晚熟红果×小
花正常熟黄果
大花晚熟红果
大花晚熟：大花正常熟：小花晚熟：小花正
常熟=9：3：3：1
红果：黄果=3：1