第一篇　主题五　专题(十二)　命题点2　微生物培养 2024年高考生物二轮复习课件+讲义

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1.培养基制备与微生物纯化技术
特别提醒　(1)为了确定培养基的灭菌是否合格，微生物实验一般会设置空白对照：随机取若干灭菌后的空白平板培养基在适宜条件下培养一段时间，观察培养基上是否有菌落生成。(2)观察菌落需用固体培养基，因此培养基要添加凝固剂，如琼脂。(3)倒平板的温度一般在50 ℃左右较为适宜，温度过高会烫手，温度过低培养基又会凝固。
2.微生物分离与计数的实例
1.(2022·江苏，3)下列是某同学分离高产脲酶菌的实验设计，不合理的是A.选择农田或公园土壤作为样品分离目的菌株B.在选择培养基中需添加尿素作为唯一氮源C.适当稀释样品是为了在平板上形成单菌落D.可分解酚红指示剂使其褪色的菌株是产脲酶菌
2.(2023·山东，15)平板接种常用在微生物培养中。下列说法正确的是A.不含氮源的平板不能用于微生物培养B.平板涂布时涂布器使用前必须进行消毒C.接种后未长出菌落的培养基可以直接丢弃D.利用以尿素为唯一氮源的平板能分离出合成脲酶的微生物
(1)为纯化菌种，在鉴别培养基上划线接种纤维素降解细菌，培养结果如图所示。图中Ⅰ、Ⅱ区的细菌数量均太多，应从Ⅲ区挑取单菌落(2020·江苏，19)(　　)
(2)接种后的培养皿要倒置，以防培养基污染(2019·江苏，12)(　　)(3)涂布用的菌浓度应控制在30～300个/mL(2021·江苏，18)(　　)
提示：为了保证结果准确，一般选择菌落数为30～300的平板进行计数，而非涂布用的菌浓度控制在30～300个/mL。
(4)解脂菌能利用分泌的脂肪酶将脂肪分解成甘油和脂肪酸并吸收利用。脂肪酸会使醇溶青琼脂平板变为深蓝色。将不能直接吸收脂肪的甲、乙两种菌分别等量接种在醇溶青琼脂平板上培养。甲菌菌落周围呈现深蓝色，乙菌菌落周围不变色，实验中所用培养基以脂肪为唯一碳源(2021·山东，14)(　　)
提示：乙菌在醇溶青琼脂平板上能形成菌落，但菌落周围不变色，即乙菌不能分解脂肪但能在该培养基上生长繁殖，说明所用培养基不是以脂肪为唯一碳源。
(5)(2019·全国Ⅰ,37节选)将土壤悬浮液接种在培养基[氯化钠(5 g/L)，硝酸铵(3 g/L)，其他无机盐(适量)，X(15 g/L)]上，筛选土壤中能高效降解X的细菌(仅含有C、H两种元素)。培养一段时间后，不能降解X的细菌比例会 ，其原因是_________________________________ _ 。(6)(2022·河北，23节选)培养过程中抽样检测活菌数量时，应采用____ (填“稀释涂布平板法”或“显微镜直接计数法”)，其原因是_______________________________________________________________________________________________________。
不能降解X的细菌因缺乏碳源不能增
殖，而能降解X的细菌能够增殖
用稀释涂布平板法在培养基上看到的每一个菌落都来自一个活细胞，而显微镜直接计数法不能直接区分死菌和活菌
题组　微生物的培养、分离与计数1.为了检测冰淇淋中的大肠杆菌含量是否超标，下列有关做法正确的是A.配制培养基，高压蒸汽灭菌后，调节pH至弱碱性B.将冰淇淋溶化后，进行梯度稀释，再用平板划线法进行接种C.置于37 ℃恒温箱中培养12 h，统计培养基中长出来的菌落数D.该实验应设置未接种样品的空白对照，以检测培养基是否被污染
2.一次性口罩的主要成分为聚丙烯纤维(PP)，某科研团队准备从土壤中筛选出能高效降解一次性口罩的细菌。下列操作错误的是A.培养基中应以PP作为唯一碳源B.挖取的土壤和装土壤的纸袋都无需灭菌C.可以用稀释涂布平板法或平板划线法进行接种D.培养时恒温箱的温度控制在30～37 ℃