高中生物沪科版 (2019)选修3一、间接计数法课后作业题

【优质】一、间接计数法-1同步练习

一．单项选择

1．在农田土壤的表层自生固氮菌较多。将用表层土制成的稀泥浆接种到特制的培养基上培养，可将自生固氮菌与其他细菌分开，对培养基的要求是（　　）

①加抗生素    ②不加抗生素    ③加氮素           ④不加氮素

⑤加葡萄糖   ⑥不加葡萄糖   ⑦37℃恒温箱中培养  ⑧28～30℃温度下培养

A．①③⑤⑦ B．②④⑥⑧ C．②④⑤⑧ D．①④⑥⑦

2．下列关于微生物的培养和运用的叙述错误的是（　　）

A. 通过消毒不能杀死物体内所有的微生物

B. 利用平板划线法可以统计样品中活菌的数目

C. 微生物所用的培养基成分和植物组织培养用的培养基成分不同

D. 平板划线法和稀释涂布平板法常用于微生物的接种

3．高压蒸汽．酒精擦拭．火焰灼烧三种处理方法分别适用于哪些材料（或用具）的杀菌处理（　　）

A．接种环．培养基．超净工作台 B．接种环．操作者的双手．培养基

C．培养基．操作者的双手．接种环 D．接种环．超净工作台．培养基

4．某同学在稀释倍数为106的培养基上测得平板上菌落数的平均值为215，那么每毫升样品中菌落数是（涂布平板时所用稀释液的体积为0．1mL）（    ）

A．2.15×108 B．2.15×109 C．215 D．21.5

5．平板划线法和稀释涂布平板法是常用的两种接种方法。下列相关叙述错误的是（    ）

A．平板划线法要求在培养基表面连续划线，且除第一次划线外，每一次划线的起点都是上一次划线的终点

B．除第一次划线前需要将接种环灼烧灭菌外，以后的划线不用灭菌即可划线

C．如果菌液本来浓度不高，则可以适当降低稀释倍数

D．“充分稀释”和“连续划线”的目的都是获得由单一细胞繁殖而成的菌落

6．化细菌是化能自养菌，通过 NH4+→NO2- →NO3- 的氧化过程获取菌体生长繁殖所需的能量，在水产养殖中具有重要作用。图是分离硝化细菌的培养基配方，下列说法错误的是（　　）

A. （NH4）2SO4可作为硝化细菌的氮源和能源

B. 培养基中的 Na2CO3是硝化细菌的主要碳源

C. K2HPO4和 NaH2PO4能维持培养基的 pH

D. 硝化细菌能清除水体中的铵态氮及亚硝态氮

7．用来判断选择培养基是否起到了选择作用，需要设置的对照是（　　）

A．未接种的选择培养基 B．未接种的LB培养基

C．接种土壤稀释液的LB培养基 D．接种土壤稀释液的选择培养基

8．下列关于菌种的选育的叙述，不正确的是（    ）

A．自然选育菌种费时且盲目性大

B．诱变育种原理的基础是基因突变

C．采用基因工程的方法可构建工程菌

D．传统发酵技术和现代工业发酵都需要选育菌种

9．耐辐射球菌对射线具有超强耐受力，其P基因突变株受射线照射后生存率显著降低。研究者利用P基因成功转化不耐辐射的酵母菌，经射线照射后检测发现，与非转基因酵母菌相比，转基因酵母菌三种抗氧化酶含量显著增加。相关叙述不合理的是（    ）

