人教版 (2019)选择性必修3第2章 细胞工程第2节 动物细胞工程一 动物细胞培养教课内容课件ppt

这是一份人教版 (2019)选择性必修3第2章 细胞工程第2节 动物细胞工程一 动物细胞培养教课内容课件ppt，共22页。PPT课件主要包含了动物细胞培养的概念，动物细胞培养的地位，营养条件，无菌无毒的环境，气体环境，取动物组织，课堂练习等内容，欢迎下载使用。
在治疗大面积烧伤时，通常采用的方法是取烧伤病人的健康皮肤进行自体移植。但对这样的病人来说，自体健康皮肤非常有限，使用他人皮肤来源又不足，而且会产生免疫排斥反应。
那么，怎样才能获得大量的自体健康皮肤？能不能用自体皮肤的单个细胞培养出可供移植的皮肤？
可以从病人身上取少量正常、健康的皮肤在体外进行培养、扩增；
目前，科学家还在研究对皮肤干细胞进行培养，以获得适合临床上使用的人造皮肤。
动物细胞工程的发展历程
从动物体中取出相关组织，将它们分散成单个细胞，然后在适宜的培养条件下，让这些细胞生长和增殖的技术。
一、动物细胞培养的条件
动物细胞工程的基本技术
动物体内的细胞之所以能够维持正常的生命活动，是因为机体给这些细胞提供了适宜的条件。你还记得有哪些条件吗？
体外培养动物细胞需要满足什么条件？
糖类、氨基酸、无机盐、维生素 ……
无菌、无毒的环境适宜的温度、pH和渗透压适宜的气体环境
将细胞所需的营养物质（糖类、氨基酸、无机盐、维生素等）按种类和所需量严格配制的培养基。
含有尚未全部研究清楚的细胞所需的营养物质
（1）对培养液和所有培养用具进行灭菌处理。
（2）在无菌环境下进行操作。
（3）培养液需要定期更换：
以便清除代谢物，防止细胞代谢物积累对细胞自身造成危害。
另外：可根据实际情况适量添加抗生素。
3、温度、pH和渗透压
维持细胞正常的形态和功能
与相应动物内环境的理化性质保持一致。
①人体细胞外液的温度一般维持在：
②正常人的血浆近中性，pH约为：
③渗透压：指溶液中溶质微粒对水的吸引力。
在37℃时，人的血浆渗透压约为：
（1）气体组成及作用：
通常采用培养皿或松盖培养瓶。
置于含有95%空气和5%CO2的混合气体的CO2培养箱中进行培养。
转入培养液进行原代培养
放入CO2培养箱中培养
机械法或用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理
二、动物细胞培养的过程
一般取材于动物胚胎或幼龄动物的组织、器官。
细胞分化程度低，增殖能力强，容易培养。
动物相关组织的选择： 幼龄动物 r 老龄动物
2、动物组织处理——制成细胞悬液
（1）将组织分散成单个细胞
用胰蛋白酶、胶原蛋白酶等处理一段时间
成块组织中，细胞与细胞靠在一起，彼此限制了生长和增殖
一是能使细胞与培养液充分接触，保证细胞所需要的营养供应；
（2）用培养液将细胞制成细胞悬液。
二是能保证细胞内有害代谢物的及时排出。
将细胞悬液放入培养皿或培养瓶内，置于适宜环境中进行原代培养。
【问题探究1】进行动物细胞培养时常用胰蛋白酶分散细胞，这说明细胞间的物质主要是什么成分？用胃蛋白酶行吗？
用胰蛋白酶分散细胞，说明细胞间的物质主要是蛋白质。
胃蛋白酶作用的适宜pH约为2，当pH大于6时，胃蛋白酶就会失去活性。多数动物细胞培养的适宜pH为7.2～7.4，胃蛋白酶在此环境中没有活性，所以用胃蛋白酶不行。
【问题探究2】胰蛋白酶会把细胞膜蛋白分解掉吗？
3、体外培养的动物细胞类型
能够悬浮在培养液中生长增殖。
需要贴附于某些基质表面才能生长增殖。
大多数细胞属于这种类型。
大多数细胞需要贴附于某些基质表面才能增殖，这类细胞往往贴附在培养瓶的瓶壁上，这种现象称为细胞贴壁。
会因细胞密度过大、有害代谢物积累和培养液中营养物质缺乏等因素而分裂受阻。
如何解决细胞分裂受阻的问题呢？
需要对细胞进行分瓶培养，让细胞继续增殖。
除受以上因素影响外，还会发生接触抑制现象。
当贴壁细胞分裂生长到表面相互接触时，细胞通常会停止分裂增殖的现象。
细胞发生接触抑制而分瓶培养之前的细胞培养，即动物组织经处理后的初次培养称为原代培养。
将分瓶后的细胞培养称为传代培养。
【思考】动物细胞的整个培养过程中可能多次用到胰蛋白酶或胶原蛋白酶？
第一次使用的目的是使组织细胞分散开；
贴壁细胞传代培养时使用的目的是使细胞从瓶壁上脱离下来，分散成单个细胞，便于分瓶后继续培养。
4、分瓶、进行传代培养
重新用胰蛋白酶等处理，使之分散成单个细胞，然后再用离心法收集
（2）将收集的细胞制成细胞悬液，分瓶培养
【问题探究3】悬浮生长细胞和贴壁生长细胞培养过程有什么不同？
原代培养→分裂受阻→离心法收集→制成细胞悬液→传代培养。
原代培养→分裂受阻→先胰蛋白酶处理→再离心法收集→制成细胞悬液→传代培养。
【问题探究4】动物细胞培养时，除了添加糖类、氨基酸等必要的营养成分外，往往还需添加血清等一些天然成分，原因是？
人们对细胞所需的营养物质尚未全部研究清楚。
血清等一些天然成分的营养成分比较齐全，可以弥补人工培养基的不足。
【问题探究5】植物组织培养与动物细胞培养的比较
①两技术手段培养过程中都进行有丝分裂，都不涉及减数分裂；②均需要无菌操作、无菌培养，需要适宜的温度、pH等条件。
（1）动物细胞培养体现了动物细胞的全能性（　 　）（2）培养保留接触抑制的细胞在培养瓶壁上可形成多层细胞（　 　）（3）悬浮培养的细胞直接用离心法收集，贴壁细胞需要用胰蛋白酶等处理后再用离心法收集（　 　） （4）动物细胞培养时，O2是细胞代谢所必需的，CO2的主要作用是维持培养液的pH（　　 ）
判断常考语句，澄清易混易错
1、下列不属于动物细胞培养的条件是(　　)A．无毒、无菌的环境 B．合成培养基通常需加血清、血浆C．pH＝7的中性环境 D．提供细胞代谢所需的O2
2、下列有关动物细胞培养的叙述，正确的是(　　)A．原代培养和传代培养前都可以使用胰蛋白酶B．培养过程中需将细胞置于含95%O2和5%CO2的混合气体的培养箱中C．配制合成培养基要加入糖、促生长因子、氨基酸、琼脂等成分D．培养液中添加适量的抗生素可为细胞提供无菌、无毒的培养环境