人教版 (新课标)DNA的粗提取与鉴定授课课件ppt

这是一份人教版 (新课标)DNA的粗提取与鉴定授课课件ppt，共28页。PPT课件主要包含了基础知识，实验设计，操作提示等内容，欢迎下载使用。
讨论2：真核生物的遗传物质存在于哪里？
讨论1：生物体的遗传物质是什么？
讨论3：怎样才能将真核细胞内的遗传物质分离来？
1．通过阅读教材，能准确说出DNA的理化特性及提取和鉴定的原理；2．通过观看实验视频，初步学会DNA粗提取和鉴定方法，知道相关溶液的作用机理。
2ml/L浓度可使DNA溶解； 0.14ml/L浓度可使DNA析出。
二、酒精是一种常用有机溶剂，但DNA却不能溶于酒精；三、蛋白酶能水解蛋白质，但是对DNA没有影响四、大多数蛋白质不能忍受60－80℃的高温，而DNA在80℃以上才会变性
五、洗涤剂可以溶解细胞的细胞膜，去除脂质和蛋白质,但对DNA没有影响
①DNA与二苯胺（沸水浴加热）会被染成蓝色，因此，二苯胺可以作为鉴定DNA的试剂。②甲基绿（绿色）
（二）破碎细胞，获取含DNA的滤液
1、动物细胞的破碎：以鸡血为例，在鸡血细胞液中加入一定量的蒸馏水，同时用玻璃棒搅拌，过滤后收集滤液即可。
2、植物细胞的破碎：提取洋葱DNA时，在切碎的洋葱中加入一定的洗涤剂和食盐，进行充分的搅拌和研磨，过滤后收集研磨液。
加入洗涤剂和食盐的作用分别是？如果研磨不充分，会对实验结果产生什么影响？
洗涤剂是一些离子去污剂，能溶解细胞膜，有利于DNA释放；食盐有利于DNA溶解
会使细胞核内DNA释放不完全，提取DNA量变少，影响实验结果，导致看不到丝状沉淀物、用二苯胺鉴定不显示蓝色等
（三）去除滤液中的杂质
方案一：在滤液中加入NaCl，使NaCl溶液浓度为2ml/L，过滤除去不溶的杂质，再调节NaCl溶液浓度为0.14ml/L，析出DNA，过滤去除溶液中的杂质，再用2ml/L的NaCl溶解DNA。
方案二：直接在滤液中加入嫩肉粉，反应10-15min，嫩肉粉中木瓜蛋白酶能够分解蛋白质。
方案三：将滤液放在60-75℃的恒温水浴中保温10-15℃，注意严格控制温度范围。
（四） DNA的析出与鉴定
1、DNA的析出：将处理后的溶液过滤，加入与滤液体积相等的、冷却的酒精溶液（体积分数为95%），静置2～3min，溶液中会出现白色丝状物，这就是粗提取的DNA。用玻璃棒沿一个方向搅拌，卷起丝状物，并用滤纸吸去上面的水分。
2、DNA的鉴定：取两支20mL的试管，各加入物质的量浓度为2ml/L的NaCl溶液5mL，将丝状物放入其中一支试管中，用玻璃棒搅拌，使丝状物溶解。然后，向两支试管中各加入4mL的二苯胺试剂。混合均匀后，将试管置于沸水中加热5min，待试管冷却后，比较两支试管中溶液颜色的变化，看看溶解有DNA的溶液是否变蓝。
2.加入酒精和用玻璃棒搅拌时，动作要轻缓，以免加剧DNA分子的断裂，导致DNA分子不能形成絮状沉淀。
3.二苯胺试剂要现配现用，否则会影响鉴定的效果。
1.以血液为实验材料，每100ml加入3g柠檬酸钠，作为抗凝剂。
①加入柠檬酸钠溶液的目的是防止血凝固
④使2ml/L的NaCl溶液稀释至0.14ml/L使得DNA最大限度地释出
⑤使含DNA的黏稠物被留在纱布上
⑥使含DNA的黏稠物尽可能多的溶解于溶液中
⑦除去含DNA的滤液中的杂质
⑨ A出现蓝色 B无变化
鸡血细胞液中DNA的粗提取实验流程图
⑤过滤→取纱布上的滤物
2ml/LNaCl溶液
⑦加冷酒精使DNA析出（纯化）
1.在DNA的粗提取实验过程中，两次向烧杯中加入蒸馏水的作用是( )。A.稀释血液、冲洗样品B.使血细胞破裂、降低NaCl浓度使DNA析出C.使血细胞破裂、增大DNA溶解量 D.使血细胞破裂、提取含杂质较少的DNA
2.下列关于DNA粗提取与鉴定的说法正确的是（ ）A．氯化钠的浓度越低，对DNA的溶解度越大B．人血也可代替鸡血进行实验C．柠檬酸钠的主要作用是加速血细胞破裂D．DNA不能溶于酒精
3．在破碎鸡血细胞时，要先加入20ml的蒸馏水，其作用是（ ）A． DNA溶解于水B．血细胞破裂，DNA释放C．稀释血液，防止凝固D．有利于搅拌
4．若选择的实验材料为植物细胞，破碎细胞时要加入一定量的洗涤剂和食盐，加入食盐的目的是（ ）A．利于DNA的溶解B．分离DNA和蛋白质C．溶解细胞膜D．溶解蛋白质