A．采用划线法将酵母菌接种到液体培养基中培养

B．酵母菌的接种．培养等操作需保证无杂菌污染

C．耐辐射球菌对射线的耐受力与P基因密切相关

D．P基因通过增强细胞抗氧化能力使细胞具有耐受力

10．下列有关微生物的培养和分离的叙述，正确的是（    ）

A．灼烧接种环后，为避免其他杂菌的干扰，应立即伸入菌液取菌种

B．若要检测培养基是否被污染，可将未接种的培养基在相同条件下进行培养

C．在第一次划线前灼烧接种环和每次划线前灼烧接种环的目的相同

D．若对大肠杆菌进行计数，稀释涂布平板法统计的数目会比实际值略大

11．不同的微生物对营养物质的需要各不相同。下列有关一种以CO2为唯一碳源的自养微生物营养的描述中，不正确的是（　　）

A．氮源物质为该微生物提供必要的氮素                 

B．碳源物质也为该微生物提供能量

C．无机盐是该微生物不可缺少的营养物质

D．水是该微生物的营养要素之一

12．化学需氧量（COD）是衡量污水中有机污染物含量的重要指标。从某污水处理系统中分离出多种细菌，经分离筛选获得具有高效降低COD能力的菌株，过程如图所示。下列相关说法错误的是（　　）

A．可用平板划线法统计菌液中的细菌数来确定接种时菌液的最佳稀释倍数

B．制备牛肉膏蛋白胨固体培养基时，需灭菌处理并冷却到50℃左右进行倒平板

C．由菌落分布情况可知，在该固体培养基上接种的方法是稀释涂布平板法

D．从固体培养基中挑取单菌落后接种到液体培养基中培养，目的主要是扩大培养

13．下列针对微生物纯培养的说法，错误的是（　　）

A. 倒平板操作中，等待平板冷却凝固后，要将平板倒置

B. 用于培养微生物的培养基中一定含有氮源和碳源

C. 若皿盖和皿底之间溅上培养基，这个培养基不可再用

D. 微生物纯培养形成的菌落只出现在固体培养基表面或内部

14．下列有关微生物分离，培养和计数的叙述，正确的是（    ）

A．分离土壤中微生物时，需要先对土壤灭菌，再进行培养

B．测定土壤中细菌数量时，一般选用103-107倍的稀释液

C．测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法或平板划线法进行计数

D．统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落

15． 《齐民要术》记载：“作盐水，令极咸，于盐水中洗菜。若先用淡水洗者，菹烂。洗菜盐水，澄取清者，泻者瓮中，令没菜把即止，不复调和”。下列关于制作泡菜相关的说法，错误的是

A. 咸盐水洗菜具有消毒作用          B. 盐水令没菜把营造无氧环境

C. 盐水浓度高亚硝酸盐含量增加      D. 一般腌制10d后食用泡菜最好

16．嗜热菌又称高温细菌，是一类生活在火山口及其周围区域．温泉．工厂高温废水排放区等高温环境中的微生物。研究者从温泉中筛选高效产生高温淀粉酶的嗜热菌，其筛选过程如图1所示。将得到的菌悬液转接于同时含有葡萄糖和淀粉作碳源的固体培养基上培养，得到若干菌落后用碘液作显色处理，结果如图2所示。下列说法错误的是（    ）

A．热泉的高温状态淘汰了绝大多数的微生物保留了嗜热菌

B．甲．乙试管为液体培养基，液体培养基能分离获得水生噬热杆菌单菌落

C．丙中噬热菌数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和高温条件

D．图2中周围不显蓝色的菌落含有所需的嗜热菌

17．下列有关实验的操作中，错误的是（    ）

①煮沸消毒可以杀死微生物的营养细胞和部分芽孢

②接种操作要在酒精灯火焰附近进行

③对于不耐高温的液体，如牛奶，用巴氏消毒法消毒

④家庭制作葡萄酒时要将容器和葡萄进行灭菌

⑤培养基要进行高压蒸汽灭菌

⑥加入培养基中的指示剂和染料不需要灭菌

⑦接种环应采用火焰灼烧的方式灭菌

A．①③ B．②④ C．⑤⑦ D．④⑥

18．植物组织培养的培养基和微生物培养所配制的培养基的主要区别为（    ）

A．植物组织培养的培养基一般含植物激素，微生物培养基不含植物激素

B．植物组织培养的培养基不需要氨基酸，微生物培养基含各种氨基酸

C．植物组织培养的培养基不需碳源，微生物培养基含碳源

D．植物组织培养的培养基含维生素，微生物培养基不含维生素

参考答案与试题解析

1．【答案】C

【解析】

自生固氮微生物属于细菌，其细胞壁的主要成分是肽聚糖，对抗生素敏感；自生固氮微生物的代谢类型是异养需氧型，是一类能够独立进行固氮的微生物。

解答：

①自生固氮微生物属于细菌，其细胞壁的主要成分是肽聚糖，对抗生素敏感，①错误；

②自生固氮微生物属于细菌，对抗生素敏感，培养基不能添加抗生素，②正确；

③自生固氮微生物是一类能够独立进行固氮的微生物，培养基中可以不添加氮源，③错误；

④自生固氮微生物是一类能够独立进行固氮的微生物，培养基中可以不添加氮源，④正确；

⑤自生固氮微生物的代谢类型是异养需氧型，培养基必须添加葡萄糖作为碳源和能源，⑤正确；

⑥自生固氮微生物的代谢类型是异养需氧型，培养基必须添加葡萄糖作为碳源和能源，⑥错误；

⑦自生固氮微生物的最适温度在28℃～30℃之间，⑦错误；

⑧自生固氮微生物的最适温度在28℃～30℃之间，⑧正确。

故选C。

2．【答案】B

【解析】A．消毒是使用较为温和的物理或化学方法杀死物体表面或内部的部分微生物（不包芽孢和孢子），因此通过消毒不能杀死物体内所有的微生物，A正确；

B．利用平板划线法不可以统计样品中活菌的数目，但利用稀释涂布平板法可以统计样品中活菌的数目，B错误；

C．微生物所用的培养基成分和植物组织培养用的培养基成分不同，如植物组织培养的培养基中需要加入植物激素，C正确；

D．平板划线法和稀释涂布法常用于微生物的接种，D正确。

故选B。

3．【答案】C

【解析】

4．【答案】B

【解析】

对微生物进行分离．计数常用的接种方法是稀释涂布平板法，估算每毫升样品中的细菌数时，往往选取30～300的平板，取至少三个平板的平均值，每毫升样品中的细菌数=（平板的平均菌落数÷涂布的体积）×稀释的倍数；由于当两个或多个细胞连在一起时平板上观察的是一个菌落，因此估算的菌落数少于实际菌落数。

解答：

根据分析中相关计算公式，稀释倍数为106，0.1mL稀释液的菌落数的平均值为215，则每毫升样品中菌落数为215÷0.1×106=2.15×109，因此ACD错误，B正确。

故选B。

5．【答案】B

【解析】

6．【答案】B

【解析】A．题中显示，硝化细菌能够通过NH4+→NO2-→NO3-的氧化过程获取菌体生长繁殖所需的能量，故（NH4）2SO4可作为硝化细菌的氮源和能源，A正确；

B．由分析可知，硝化细菌是化能自养菌，以培养基中的NH4+为氮源和能源，能够将二氧化碳和水合成为糖类，故硝化细菌的碳源是二氧化碳，B错误；

C．K2HPO4和NaH2PO4属于无机盐，能够调节和维持微生物细胞的渗透压和pH，C正确；

D．由题干信息可知，硝化细菌能进行NH4+→NO2-→NO3-的氧化过程，故可用硝化细菌清除水体中的铵态氮及亚硝态氮，D正确。

故选B。

7．【答案】C

【解析】

对照实验是指除所控因素外其它条件与被对照实验完全对等的实验。判断选择培养基是否起到了选择作用，则接种了的选择培养基是实验组，而接种了的LB培养基（普通培养基）属于对照组。

解答：

将菌液稀释相同的倍数，在LB培养基上生长的菌落数目应明显多于选择培养基上的数目，因此LB培养基是对照组。对照组遵循的原则是单一变量，所以需要与选择培养基一样接种．培养，因此选项中接种土壤稀释液的LB培养基属于对照组，接种土壤稀释液的选择培养基属于实验组，C正确，ABD错误。

故选C。

8．【答案】D

【解析】

菌种的选育方式有：

①自然选育：自然选育的菌种来源于自然界．菌种保藏机构或生产过程，从自然界中选育菌种的过程较为复杂，而从生产过程或菌种保藏机构得到菌种的自然选育过程较为简单；

②杂交育种：杂交育种杂交育种法杂交育种指不同种群．不同基因型个体间进行杂交，并在其杂种后代中通过选择而育成纯合品种的方法。杂交可以使双亲的基因重新组合，形成各种不同的类型，为选择提供丰富的材料；

③基因工程育种：它是用人为的方法将所需要的某一供体生物的遗传物质——DNA大分子提取出来，在离体条件下用适当的工具酶进行切割后，把它与作为载体的DNA分子连接起来，然后与载体一起导入某一更易生长．繁殖的受体细胞中进行正常的复制和表达，从而获得新物种。

解答：

A．自然选育菌种要到相应的环境从众多的微生物中进行筛选所以费时且盲目性大，A正确；

B．菌种的选育可以采用诱变育种的方法，其原理是基因突变，B正确；

C．可以采用基因工程定向构建工程菌的方法获得，C正确；

D．现代工业发酵需要选育菌种，传统发酵技术一般利用自然界中的菌种，不需要选育菌种，D错误。

故选D。

9．【答案】A

【解析】

微生物接种常用的两种方法：①平板划线法：将已经熔化的培养基倒入培养皿制成平板，接种，划线，在恒温箱里培养。在线的开始部分，微生物往往连在一起生长，随着线的延伸，菌数逐渐减少，最后可能形成单个菌落。②稀释涂布平板法：将待分离的菌液经过足够稀释后，均匀涂布在培养皿表面，经培养后，可形成单菌落。

题意分析，耐辐射球菌对射线具有超强耐受力，其P基因突变株受射线照射后生存率显著降低，显然P基因的表达产物能增强球菌对射线的耐受力，然后研究者用P基因成功转化不耐辐射的酵母菌，经射线照射后检测发现，与非转基因酵母菌相比，转基因酵母菌三种抗氧化酶含量显著增加，从而更进一步证明P基因与球菌对射线的超强耐受力有关，且对射线的耐受力是通过抗氧化酶来实现的。

解答：

A．采用划线法只能将酵母菌接种到固体体培养基中培养，A错误；

B．获得纯净培养物的关键是无菌技术，酵母菌的接种．培养等操作过程也不例外，需保证无杂菌污染，B正确；

C．题意显示，耐辐射球菌对射线具有超强耐受力，其P基因突变株受射线照射后生存率显著降低据此可推测，耐辐射球菌对射线的耐受力与P基因密切相关，C正确；

D．成功导入P基因的酵母菌三种抗氧化酶含量显著增加，显然P基因通过增强细胞抗氧化能力使细胞具有耐受力，D正确。

故选A。

10．【答案】B

【解析】

11．【答案】B

【解析】

培养基的组成成分包括碳源．氮源，水．无机盐，有的还有生长因子，以CO2为唯一碳源的培养基培养自养微生物，培养基中还必须提供氮源．水．无机盐。

解答：

A．由分析可知，培养基中还必须提供氮源，氮源物质为微生物提供必要的氮素，A正确；

B．该碳源是二氧化碳，属于无机物，不能作为微生物的能源物质，B错误；

C．由分析可知，培养基中还必须提供无机盐，无机盐是微生物不可缺少的营养物质，C正确；

D．一切生物离不开水，水是微生物的营养要素之一，D正确。

故选B。

12．【答案】A

【解析】

13．【答案】B

【解析】A．到平板时，为了避免污染，等待平板冷却凝固后，要将平板倒置，A正确；

B．用于培养自养生物的培养基不需要加入碳源，B错误；

C．若皿盖和皿底之间溅上培养基，容易造成污染，不可再用，C正确；

D．微生物纯培养时，会在固体培养基的表面或内部形成菌落，在液体培养基中不会形成菌落，D正确。

故选B。

14．【答案】D

【解析】

微生物接种的方法中最常用的是平板划线法和稀释涂布平板法，前者是指通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种，逐步稀释分散到培养基的表面，后者是将菌液进行一系列的梯度稀释，然后将不同稀释度的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面，进行培养。

解答：

A．分离土壤中微生物时，不能先对土壤灭菌，再进行培养，因为灭菌后就不能分离出微生物了，A错误；

B．测定土壤中细菌数量时，一般选用104～106倍的稀释液，B错误；

C．测定土壤样品中的细菌数目，常用稀释涂布平板法进行计数，平板划线法不适宜进行计数，C错误；

D．统计菌落数目时，当样品的稀释度足够高时，一个活菌会形成一个菌落，D正确。

故选D。

15．【答案】 C

【解析】温度过高．食盐用量过低．腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加，C错误。

16．【答案】B

【解析】

实验室中微生物的筛选应用的原理：人为提供有利于目的菌株生长的条件（包括营养．温度．pH等），同时抑制或阻止其他微生物生长。

解答：

A．热泉的高温状态淘汰了绝大多数的微生物保留了嗜热菌，A正确；

B．甲．乙试管为液体培养基，液体培养基不能分离出单菌落，B错误；

C．丙中噬热菌数量迅速增加，培养过程中需保证充足的营养和高温条件，C正确；

D．图2中周围不显蓝色的菌落，说明其产生的淀粉酶可以在在高温下分解淀粉，所以周围不显蓝色的菌落含有所需的嗜热菌，D正确。

故选B。

17．【答案】D

【解析】

使用强烈的理化因素杀死物体内外一切微生物的细胞．芽孢和孢子的过程称为灭菌，常用的方法有灼烧灭菌．干热灭菌和高压蒸汽灭菌。消毒是指用较为温和的物理或化学方法仅杀死物体体表或内部的一部分微生物的过程。常用的方法有煮沸消毒法．巴氏消毒法．紫外线或化学药物消毒法等。

解答：

①100℃煮沸5～6min可以杀死微生物细胞和一部分芽孢，①正确；

②酒精灯火焰附近存在一个无菌区，为了无菌操作，接种操作要在酒精灯火焰附近进行，②正确；

③对牛奶这种不耐高温的液体可用巴氏消毒法消毒，③正确；

④利用葡萄制作葡萄酒利用的是附着于葡萄皮表面的野生型酵母菌，所以制作葡萄酒时葡萄不进行灭菌，以免杀死酵母菌，④错误；

⑤培养基通常用高压蒸汽灭菌的方法进行灭菌，⑤正确；

⑥指示剂和染料混有微生物，故加入培养基前需灭菌，⑥错误；

⑦接种环应采用火焰灼烧的方式灭菌，即用灼烧灭菌法进行灭菌，⑦正确。

故选D。

18．【答案】A

【解析】

植物组织培养一般用MS培养基，MS培养基含大量元素．微量元素．有机物，有机物包括甘氨酸．维生素B1．维生素B2．烟酸．肌醇．蔗糖．琼脂等，特别包括植物生长素．细胞分裂素等植物生长调节物质，微生物培养基不含植物激素；

MS培养基含氨基酸如甘氨酸，有碳源如蔗糖，含维生素B1和维生素B6，微生物培养基中并不是所有氨基酸都加，有些微生物在生长发育过程中可自行合成，可以不加；有些微生物合成能力有限，氨基酸可多加。

解答：

A．植物组织培养所用的MS培养基和微生物培养所用的培养基的主要区别是植物组织培养基一般含植物激素，微生物培养基不含植物激素，A正确；

B．植物组织培养基需要氨基酸，微生物培养基也需要氨基酸，微生物培养基中并不是所有氨基酸都含有，有些微生物在生长发育过程中可自行合成所需的某些氨基酸，可以少加；有些微生物合成能力有限，氨基酸可多加，不是主要区别，B错误；

C．植物组织培养基需要蔗糖做碳源，微生物培养基有些（异养型微生物培养基）也含碳源，C错误；

D．植物组织培养基需要维生素，某些微生物培养基也需要维生素，D错误。

故选A。